【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于化學分析，具體涉及一種分離并測定恩扎盧胺sm3及其相關雜質的hplc方法。
技術介紹
1、恩扎盧胺(enzalutamide)是一種雄激素受體抑制劑，主要用于治療晚期去勢耐受前列腺癌的治療，可有效延長患者生存期。恩扎盧胺能夠競爭性地抑制雄激素與受體的結合，并且能抑制雄激素受體的核轉運以及該受體與dna的相互作用。
2、sm3為合成恩扎盧胺的起始原料，其化學名為4-氨基-2-(三氟甲基)苯甲腈，分子式為c8h5f3n2，結構式如式ⅰ所示。經研究發現，恩扎盧胺起始原料sm3中可能存在雜質sm3a、雜質sm3b、雜質sm3c、雜質sm3d、雜質sm3e、雜質sm3f、雜質sm3g、雜質sm3h、雜質sm3i、雜質sm3j、雜質sm3k和雜質sm2a共計12種雜質，這些雜質的存在直接影響著終產物恩扎盧胺的產率和純度。
3、
4、在前期研究中，我們探索了恩扎盧胺和恩扎盧胺原料sm3中其他雜質的分析方法并申請了專利，包括申請號為202211214015.9、202211214058.7等的專利技術專利，其中202211214015.9專利提出以水為流動相a、甲醇為流動相b，分離測定恩扎盧胺原料sm3及雜質sm3k和其他10個已知雜質；202211214058.7專利則以三氟乙酸水溶液為流動相a，以乙腈/甲醇/四氫呋喃的混合溶液為流動相b，分離測定恩扎盧胺和/或恩扎盧胺z3中的26種雜質。雖然上述專利公開了恩扎盧胺原料sm3及其分析方法，但是無法實現恩扎盧胺原料sm3中雜質sm3a、雜質sm3
5、目前暫無可以將恩扎盧胺起始原料sm3中sm3a、sm3b、sm3c等雜質進行分離的法定分析方法，也未檢索到相關文獻分析資料，因此有必要進一步探索出簡單有效的方法來實現恩扎盧胺起始原料sm3中sm3a、sm3b、sm3c等雜質的分離測定。
技術實現思路
1、有鑒于此，本專利技術的目的之一在于提供一種利用hplc方法分離恩扎盧胺sm3及其相關雜質的方法，該方法可同時分離恩扎盧胺起始原料sm3與雜質sm3a、雜質sm3b、雜質sm3c、雜質sm3d、雜質sm3e、雜質sm3f、雜質sm3g、雜質sm3h、雜質sm3i和雜質sm3j，且方法靈敏度高、耐用性好，為后續相關雜質的定性和定量提供了技術支持。
2、為實現上述目的，本專利技術采用以下技術方案：
3、利用hplc方法分離恩扎盧胺sm3及其相關雜質的方法，所述相關雜質為雜質sm3a、雜質sm3b、雜質sm3c、雜質sm3d、雜質sm3e、雜質sm3f、雜質sm3g、雜質sm3h、雜質sm3i和雜質sm3j中的任一種或多種；所述恩扎盧胺sm3的結構式如式ⅰ所示；所述雜質sm3a的結構式如式ⅱ所示，所述雜質sm3b的結構式如式ⅲ所示，所述雜質sm3c的結構式如式ⅳ所示，所述雜質sm3d的結構式如式ⅴ所示，所述雜質sm3e的結構式如式ⅵ所示，所述雜質sm3f的結構式如式ⅶ所示，所述雜質sm3g的結構式如式ⅷ所示，所述雜質sm3h的結構式如式ⅸ所示，所述雜質sm3i的結構式如式ⅹ所示，所述雜質sm3j的結構式如式?所示；所述hplc方法是采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相，采用流動相a和流動相b為流動相，通過所述梯度洗脫依次將雜質sm3c、雜質sm3d、雜質sm3b、恩扎盧胺sm3、雜質sm3j、雜質sm3h、雜質sm3f、雜質sm3a、雜質sm3i、雜質sm3g和雜質sm3e進行分離；所述流動相a為三氟乙酸水溶液，所述流動相b為乙腈；
4、
5、
6、進一步，梯度洗脫程序為：
7、0min，所述流動相a和所述流動性b的體積比為79-81:21-19；
8、3min，所述流動相a和所述流動性b的體積比為80:20；
9、15min，所述流動相a和所述流動性b的體積比為60:40；
10、40min，所述流動相a和所述流動性b的體積比為30:70；
11、45min，所述流動相a和所述流動性b的體積比為30:70；
12、46min，所述流動相a和所述流動性b的體積比為80:20；
13、55min，所述流動相a和所述流動性b的體積比為80:20。
14、作為優選，所述梯度洗脫程序為：
15、0min，所述流動相a和所述流動性b的體積比為80:20；
16、3min，所述流動相a和所述流動性b的體積比為80:20；
