【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及生物醫藥，具體涉及中藥提取物及其在制備細胞壞死性凋亡抑制劑中的應用。
技術介紹
1、海馬神經元的生理機能和人的記憶力有密切的關系，如果海馬神經元受損，比如腦炎，腦外傷腦萎縮造成的海馬神經萎縮，就會出現記憶力障礙或者是癡呆的表現。
2、ht-22細胞是小鼠海馬神經元細胞系，來源于ht-4細胞系的亞克隆。ht-22細胞系是從ht-4細胞系通過亞克隆技術獲得的永生化細胞系。
3、程序性壞死是近幾年在死亡領域的研究熱點，越來越多的實驗數據表明這種高度受調控細胞死亡方式與機體先天免疫反應、炎癥相關疾病的發生發展具有密切聯系。當細胞缺乏caspase-8時，tnf-α與tnfr1結合導致ripk1的激活。活化的ripk1在多個殘基上發生自磷酸化，ripk3在壞死體中被磷酸化在ser227上，ripk3同源寡聚體最終磷酸化thr357/ser358殘基上的mlkl。然后，mlkl從細胞質易位到細胞膜以破壞細胞膜完整性，誘導程序性壞死。
4、ht-22細胞的程序性死亡造成小鼠海馬神經元的損傷。抑制ht-22細胞的程序性死亡是避免海馬神經元的損傷的重要手段。
5、但是現有的ht-22細胞的程序性死亡抑制劑主要包括ferrostatin-1，而ferrostatin-1生物利用度低和半衰期短，需要頻繁給藥以維持有效的血藥濃度，從而增加藥物的不良反應風險。中藥是傳統上安全性高、副作用少的藥物類型。因此，利用中藥制備ht-22細胞的程序性死亡抑制劑意義重大。
技術
1、為開發一種中藥在調控細胞壞死性凋亡的用途，本專利技術提供了中藥提取物及其在制備細胞壞死性凋亡抑制劑中的應用。本專利技術提供的中藥提取物能夠作為細胞壞死性凋亡抑制劑，從而減輕海馬神經元的損傷，使海馬區神經元結構、形態正常，邊緣圓潤，尼氏體豐富，進一步對退行性疾病有治療效果，如對抑郁癥有明顯的改善。
2、本專利技術提供了中藥提取物在制備細胞壞死性凋亡抑制劑中的應用，按重量份計，所述中藥提取物由以下組分制成：北柴胡10份～14份，當歸8份～11份，炒白芍10份～14份，白術8份～12份，茯苓14份～16份，甘草2份～4份，丹皮10份～14份，生梔子10份～14份，石菖蒲10份～14份，遠志10份～14份，薄荷5份～7份；
3、所述中藥提取物提取步驟為：將以上重量份數的中藥組分與蒸餾水按照1：10-11混合后通過煎煮、過濾、旋蒸濃縮、干燥得到中藥提取物；
4、所述細胞壞死性凋亡抑制劑用于抑制ht-22細胞的壞死性凋亡。
5、本專利技術提供的中藥提取物通過其活性成分作為細胞壞死性凋亡抑制劑，抑制小鼠海馬神經元細胞(ht-22)壞死性凋亡，減輕海馬神經元的損傷，使海馬區神經元結構、形態正常，邊緣圓潤，尼氏體豐富。
6、進一步地，所述細胞壞死性凋亡抑制劑為所述中藥提取物，或者為中藥提取物與輔料復配后的組合物。
7、進一步地，所述輔料為乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤蘚糖醇、麥芽糖醇和淀粉中的任意一種或幾種的組合。
8、進一步地，所述細胞壞死性凋亡抑制劑中的有效成分包括生物堿類33種，碳水化合物類7種，脂肪酸類12，聚酮類5種，莽草酸和苯丙烷類38種，萜類19種。
9、進一步地，所述細胞壞死性凋亡抑制劑的有效成分包括：2-furoic?acid、marmesin、procyanidin?b2、4-piperidinemethanol,4-fluoro-、linamarin、maltotetraose、cycloleucin、atractylenolide?iii、180-181pe、coniferyl?alcohol、parthenolide、liquiritin、agmatine、pro-arg、d-proline、aspartic?acid、aspartylphenylalanine、asparagine、methyl?3-aminobenzoate、guanosine、deoxyribose、adenosine?monophosphate、luteolin、1,5-anhydro-d-sorbitol、hypoxanthine、glycerophosphocholine、leu-leu、ganciclovir、zearalenone、leu-phe、4-aminosalicylic?acid、deoxycorticosterone、evodiamine、luminol、sulfadoxin、caftaric?acid、2-methoxycinnamic?acid、loxistatin?acid、1-.beta.-d-arabinofuranosyluracil?5'-monophosphate、anabasine、licochalcone?a、st?638、stanolone、icariin?ii、nicotinuric?acid、methyl?4-coumarate、beclomethasone、guanosine5'-diphospho-.beta.-l-fucose、ethyl4-hydroxyquinoline-2-carboxylate、tyr-pro-phe、sucrose、sulconazole、lithocholylglycine、ro?31-7549、d-(+)-neopterin、r406、isovitexin、suramin、eugenol?gentiobioside、folinic?acid和hypocrellin?b。
