【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于生物，具體涉及一種靶向b細(xì)胞cd20的納米抗體及其應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、b細(xì)胞是免疫系統(tǒng)的重要淋巴細(xì)胞，惡性腫瘤、自身免疫性疾病、淋巴瘤和白血病是常見的b細(xì)胞相關(guān)疾病，這些疾病的發(fā)病機制與b細(xì)胞過度活化產(chǎn)生大量自身抗體相關(guān)。因此，以b淋巴細(xì)胞表面分子為靶點的b淋巴靶向治療得到了近年來廣泛的關(guān)注和研究。b淋巴細(xì)胞清除策略是利用抗體藥物靶向結(jié)合b細(xì)胞亞群的特定抗原，通過抗體依賴介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用或補體，或通過靶向b細(xì)胞存活需要的細(xì)胞因子，如b細(xì)胞激活因子（-cellactivation?factor,?baff）誘導(dǎo)b細(xì)胞凋亡，達(dá)到清除b細(xì)胞的目的。b細(xì)胞清除主要的靶點是cd20，cd19和baff，用于治療自身免疫疾病包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡，多發(fā)性硬化癥。
2、cd20是一種在b細(xì)胞表面表達(dá)的非糖基化蛋白，主要由b細(xì)胞開始表達(dá)，初始b細(xì)胞增殖活化至漿細(xì)胞的過程表達(dá)下調(diào)，在終末分化的漿母細(xì)胞和漿細(xì)胞中失去表達(dá)。cd20在b細(xì)胞的表達(dá)具有特異性，且在單核細(xì)胞及粒細(xì)胞，大部分t細(xì)胞和其他組織細(xì)胞不表達(dá)。靶向cd20的藥物可通過阻斷向漿細(xì)胞分化發(fā)育，以降低產(chǎn)生自身免疫性抗體的漿細(xì)胞水平，同時保留b細(xì)胞前體，幼稚b細(xì)胞和長壽漿細(xì)胞的再生庫。
3、目前以cd20單克隆抗體為代表的b淋巴稀薄清除治療是目前較為成熟的方案，如rituximab(利妥昔)、ocrelizumab、ofatumumab。除了b細(xì)胞清除，還有針對b細(xì)胞生長因子（baff）的中和藥物，包括gaff中和抗體（如belimumab，貝利單抗）
4、然而研究表明，長期服用rituximab，可能導(dǎo)致免疫系統(tǒng)的暫時性抑制，增加感染的風(fēng)險，部分患者可能對單抗或其成分產(chǎn)生過敏反應(yīng)，表現(xiàn)為皮疹、呼吸困難等癥狀，并且導(dǎo)致血細(xì)胞（如白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板）計數(shù)降低，這可能會影響患者的健康和恢復(fù)能力
5、納米抗體是從駱駝科動物（如駱駝、羊駝和駱馬）中提取的一種特殊類型的抗體，其大小僅為常規(guī)抗體的十分之一。這使得它們能夠更容易地穿透組織，到達(dá)常規(guī)抗體無法到達(dá)的地方。納米抗體具有極高的熱穩(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性，使其在各種惡劣環(huán)境下都能保持活性。由于納米抗體的結(jié)構(gòu)簡單，因此可以很容易地進(jìn)行基因工程改造，以產(chǎn)生具有特定功能的抗體。此外，納米抗體也可以通過細(xì)菌、酵母等微生物進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)，大大降低了生產(chǎn)成本。納米抗體可以同時識別多個抗原表位，這使得它們在診斷和治療多種疾病方面具有很大的潛力。納米抗體由于其獨特的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，使其在靶向藥物輸送、免疫診斷、腫瘤治療等方面顯示出高效的性能。納米抗體已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物技術(shù)、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域，包括疾病的早期診斷、治療，以及作為研究工具等。開發(fā)靶向b細(xì)胞的納米抗體，對于b細(xì)胞相關(guān)疾病的治療和研究，具有至關(guān)重要的意義。
6、血液凈化是一項至關(guān)重要的醫(yī)療技術(shù)，它通過從血液中去除有害物質(zhì)來治療多種疾病和中毒狀況。通過使用特定的吸附劑，如免疫吸附劑，可以針對性地吸附特定的致病因子，例如自身抗體或炎癥介質(zhì)。免疫吸附是一種技術(shù)，它利用特定的抗原、抗體或具有獨特理化親和力的配體與吸附介質(zhì)結(jié)合，形成選擇性或特異性的吸附柱。當(dāng)與藥物治療結(jié)合使用時，免疫吸附能顯著提高患者對藥物的反應(yīng)性，從而增強藥物效果，減少副作用，縮短治療時間，并降低疾病復(fù)發(fā)的風(fēng)險。通過將靶向b細(xì)胞的抗體將與固相載體相結(jié)合，可以特異性結(jié)合人血液中的b細(xì)胞，從而清除產(chǎn)生病理性抗體的b細(xì)胞。吸附效率高，吸附性能穩(wěn)定，靶向清除b細(xì)胞，非特異性吸附量低，特異性好，在臨床治療上安全性能好，經(jīng)濟(jì)效益高。可能成為b細(xì)胞相關(guān)疾病的治療的新途徑。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的至少一個不足，提供一種靶向b細(xì)胞cd20的納米抗體及其應(yīng)用。
2、本專利技術(shù)所采取的技術(shù)方案是：
