【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于生物醫藥，具體涉及食竇魏斯氏菌zmc030及其胞外多糖在防治炎癥性腸病中的應用。
技術介紹
1、潰瘍性結腸炎(ulcerative?colitis,uc)是一種主要累及消化系統的，慢性非特異性，反復發作的炎癥性腸道疾病，且uc患者發展為結直腸癌的風險較高，世界衛生組織已經把uc歸為臨床難治病種之一。近年來，隨著城市化和人們日常生活的現代化，uc的發病率均逐年上升，已經成為全球公共衛生的挑戰。uc治愈的難度較大，目前臨床常用藥物主要包括水楊酸類、糖皮質激素類、免疫抑制劑類、生物制劑和抗生素等。但常規的藥物治療手段存在著副作用明顯、病人耐受性差和容易復發等缺點，因此，尋求不良反應少和更有效的藥物，對uc臨床用藥和基礎研究具有重要意義。
2、微生物制劑對包括uc在內的各種疾病有治療潛力，但活菌制劑療法存在穩定性差、胃腸道存活率較低、和可能的安全隱患等問題。后生元是一種對宿主健康有益的無生命微生物、細胞成分或微生物分泌的代謝產物，比如短鏈脂肪酸、膜蛋白和胞外多糖(exopolysaccharides,eps)等，可發揮與益生菌類似的調控作用，且后生元穩定性和安全性較好，易于儲存和運輸等優勢，可能是益生菌的一種更安全的替代品。后生元可調節腸道菌群、增強腸上皮屏障功能、調節局部和全身免疫等，在包括uc在內的各種疾病中的應用越來越受到大家的重視。
3、食竇魏斯氏菌(weissella.cibaria)屬于乳酸菌的一種，廣泛存在于唾液、母乳、人類胃腸道以及傳統發酵食品中。w.cibaria屬于高產eps的乳
技術實現思路
1、本專利技術的目的旨在提供一種食竇魏斯氏菌zmc030及其胞外多糖在防治炎癥性腸病中的應用。
2、為實現專利技術目的，本專利技術采用的技術方案如下：
3、本專利技術第一方面提供了一種食竇魏斯氏菌，所述食竇魏斯氏菌核酸序列中含有序列1(seq?id?no.1)所示的序列。
4、根據上述的食竇魏斯氏菌，優選地，所述食竇魏斯氏菌為食竇魏斯氏菌zmc030，食竇魏斯氏菌zmc030(weissella?cibaria?zmc030)，所述食竇魏斯氏菌的保藏編號為cctccno:m?20241261，保藏機構為中國典型培養物保藏中心(cctcc)，保藏機構地址為湖北省武漢市武昌區八一路299號武漢大學中國典型培養物保藏中心；保藏日期為2024年06月17日。
5、上述食竇魏斯氏菌zmc030的篩選和鑒定過程為：將健康嬰幼兒糞便用無菌生理鹽水重懸，震蕩混勻后靜置沉淀顆粒狀雜物，將懸浮液加入到mrs液體培養基中，37℃培養48h；將菌液進行梯度稀釋吸取10-5稀釋液涂布到mrs固體培養基中，于37℃培養至生長出明顯單菌落。采用引物(27f：5’-agagtttgatcctggctcag-3’和1492r：5’-tacggctaccttgttacgactt-3’)對單菌落進行16s?rdna序列擴增，并將擴增序列送擎科生物科技有限公司進行測序。16s?rdna的測序結果輸入利用ncbi的blast數據庫對菌株的16srdna序列進行分析，最終根據同源序列分析鑒定分離菌株為食竇魏斯氏菌(weissella.cibaria)，命名為食竇魏斯氏菌zmc030，將該菌株保藏于中國典型培養物保藏中心，菌種保藏號為cctcc?m?20241261。所述食竇魏斯氏菌zmc030的16s?rdna序列為如序列1(seq?id?no.1)所示。
6、序列1的核苷酸序列如下：
7、gctttgggtgttacaaactctcatggtgtgacgggcggtgtgtacaagacccgggaacgtattcaccgcggcgtgctgatccgcgattactagcgattc
8、cgacttcatgtaggcgagttgcagcctacaatccgaactgagacgtactttaagagattagctcaccctcgcgggttggcaactcgttgtatacgccattgtagc
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13、gtttacggtgtggactaccagggtatctaatcctgtttgctacccacactttcgagcctcaacgtcagttacagtccagaaaagccgccttcgccactggtgttct
