【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及微生物應用，具體涉及一種裂解性噬菌體vb_vcap_r25d及其應用。
技術介紹
1、弧菌(vibrio)是一類嗜鹽的革蘭氏陰性細菌，廣布于河口和沿海生態系統，屬于條件致病菌。常見致病弧菌主要有霍亂弧菌(vibrio?cholera)、溶藻弧菌(v.alginolyticus)、副溶血弧菌(v.parahaemolyticus)、坎氏弧菌(v.campbellii)和哈維氏弧菌(v.harveyi)等。越來越多的文獻報道了由弧菌引發的各種水產動物病害，如副溶血弧菌引起的致死性肝胰腺壞死病(septic?hepatopancreatic?creatic?necrosisdisease，shad)和急性肝胰腺壞死病(acute?hepatopancreatic?creatic?necrosisdisease，phad)是嚴重影響蝦類的水產養殖疾病，該疾病已在全球范圍內造成巨大經濟損失；溶藻弧菌引發的zoea?ii綜合征也導致南美白對蝦蛻皮受損而大量死亡。目前關于坎氏弧菌的致病研究相對較少，但已有文獻表明其可引起發光病、急性肝胰腺壞死等水產疾病，dong等人從凡納濱對蝦養殖場分離得到一株攜帶pirvp基因的坎氏弧菌(20130629003s01)，浸泡在該坎氏弧菌懸浮液中的凡納濱對蝦在12小時內開始出現典型的ahpnd癥狀，累積死亡率在36小時內達到100％，具有較強致病性；haldar等人從患病對蝦中分離得到26株坎氏弧菌，以鹵蟲為模型的侵染實驗表明其中8株坎氏弧菌具有高致病性，3株坎氏弧菌具有中等致病性，且致病菌株在
2、然而，抗生素濫用帶來了嚴重的環境健康、生態穩定、生命健康和食品安全等問題，尋找替代抗生素的綠色高效防治手段迫在眉睫。噬菌體作為天然的抗菌劑，能高效、特異地裂解宿主，對環境和微生物群落友好，在水產養殖治療弧菌病害中展現出巨大潛力。目前，許多研究已分離獲得了弧菌噬菌體，通過測定其生物學特性和組學特性來評估噬菌體在水產養殖中治療弧菌病害的潛力。噬菌體的裂解性、殺菌效率以及環境穩定性等特征均是評估噬菌體應用潛力以及噬菌體雞尾酒配制的重要依據。在水產養殖環境中，噬菌體的絕對裂解性是投入應用的重要前提，不僅能夠高效殺滅病原菌，同時由于絕對裂解性噬菌體不會進入溶原狀態，防止了水平基因的轉移和耐藥性基因的傳播，從而減少細菌耐藥性的發生。噬菌體的殺菌效果同樣是評估其應用潛力的重要標準之一，stalin等人從印度某斑節對蝦養殖池分離出一株副溶血弧菌及其噬菌體，噬菌體的一步生長曲線和殺菌曲線均顯示出對宿主副溶血弧菌的高裂解能力(爆發量為2.9×108pfu/min，添加噬菌體的實驗組od值始終低于0.2)，侵染實驗中噬菌體治療組的斑節對蝦存活率顯著提高。此外，噬菌體的環境穩定性是評估其在生產、銷售和實際環境應用的重要標準。cai等人分離到一株溶藻弧菌噬菌體vb_va_val-yong3，通過評估其熱穩定性、ph耐受性、紫外線耐受性等環境穩定性，證明vb_va_val-yong3耐氯仿、相對耐紫外線，在4-50℃和ph?5-12范圍內穩定后，采用浸泡法對三疣梭子蟹幼蟲進行了噬菌體治療試驗，vb_va_valyong3治療使幼蟲的存活率從33.33％提高到51.67％。
3、綜上所述，噬菌體因其高度的宿主特異性和較低的環境影響，被認為是一種潛在的抗生素替代品。它們可以用來控制或預防細菌性感染，減少抗生素的使用，從而降低細菌耐藥性的發展，為水產養殖業提供了一種新的、環保的疾病控制策略，有助于保護生態環境和提高食品安全。
技術實現思路
1、有鑒于此，本專利技術的目的在于提供一種裂解性噬菌體vb_vcap_r25d及其在水產養殖環境中防治弧菌病害的應用。
2、針對上述目的，本專利技術采用如下技術方案實現：
3、本專利技術的第一個目的是提供一種裂解性噬菌體vb_vcap_r25d，其保藏編號為：gdmcc?no:65167-b1。
4、本專利技術以坎氏弧菌模式菌株v.campbellii?lmg?11216t為宿主，從廈門海鮮市場的廢水中分離得到兩株強裂解性噬菌體vb_vcap_r24d和vb_vcap_r25d，通過形態觀察、全基因測序和系統發育分析確定了該噬菌體的形態及分類地位，并將vb_vcap_r25d命名為vibrio?campbellii?phage?vb_vcap_r25d，于2024年09月20日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心(gdmcc)，保藏編號為gdmcc?no:65167-b1，保藏地址為：廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓，郵編：510070。