3、第一個方面，本專利技術(shù)提供一種靶向b細(xì)胞cd20的納米抗體，包括框架區(qū)域和互補決定區(qū)域，所述納米抗體互補決定區(qū)域cdr1～cdr3的氨基酸序列選自以下組合中的任意一種：
4、組合1，其cdr1～cdr3的氨基酸序列分別如seq?id?no.1～seq?id?no.3所示；
5、組合2，其cdr1～cdr3的氨基酸序列分別如seq?id?no.4～seq?id?no.6所示；
6、組合3，其cdr1～cdr3的氨基酸序列分別如seq?id?no.7～seq?id?no.9所示。
7、在一些實例中，其為嵌合抗體、人源化抗體、融合fc片段的納米抗體。
8、在一些實例中，所述納米抗體氨基酸序列的選自以下選自以下組合中的任意一種：
9、ca05：
10、qvqlvesgggpvqsggslrlscagsrniyspysmgdyglswfrqapgeeregvalidrddstfyadsvkgrftisqddaktnlflqmnslkpedsamyycaaaakpkehglfdswgqgtqvtvss；
11、cb01：
12、qvqlqesgggpvqagdslrlscaasgniysgniysrhsmgwfrqvpgkeregvainrddssrftlsqddaktnlflqmnslkptdtayycaagwmatlawsdwfrgrgtqvtvss；
13、cd09：
14、qvqlqesgggpvqsggslrlscaasrniysrpymawfrqapgkeregvatsstfgstvyadsvkgrftisrddaktnlflqmnslkpedsamyycaagfdylspsdygywgqgtqvtvss。
15、上述序列中，下劃線標(biāo)記的部分為cdr區(qū)，未標(biāo)記的部分為fr區(qū)。
16、在一些納米抗體的實例中，其為嵌合抗體、人源化抗體、融合fc片段的納米抗體。
17、通過引入抗體fc區(qū)，可以實現(xiàn)納米抗體的二聚化。fc區(qū)的引入，還可以利用fc的親和性，簡化抗體的純化操作。fc的引入，還有利于延長抗體的半衰期，提高抗體在體內(nèi)的穩(wěn)定性。抗體fc區(qū)沒有特殊要求，優(yōu)選為人源抗體的fc區(qū)。所述抗體fc區(qū)包括人源igg1、igg2、igg3、igg4、iga、igd、igm、ige的fc段或其變體、改造體。
18、第二個方面，本專利技術(shù)提供一種二價或多價納米抗體，包括至少一條本專利技術(shù)第一個方面所述的納米抗體。
19、二價或多價納米抗體由單條納米抗體通過接頭元件連接本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點】
1.一種靶向B細(xì)胞CD20的納米抗體，包括框架區(qū)域和互補決定區(qū)域，其特征在于，所述納米抗體互補決定區(qū)域CDR1～CDR3的氨基酸序列選自以下組合中的任意一種：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米抗體，其特征在于，所述納米抗體的氨基酸序列選自以下序列中的一條：
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米抗體，其特征在于，其為嵌合抗體、人源化抗體、融合Fc片段的納米抗體。
4.一種二納或多價納米抗體，其特征在于，包括至少一條權(quán)利要求1～3任一項所述的納米抗體。
5.權(quán)利要求1～4任一項所述的納米抗體的應(yīng)用，其特征在于，所述應(yīng)用包括：
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述偶聯(lián)物為藥物，所述B細(xì)胞相關(guān)疾病選自腫瘤及自身免疫性疾病。
7.一種免疫吸附劑，包括固相載體，其特征在于，所述固相載體上偶聯(lián)有權(quán)利要求1～4任一項所述的納米抗體，優(yōu)選的，所述固相載體選自殼聚糖、瓊脂糖、纖維素、葡聚糖、樹脂、纖維素中的至少一種。
8.一種血液凈化器械，其特征在于，包括權(quán)利要求7所述的免疫吸附劑。
9.編碼權(quán)利要求1～4
10.一種表達(dá)載體，其特征在于，其表達(dá)權(quán)利要求1～4任一項所述的納米抗體，或含有權(quán)利要求9所述的基因。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種靶向b細(xì)胞cd20的納米抗體，包括框架區(qū)域和互補決定區(qū)域，其特征在于，所述納米抗體互補決定區(qū)域cdr1～cdr3的氨基酸序列選自以下組合中的任意一種：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米抗體，其特征在于，所述納米抗體的氨基酸序列選自以下序列中的一條：
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米抗體，其特征在于，其為嵌合抗體、人源化抗體、融合fc片段的納米抗體。
4.一種二納或多價納米抗體，其特征在于，包括至少一條權(quán)利要求1～3任一項所述的納米抗體。
5.權(quán)利要求1～4任一項所述的納米抗體的應(yīng)用，其特征在于，所述應(yīng)用包括：
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：張海珍，蔡博生，宋穎，楊雪飛，曾可，吳泳棋，楊正根，陳校園，
申請(專利權(quán))人：廣州康盛生物科技股份有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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