本發明專利技術公開了一種避免黃曲霉的百藥煎炮制方法，包括以下步驟：1）取五倍子洗凈，干燥粉碎，過40目~80目篩，消毒滅菌，冷卻至室溫備用；2）制備單寧酶純化液，備用；3）取綠茶加純化水煎煮成汁，濾去茶渣，濃縮冷卻至室溫備用；4）將五倍子粉末、單寧酶純化液、綠茶濃汁、活性炭粉末縮液在密封反應釜內混合；5）反應結束后，提取反應釜內的反應液，在100℃的水浴中處理5min~10min后，降溫至室溫；6）對反應液進行冷凍干燥，將冷凍干燥后獲得的粉末，壓縮成塊狀物即為炮制完成的百藥煎產品，將百藥煎產品密封保存。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及中藥炮制，具體是指一種避免黃曲霉的百藥煎炮制方法。
技術介紹
1、百藥煎又名制百藥煎、百草煎，為五倍子，同茶葉、酒糟或酒曲等經發酵制成的干燥曲塊，主要成分為五倍子中可水解鞣質水解后產生的沒食子酸，具有清熱化痰，生津止渴等功效，臨床上可用于肺熱咳嗽，風火牙痛，口舌糜爛，久痢脫肛等癥的治療。
2、百藥煎傳統炮制是利用自然界存在多種微生物的混合固體發酵完成，存在發酵菌種不穩定、混雜有無效菌株，可能造成百藥煎發酵基質中沒食子酸濃度波動性較大，影響百藥煎的質量穩定。
3、酒曲作為百藥煎的原料，極容易混有黃曲霉，黃曲酶產生的黃曲霉毒素b1毒性極大，具有誘發人體致畸、致癌、致突變的作用，而制備的百藥煎質量檢測過程中，黃曲霉毒素的檢查重要的檢測項目，為了使最終百藥煎成品中黃曲霉毒素含量符合質量標準，需要在百藥煎發酵制備過程中，進行嚴格的質量控制。百藥煎的質量標準研究包括了對其水分、總灰分、酸不溶性灰分、黃曲霉毒素及顯微特征的檢測。這表明在百藥煎的生產和儲存過程中，存在黃曲霉污染的風險，需要通過質量標準控制來避免其超過安全標準。盡管沒有直接證據表明百藥煎發酵過程中一定會產生黃曲霉，但考慮到黃曲霉毒素的普遍性和危害性，使得百藥煎的質量控制困難重重。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種不使用生物發酵技術，不以酒糟為原料，杜絕黃曲霉出現的百藥煎炮制方法。
2、本專利技術通過下述技術方案實現：一種避免黃曲霉的百藥煎炮制方法，包括以下步驟：
3、（1）取五倍子洗凈，干燥粉碎，過40目~80目篩，消毒滅菌，冷卻至室溫備用；
4、（2）制備單寧酶純化液，備用；
5、（3）取綠茶加純化水煎煮成汁，濾去茶渣，濃縮冷卻至室溫備用；
6、（4）將五倍子粉末、單寧酶純化液、綠茶濃汁、活性炭粉末縮液在密封反應釜內混合，保持30rad/min~60rad/min轉速攪拌，溫度保持在35℃~45℃，反應時間為3h~6h，初始ph為6.5；
7、（5）反應結束后，提取反應釜內的反應液，在100℃的水浴中處理5min~10min后，降溫至室溫；
8、（6）對反應液進行冷凍干燥，將冷凍干燥后獲得的粉末，壓縮成塊狀物即為炮制完成的百藥煎產品，將百藥煎產品置于通風干燥處保存。
9、百藥煎的主要有效成分是沒食子酸，有由五倍子中可水解鞣質經微生物發酵炮制轉換而來，具有殺錐蟲、抗炎、抑菌、抗腫瘤、抗病毒等活性，一般通過檢測百藥煎中沒食子酸含量對百藥煎的藥效進行判斷。微生物發酵本質上是利用微生物產生的單寧酶將五倍子中可水解鞣質轉換成沒食子酸。本技術方案雖然直接使用單寧酶與五倍子混合，但是區別于單純對五味子中沒食子酸的提取，其中還加入了濃縮茶汁作為輔助成分，需要一定程度模擬酒曲的發酵過程，才能獲得完整的百藥煎，而不是單純的沒食子酸，因此，單純使用單寧酶并不能實現該技術效果，單寧酶對于茶汁并無任何影響。專利技術人在實驗過程中，因加入了少許活性炭粉末，本來是為了加強消毒和對逸散氣體的吸附使用的，結果使得最終獲得反應液的狀態能夠發揮百藥煎抗炎鎮痛，止咳化痰的效果。于是通過后期對反應液的冷凍干燥后，制得了與傳統百藥煎基本一模一樣的百藥煎。經過專利技術人分析，因該是活性炭中的疏松孔洞，吸附了五味子中的可水解鞣質與濃縮茶汁中的兒茶酚，使得單寧酶發揮了類似發酵的酶解過程。又或者活性炭改變了單寧酶的形態，或促進了單寧酶的酶促反應過程，使其發生了類似酒曲發酵酶解的過程，其活性炭所發揮的作用，還有待進一步研究。總之，專利技術人探索了一種新的制備百藥煎的炮制方法，其沒有探索發酵菌種，而是以一種非添加微生物的方式，模擬酒曲發酵的形式，獲得了成品百藥煎，整個過程，不涉及生物發酵，有嚴格的消毒過程，基本杜絕了黃曲霉等有害菌的混入過程，大大提高了百藥煎的質量安全。
10、為更好的實現本專利技術的方法，進一步地，所述步驟（1）中，將洗凈的五倍子置于70℃的烘箱中烘烤48h進行烘干，利用粉碎機將烘干后的五倍子粉碎。
11、為更好的實現本專利技術的方法，進一步地，所述步驟（1）中，用250℃~300℃高溫水蒸氣對五倍子粉末進行消毒滅菌。