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15、acttcagacttaaataaccgtctgcgctcgctttacgcccaataaatccggataacgcttggaacatacgtattaccgcggctgctggcccgtattttagcccgtt
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18、atgcatcatcgtcttggtgagccattacctcaccaactaa本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種食竇魏斯氏菌，其特征在于，所述食竇魏斯氏菌核酸序列中含有序列1所示的序列。
2.根據權利要求1所述的食竇魏斯氏菌，其特征在于，所述食竇魏斯氏菌為食竇魏斯氏菌ZMC030，食竇魏斯氏菌ZMC030的保藏編號為CCTCC?NO:?M?20241261。
3.一種胞外多糖，其特征在于，所述胞外多糖是將權利要求1或2所述食竇魏斯氏菌進行發酵培養，得到發酵液，對所述發酵培液進行分離純化得到。
4.根據權利要求3所述的胞外多糖，其特征在于，所述胞外多糖的制備方法為：將所述食竇魏斯氏菌接種至培養基進行發酵培養，得到發酵液，發酵液經菌體去除、蛋白脫除處理，得到上清液；對上清液進行醇沉處理，收集沉淀物，沉淀物經透析除雜、凍干處理，得到所述胞外多糖。
5.根據權利要求4所述的胞外多糖，其特征在于，所述培養基為MRS?培養基或mMRS培養基；所述發酵培養溫度為30℃～37℃；所述透析截留分子量為8000～14000?Da。
6.權利要求1或2所述食竇魏斯氏菌或食竇魏斯氏菌的培養物或權利要求3-5任一所述胞外多糖在如下任一中的應用：p>
7.根據權利要6所述的應用，其特征在于，所述產品為藥物、食品添加劑、功能性食品、飼料添加劑或飼料。
8.一種藥物，其特征在于，包含有效成分，所述有效成分為權利要求1或2所述的食竇魏斯氏菌或含食竇魏斯氏菌的培養物或權利要求3～5任一所述胞外多糖；所述藥物用于預防、緩解或/和治療結腸炎或用于減少腸道上皮潰瘍面積或用于改善腸道黏膜屏障紊亂或用于調節腸道菌群。
9.一種功能性食品，其特征在于，所述食品中含有權利要求1或2所述的食竇魏斯氏菌或含食竇魏斯氏菌的培養物或權利要求3～5任一所述胞外多糖。
10.一種飼料，其特征在于，所述飼料中含有權利要求1或2所述的食竇魏斯氏菌或含食竇魏斯氏菌的培養物或權利要求3～5任一所述胞外多糖。
11.一種食品添加劑，其特征在于，所述食品添加劑中含有權利要求1或2所述的食竇魏斯氏菌或含食竇魏斯氏菌的培養物或權利要求3～5任一所述胞外多糖。
12.一種飼料添加劑，其特征在于，所述飼料添加劑中含有權利要求1或2所述的食竇魏斯氏菌或含食竇魏斯氏菌的培養物或權利要求3～5任一所述胞外多糖。
...【技術特征摘要】
1.一種食竇魏斯氏菌，其特征在于，所述食竇魏斯氏菌核酸序列中含有序列1所示的序列。
2.根據權利要求1所述的食竇魏斯氏菌，其特征在于，所述食竇魏斯氏菌為食竇魏斯氏菌zmc030，食竇魏斯氏菌zmc030的保藏編號為cctcc?no:?m?20241261。
3.一種胞外多糖，其特征在于，所述胞外多糖是將權利要求1或2所述食竇魏斯氏菌進行發酵培養，得到發酵液，對所述發酵培液進行分離純化得到。
4.根據權利要求3所述的胞外多糖，其特征在于，所述胞外多糖的制備方法為：將所述食竇魏斯氏菌接種至培養基進行發酵培養，得到發酵液，發酵液經菌體去除、蛋白脫除處理，得到上清液；對上清液進行醇沉處理，收集沉淀物，沉淀物經透析除雜、凍干處理，得到所述胞外多糖。
5.根據權利要求4所述的胞外多糖，其特征在于，所述培養基為mrs?培養基或mmrs培養基；所述發酵培養溫度為30℃～37℃；所述透析截留分子量為8000～14000?da。
6.權利要求1或2所述食竇魏斯氏菌或食竇魏斯氏菌的培養物或權利要求3-5任一所述胞外多糖在如下任一中的應用：<...
【專利技術屬性】
技術研發人員：馬望，趙環，任靜，蘇曉寧，吳秋揚，馬燕娥，
申請(專利權)人：鄭州大學第一附屬醫院，
類型：發明
國別省市：
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