【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本申請涉及化工分析檢測領(lǐng)域，具體涉及一種細(xì)胞培養(yǎng)液的拉曼檢測樣本的制備方法及檢測方法。
技術(shù)介紹
1、細(xì)胞培養(yǎng)液提供了細(xì)胞發(fā)育和繁殖過程所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)，含有細(xì)胞生長過程中的代謝信息，研究細(xì)胞代謝可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞反應(yīng)的監(jiān)測，準(zhǔn)確地發(fā)現(xiàn)細(xì)胞群體的特征及其代謝變化。細(xì)胞代謝組學(xué)已經(jīng)被應(yīng)用于腫瘤、免疫、藥物作用等方面。常用的細(xì)胞代謝組學(xué)分析方法有質(zhì)譜法、色譜法及熒光法等，具有檢測靈敏度高及可實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確定量等特點(diǎn)，但存在成本高、樣本處理復(fù)雜、檢測速度慢、檢測技術(shù)要求較高等缺陷。針對(duì)這些缺點(diǎn)，拉曼光譜可檢測樣本中分子的功能團(tuán)吸收電磁射線后，其強(qiáng)度及波長位置的變化，它支持用低成本實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞、體液以及培養(yǎng)液中生化分子的快速、無創(chuàng)分析。
2、拉曼光譜是一種散射光譜，其原理在于當(dāng)激光與待測樣本交互后分子散射的光會(huì)發(fā)生頻率變化，借此可以對(duì)與入射光頻率不同的散射光譜進(jìn)行分析獲得樣本的分子振動(dòng)信息，實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本成分、結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的分析。拉曼光譜的應(yīng)用范圍遍及醫(yī)學(xué)、物理學(xué)、化學(xué)和生物學(xué)等各個(gè)領(lǐng)域，對(duì)于純定性分析、高度定量分析和分子結(jié)構(gòu)的研究都有很大價(jià)值。
3、拉曼光譜本身很微弱，且細(xì)胞培養(yǎng)液中的代謝物的變化很小。直接檢測液體樣本，可能無法觀察到代謝變化。因此，拉曼檢測細(xì)胞培養(yǎng)液這種復(fù)雜液體時(shí)，液體樣本制備對(duì)拉曼檢測尤為重要。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、基于此，本申請一實(shí)施例提供了一種拉曼檢測細(xì)胞培養(yǎng)液的樣本制備方法，能夠提高樣本拉曼檢測效率及穩(wěn)定性。
2、技術(shù)方案包括如下：
4、收集細(xì)胞培養(yǎng)過程中所產(chǎn)生的培養(yǎng)液，去雜質(zhì)處理，滴于載片上，靜置干燥；
5、其中，干燥的環(huán)境為濕度≤60%，溫度為20℃-25℃。
6、在其中一個(gè)實(shí)施例中，干燥的環(huán)境為濕度35%-55%，溫度20.3℃-22.5℃。
7、在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述載片為鍍鋁石英玻片。
8、在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述鍍鋁石英玻片包括采用真空蒸發(fā)鍍膜法制備而成。
9、在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述的樣本制備方法，干燥的時(shí)間為20min-30min。
10、在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述的樣本制備方法，去雜質(zhì)處理的步驟包括將收集的培養(yǎng)液進(jìn)行離心，取中層液體。
11、在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述的樣本制備方法，收集細(xì)胞培養(yǎng)過程中所產(chǎn)生的培養(yǎng)液后，還包括冷凍保存的步驟；
12、在其中一個(gè)實(shí)施例中，冷凍保存后，在離心之前還包括解凍的步驟。
13、在其中一個(gè)實(shí)施例中，離心的條件包括：轉(zhuǎn)速為5000rpm-5500rpm，時(shí)間為25s-35s。
14、在其中一個(gè)實(shí)施例中，所述的樣本制備方法，滴于載片上的細(xì)胞培養(yǎng)液的體積為1.0μl-2.0μl。
15、一種細(xì)胞培養(yǎng)液的檢測方法，所述方法包括如下步驟：
16、采用所述的制備方法制備樣本；以及
17、使用拉曼光譜法對(duì)所述樣本進(jìn)行檢測。
18、在其中一個(gè)實(shí)施例中，檢測的參數(shù)包括如下一種或多種：
19、激光波長532?nm，
20、激光曝光時(shí)間4?s-10s，
21、累積次數(shù)6-15次，以及
22、激光功率為5?mw-15?mw。
23、相對(duì)于傳統(tǒng)技術(shù)，本申請具備如下有益效果：
24、本申請?zhí)峁┑募?xì)胞培養(yǎng)液的拉曼光譜檢測樣本的制備，規(guī)范了拉曼干燥樣本制備時(shí)的環(huán)境條件，減少樣本因制備條件不同產(chǎn)生的實(shí)驗(yàn)誤差，以及大大增加樣本檢測的效率及穩(wěn)定性。
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1.一種細(xì)胞培養(yǎng)液的檢測樣本的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，干燥的環(huán)境為濕度35%-55%，溫度20.3℃-22.5℃。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述載片為鍍鋁石英玻片；
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，干燥的時(shí)間為20min-30min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，去雜質(zhì)處理的步驟包括將收集的培養(yǎng)液進(jìn)行離心，取中層液體。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，收集細(xì)胞培養(yǎng)過程中所產(chǎn)生的培養(yǎng)液后，還包括冷凍保存的步驟；
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，離心的條件包括：轉(zhuǎn)速為5000rpm-5500rpm，時(shí)間為25s-35s。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至3以及7中任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，滴于載片上的細(xì)胞培養(yǎng)液的體積為1.0μL-2.0μL。
9.一種細(xì)胞培養(yǎng)液的檢測方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：
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