12、為更好的實現本專利技術的方法，進一步地，所述步驟（2）中，單寧酶純化液的制備過程包括以下步驟：
13、（2.1）將保藏的塔賓曲霉在瓊脂斜面上進行活化；
14、（2.2）配置培養基，并將培養基加入搖瓶中，將活化的塔賓曲霉接入裝有培養基的搖瓶，進行繁殖擴大培養；
15、（2.3）將搖瓶中繁殖的塔賓曲霉轉入隔水式恒溫培養箱，提供37℃的恒溫，發酵60h~90h；
16、（2.4）在發酵結束后，加入ph6.5酒石酸-酒石酸鈉緩沖液，置于搖床震蕩提出1h~2h，過濾，收集單寧酶的粗酶液；
17、（2.5）通過分層沉淀法對粗酶液進行純化，制得單寧酶純化液。
18、為更好的實現本專利技術的方法，進一步地，所述步驟（2.2）中培養基的配置過程為，以麩皮、葡萄糖、豆粕粉作為發酵培養基的底物，加入無機鹽的水溶液后，滅菌、冷卻。
19、為更好的實現本專利技術的方法，進一步地，所述培養基中，麩皮、葡萄糖、豆粕粉按質量比1:2:1均勻混合，培養基底物與加入無機鹽的水溶液按質量比為3:5，每升無機鹽的水溶液中含5g~10g的nh4h2po4、2g~4g的k2hpo4、1g~3g的mgso4·7h2o、1g~3g的cacl2。
20、為更好的實現本專利技術的方法，進一步地，所述步驟（2.5）中，通過分層沉淀法對粗酶液進行純化的具體過程為：向粗酶液中加入飽和氯化鈉水溶液，濾出收集沉淀后，使用酒石酸-酒石酸鈉緩沖液溶解沉淀，使用層析柱層析，獲得單寧酶純化液。
21、本專利技術與現有技術相比，具有以下優點及有益效果：
22、本專利技術一種新的制備百藥煎的炮制方法，其不涉及發酵菌種，通過直接加入單寧酶與五倍子以及濃縮茶汁混合，在加入活性炭粉末后，一種類似的酒曲發酵的形式，獲得了成品百藥煎，整個過程，不涉及生物發酵，有嚴格的消毒過程，基本杜絕了黃曲霉等有害菌的混入過程，大大降低了百藥煎的質量控制的難度，對制得的百藥煎成品中沒食子酸含量超過傳統百藥煎中沒食子酸的含量，且重復性好，每次成品中沒食子酸含量較為穩定。
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【技術保護點】
1.一種避免黃曲霉的百藥煎炮制方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的一種避免黃曲霉的百藥煎炮制方法，其特征在于，所述步驟（1）中，將洗凈的五倍子置于70℃的烘箱中烘烤48h進行烘干，利用粉碎機將烘干后的五倍子粉碎。
3.根據權利要求1或2所述的一種避免黃曲霉的百藥煎炮制方法，其特征在于，所述步驟（1）中，用250℃~300℃高溫水蒸氣對五倍子粉末進行消毒滅菌。
4.根據權利要求1或2所述的一種避免黃曲霉的百藥煎炮制方法，其特征在于，所述步驟（2）中，單寧酶純化液的制備過程包括以下步驟：
5.根據權利要求4所述的一種避免黃曲霉的百藥煎炮制方法，其特征在于，所述步驟（2.2）中培養基的配置過程為，以麩皮、葡萄糖、豆粕粉作為發酵培養基的底物，加入無機鹽的水溶液后，滅菌、冷卻。
6.根據權利要求5所述的一種避免黃曲霉的百藥煎炮制方法，其特征在于，所述培養基中，麩皮、葡萄糖、豆粕粉按質量比1:2:1均勻混合，培養基底物與加入無機鹽的水溶液按質量比為3:5，每升無機鹽的水溶液中含5g~10g的NH4H2PO4、2g~4g的K2HPO4、1g~3g的MgSO4·7H2O、1g~3g的CaCl2。
7.根據權利要求6所述的一種避免黃曲霉的百藥煎炮制方法，其特征在于，所述步驟（2.5）中，通過分層沉淀法對粗酶液進行純化的具體過程為：向粗酶液中加入飽和氯化鈉水溶液，濾出收集沉淀后，使用酒石酸-酒石酸鈉緩沖液溶解沉淀，使用層析柱層析，獲得單寧酶純化液。
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【技術特征摘要】
1.一種避免黃曲霉的百藥煎炮制方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的一種避免黃曲霉的百藥煎炮制方法，其特征在于，所述步驟（1）中，將洗凈的五倍子置于70℃的烘箱中烘烤48h進行烘干，利用粉碎機將烘干后的五倍子粉碎。
3.根據權利要求1或2所述的一種避免黃曲霉的百藥煎炮制方法，其特征在于，所述步驟（1）中，用250℃~300℃高溫水蒸氣對五倍子粉末進行消毒滅菌。
4.根據權利要求1或2所述的一種避免黃曲霉的百藥煎炮制方法，其特征在于，所述步驟（2）中，單寧酶純化液的制備過程包括以下步驟：
5.根據權利要求4所述的一種避免黃曲霉的百藥煎炮制方法，其特征在于，所述步驟（2.2）中培養基的配置過程為，以麩...
【專利技術屬性】
技術研發人員：馬英祥，
申請(專利權)人：四川一眾藥業有限公司，
類型：發明
國別省市：
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