17、15min，所述流動相a和所述流動性b的體積比為60:40；
18、40min，所述流動相a和所述流動性b的體積比為30:70；
19、45min，所述流動相a和所述流動性b的體積比為30:70；
20、46min，所述流動相a和所述流動性b的體積比為80:20；
21、55min，所述流動相a和所述流動性b的體積比為80:20。
22、進一步，所述三氟乙酸水溶液的體積分數為0.05％。
23、進一步，所述流動相的流速為0.9ml/min-1.1ml/min，優選為1.0ml/min；所述色譜柱柱溫為28℃-32℃，優選為30℃。
24、進一步，進樣體積20μl。
25、本專利技術的目的之二在于提供一種基于目的一所述的方法鑒定恩扎盧胺sm3及其相關雜質的方法，該方法實現了恩扎盧胺起始原料sm3與雜質sm3a、雜質sm3b、雜質sm3c、雜質sm3d、雜質sm3e、雜質sm3f、雜質sm3g、雜質sm3h、雜質sm3i和/或雜質sm3j的定性鑒別。
26、為實現上述目的，本專利技術采用以下技術方案：
27、鑒定恩扎盧胺sm3及其相關雜質的方法，利用目的一所述的方法分離所述恩扎盧胺sm3及其相關雜質，并采用檢測器進行檢測；所述檢測器的檢測波長為254nm。
28、11種組分的保留時間由短到長依次為：雜質sm3c、雜質sm3d、雜質sm3b、恩扎盧胺sm3、雜質sm3j、雜質sm3h、雜質sm3f、雜質sm3a、雜質sm3i、雜質sm3g和雜質sm3e；根據保留時間的長短可實現恩扎盧胺sm3及其相關雜質的定性。
29、作為優選的技術方案，所述流動相a為體積分數為0.05％的三氟乙酸水溶液，所述流動相b為乙腈；所述流動相的流速為1.0ml/min，所述色譜柱柱溫為30℃；檢測波長為254nm；所述色譜柱的規格為4.6mm×150mm×3μm；按照梯度洗脫程序進行洗脫并得到色譜圖，所述梯度洗脫程序設置如下：
30、0min，所述流動相a和所述流動性b的體積比為80:20；
31、3min，所述流動相a和所述流動性b的體積比為80:20；
32、15min，所述流本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.利用HPLC方法分離恩扎盧胺SM3及其相關雜質的方法，其特征在于，所述相關雜質為雜質SM3a、雜質SM3b、雜質SM3c、雜質SM3d、雜質SM3e、雜質SM3f、雜質SM3g、雜質SM3h、雜質SM3i和雜質SM3j中的任一種或多種；所述恩扎盧胺SM3的結構式如式Ⅰ所示；所述雜質SM3a的結構式如式Ⅱ所示，所述雜質SM3b的結構式如式Ⅲ所示，所述雜質SM3c的結構式如式Ⅳ所示，所述雜質SM3d的結構式如式Ⅴ所示，所述雜質SM3e的結構式如式Ⅵ所示，所述雜質SM3f的結構式如式Ⅶ所示，所述雜質SM3g的結構式如式Ⅷ所示，所述雜質SM3h的結構式如式Ⅸ所示，所述雜質SM3i的結構式如式Ⅹ所示，所述雜質SM3j的結構式如式Ⅺ所示；所述HPLC方法是采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相，采用流動相A和流動相B為流動相，通過梯度洗脫依次將雜質SM3c、雜質SM3d、雜質SM3b、恩扎盧胺SM3、雜質SM3j、雜質SM3h、雜質SM3f、雜質SM3a、雜質SM3i、雜質SM3g和雜質SM3e進行分離；所述流動相A為三氟乙酸水溶液，所述流動相B為乙腈；
2.根據權利要求1所述的方
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述三氟乙酸水溶液的體積分數為0.05％。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述流動相的流速為0.9ml/min-1.1ml/min，所述色譜柱柱溫為28℃-32℃。
5.基于權利要求1-4任一項所述的方法鑒定恩扎盧胺SM3及其相關雜質的方法，其特征在于，利用權利要求1-4任一項所述的方法分離所述恩扎盧胺SM3及其相關雜質，并采用檢測器進行檢測；所述檢測器的檢測波長為254nm。
6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述流動相A為體積分數為0.05％的三氟乙酸水溶液，所述流動相B為乙腈；所述流動相的流速為1.0ml/min，所述色譜柱柱溫為30℃；檢測波長為254nm；所述色譜柱的規格為4.6mm×150mm×3μm；按照梯度洗脫程序進行洗脫并得到色譜圖，所述梯度洗脫程序設置如下：