5、本專利技術的第二個目的是提供一種噬菌體組合物，其包含有裂解性噬菌體vb_vcap_r25d。
6、本專利技術的第三個目的是提供上述的裂解性噬菌體vb_vcap_r25d或噬菌體組合物在預防和/或殺滅坎氏弧菌中的應用。
7、優選的，所述的坎氏弧菌為v.campbellii?lmg?11216t。
8、本專利技術的第四個目的是提供上述的裂解性噬菌體vb_vcap_r25d或噬菌體組合物在制備控制水產養殖弧菌感染的產品中的應用。
9、優選的，所述的產品包括藥品、消毒劑、水體凈化劑、飼料或飼料添加劑。
10、優選的，所述的弧菌感染包括坎氏弧菌感染，所述的坎氏弧菌為v.campbelliilmg?11216t。
11、本專利技術的第五個目的是提供一種控制水產養殖弧菌感染的產品，其含有上述的裂解性噬菌體vb_vcap_r25d或噬菌體組合物。
12、本專利技術的第六個目的是提供一種體外防治坎氏弧菌有害感染的方法，該方法是利用上述的裂解性噬菌體vb_vcap_r25d或噬菌體組合物對坎氏弧菌的裂解作用在體外殺滅坎氏弧菌。進一步地，所述的坎氏弧菌為v.campbellii?lmg?11216t。
13、本專利技術以坎氏弧菌vibrio?campbellii?lmg?11216t為宿主，從廈門海鮮市場的養殖廢水中分離得到兩株噬菌體vb_vcap_r24d和vb_vcap_r25d。兩株噬菌體出斑迅速，噬菌斑中心透亮，僅存在少數未被裂解的抗性弧菌，表明噬菌體對宿主具有強裂解性。通過基因組分析表明，r24d和r25d均含有編碼溶菌酶(r24d中orf?37；r25d中orf?35)和細胞壁水解酶(r24d中orf?48；r25d中orf?45)的相關基因，使得噬菌體能夠有效破壞弧菌細胞壁結構，從而促進噬菌體對弧菌的侵染和裂解。并且，兩株噬菌體均不含有溶原相關基因，噬菌體侵染宿主過程中不會進入溶原狀態，在其裂解相關基因的作用下均能有效裂解宿主，減少了水平基因轉移的風險。利用phage?ai軟件預測結果也證實了兩株噬菌體具有100％裂解潛力。噬菌體的絕對裂解性是其應用于疾病治療的先決條件。在應用于噬菌體治療時，強裂解性噬菌體能迅速而有效殺滅宿主細菌，控制病原體數量本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.裂解性噬菌體vB_VcaP_R25D，保藏編號為：GDMCC?No:65167-B1。
2.含有權利要求1所述的裂解性噬菌體vB_VcaP_R25D的噬菌體組合物。
3.權利要求1所述的裂解性噬菌體vB_VcaP_R25D或權利要求2所述的噬菌體組合物在預防和/或殺滅坎氏弧菌中的應用。
4.權利要求1所述的裂解性噬菌體vB_VcaP_R25D或權利要求2所述的噬菌體組合物在制備控制水產養殖弧菌感染的產品中的應用。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述的產品包括藥品、消毒劑、水體凈化劑、飼料或飼料添加劑。
6.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述的弧菌感染包括坎氏弧菌感染。
7.根據權利要求3或6所述的應用，其特征在于，所述的坎氏弧菌為V.campbellii?LMG
8.一種控制水產養殖弧菌感染的產品，其特征在于，含有權利要求1所述的裂解性噬菌體vB_VcaP_R25D或權利要求2所述的噬菌體組合物。
9.一種體外防治坎氏弧菌有害感染的方法，其特征在于，利用權利要求
10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，所述的坎氏弧菌為V.campbellii?LMG11216T。
...【技術特征摘要】
1.裂解性噬菌體vb_vcap_r25d，保藏編號為：gdmcc?no:65167-b1。
2.含有權利要求1所述的裂解性噬菌體vb_vcap_r25d的噬菌體組合物。
3.權利要求1所述的裂解性噬菌體vb_vcap_r25d或權利要求2所述的噬菌體組合物在預防和/或殺滅坎氏弧菌中的應用。
4.權利要求1所述的裂解性噬菌體vb_vcap_r25d或權利要求2所述的噬菌體組合物在制備控制水產養殖弧菌感染的產品中的應用。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述的產品包括藥品、消毒劑、水體凈化劑、飼料或飼料添加劑。
6.根據權利要求4所述的應用，...
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。