7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，保留時間在2.7±0.5min時，判斷為雜質SM3c；保留時間在9.0±0.5min時，判斷為雜質SM3d；保留時間在15.0±0.5min時，判斷為雜質SM3b；保留時間在18.6±0.5min時，判斷為恩扎盧胺SM3；保留時間在21.4±0.5min時，判斷為雜質SM3j；保留時間在21.9±0.5min時，判斷為雜質SM3h；保留時間在23.0±0.5min時，判斷為雜質SM3f；保留時間在26.2±0.5min時，判斷為雜質SM3a；保留時間在28.4±0.5min時，判斷為雜質SM3i；保留時間在30.3±0.5min時，判斷為雜質SM3g；保留時間在30.9±0.5min時，判斷為雜質SM3e。
8.檢測恩扎盧胺SM3及其相關雜質含量的方法，其特征在于，包括以下步驟：
9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，分離前，采用溶劑配置供試品溶液、對照溶液和系統適用性溶液；所述溶劑為乙腈和水的混合溶液，所述溶劑中乙腈和水的體積比為50:50。
10.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述雜質SM3c的校正因子為0.57，所述雜質SM3d的校正因子為0.80，所述雜質SM3b的校正因子為2.4，所述雜質SM3j的校正因子為0.65，所述雜質SM3h的校正因子為0.48，所述雜質SM3a的校正因子為0.40，所述雜質SM3g的校正因子為0.71，所述雜質SM3e的校正因子為1.2，所述雜質SM3f的校正因子為0.64，所述雜質SM3i的校正因子為1.9。
...【技術特征摘要】
1.利用hplc方法分離恩扎盧胺sm3及其相關雜質的方法，其特征在于，所述相關雜質為雜質sm3a、雜質sm3b、雜質sm3c、雜質sm3d、雜質sm3e、雜質sm3f、雜質sm3g、雜質sm3h、雜質sm3i和雜質sm3j中的任一種或多種；所述恩扎盧胺sm3的結構式如式ⅰ所示；所述雜質sm3a的結構式如式ⅱ所示，所述雜質sm3b的結構式如式ⅲ所示，所述雜質sm3c的結構式如式ⅳ所示，所述雜質sm3d的結構式如式ⅴ所示，所述雜質sm3e的結構式如式ⅵ所示，所述雜質sm3f的結構式如式ⅶ所示，所述雜質sm3g的結構式如式ⅷ所示，所述雜質sm3h的結構式如式ⅸ所示，所述雜質sm3i的結構式如式ⅹ所示，所述雜質sm3j的結構式如式?所示；所述hplc方法是采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相，采用流動相a和流動相b為流動相，通過梯度洗脫依次將雜質sm3c、雜質sm3d、雜質sm3b、恩扎盧胺sm3、雜質sm3j、雜質sm3h、雜質sm3f、雜質sm3a、雜質sm3i、雜質sm3g和雜質sm3e進行分離；所述流動相a為三氟乙酸水溶液，所述流動相b為乙腈；
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，梯度洗脫程序為：
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述三氟乙酸水溶液的體積分數為0.05％。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述流動相的流速為0.9ml/min-1.1ml/min，所述色譜柱柱溫為28℃-32℃。
5.基于權利要求1-4任一項所述的方法鑒定恩扎盧胺sm3及其相關雜質的方法，其特征在于，利用權利要求1-4任一項所述的方法分離所述恩扎盧胺sm3及其相關雜質，并采用檢測器進行檢測；所述檢測器的檢測波長為254nm。
6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述流動相a為體積分數為0.05％的三氟乙酸...
【專利技術屬性】
技術研發人員：王紳，楊羽豐，譚智文，
申請(專利權)人：重慶華邦制藥有限公司，
類型：發明
國別省市：
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