10、進一步地，所述細胞壞死性凋亡抑制劑具備如下功效：
11、減輕海馬區神經元的損傷；
12、治療抑郁癥、阿爾茲海默病或帕金森。
13、進一步地，按重量份計，所述中藥提取物由以下組分制成：北柴胡12份，當歸10份，炒白芍12份，白術10份，茯苓15份，甘草3份，丹皮12份，生梔子12份，石菖蒲12份，遠志12份，薄荷6份。
14、本專利技術提供了一種中藥提取物的制備方法，包括如下步驟：
15、按重量份稱取以下中藥組分：北柴胡10份～14份，當歸8份～11份，炒白芍10份～14份，白術8份～12份，茯苓14份～16份，甘草2份～4份，丹皮10份～14份，生梔子10份～14份，石菖蒲10份～14份，遠志10份～14份，薄荷5份～7份；
16、將以上重量份數的中藥組分與蒸餾水按照1：10-11混合后煮沸40min～50min，過濾后分別收集濾渣和第一濾液，第一濾液作為第一湯劑；
17、濾渣加6-7倍蒸餾水繼續煮沸40min～50min，過濾后收集第二濾液，得第二湯劑，然后第一湯劑和第二湯劑混合均勻，過濾、旋蒸濃縮、凍干后，得到凍干粉，獲得中藥提取物。
18、進一步地，所述旋蒸濃縮的參數為：一次藥量300ml、冷凝循環泵溫度：-5.4℃、真空泵：0.095mpa、溫度：50℃、轉速：本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.中藥提取物在制備細胞壞死性凋亡抑制劑中的應用，其特征在于，按重量份計，所述中藥提取物由以下中藥組合物制成：北柴胡10份～14份，當歸8份～11份，炒白芍10份～14份，白術8份～12份，茯苓14份～16份，甘草2份～4份，丹皮10份～14份，生梔子10份～14份，石菖蒲10份～14份，遠志10份～14份，薄荷5份～7份；
2.根據權利要求1所述的中藥提取物在制備細胞壞死性凋亡抑制劑中的應用，其特征在于，所述細胞壞死性凋亡抑制劑為所述中藥提取物，或者為中藥提取物與輔料復配后的組合物。
3.根據權利要求2所述的中藥提取物在制備細胞壞死性凋亡抑制劑中的應用，其特征在于，所述輔料為乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤蘚糖醇、麥芽糖醇和淀粉中的任意一種或幾種的組合。
4.根據權利要求1所述的中藥提取物在制備細胞壞死性凋亡抑制劑中的應用，其特征在于，所述細胞壞死性凋亡抑制劑中的有效成分包括生物堿類33種，碳水化合物類7種，脂肪酸類12，聚酮類5種，莽草酸和苯丙烷類38種，萜類19種。
5.根據權利要求4所述的中藥提取物在制備細胞
6.根據權利要求1所述的中藥提取物在制備細胞壞死性凋亡抑制劑中的應用，其特征在于，所述細胞壞死性凋亡抑制劑具備如下功效：
7.根據權利要求1所述的中藥提取物在制備細胞壞死性凋亡抑制劑中的應用，其特征在于，按重量份計，所述中藥提取物由以下組分制成：北柴胡12份，當歸10份，炒白芍12份，白術10份，茯苓15份，甘草3份，丹皮12份，生梔子12份，石菖蒲12份，遠志12份，薄荷6份。
8.一種中藥提取物的制備方法，其特征在于，所述中藥提取物由權利要求1中所述的中藥組合物制得；包括如下步驟：
9.根據權利要求8所述的中藥提取物的制備方法，其特征在于，所述旋蒸濃縮的參數為：一次藥量300ml、冷凝循環泵溫度：-5.4℃、真空泵：0.095MPa、溫度：50℃、轉速：100RPM，獲取濃縮后藥液量30ml；
10.一種權利要求8-9任一項所述的制備方法制得的中藥提取物。
...【技術特征摘要】
1.中藥提取物在制備細胞壞死性凋亡抑制劑中的應用，其特征在于，按重量份計，所述中藥提取物由以下中藥組合物制成：北柴胡10份～14份，當歸8份～11份，炒白芍10份～14份，白術8份～12份，茯苓14份～16份，甘草2份～4份，丹皮10份～14份，生梔子10份～14份，石菖蒲10份～14份，遠志10份～14份，薄荷5份～7份；
2.根據權利要求1所述的中藥提取物在制備細胞壞死性凋亡抑制劑中的應用，其特征在于，所述細胞壞死性凋亡抑制劑為所述中藥提取物，或者為中藥提取物與輔料復配后的組合物。
3.根據權利要求2所述的中藥提取物在制備細胞壞死性凋亡抑制劑中的應用，其特征在于，所述輔料為乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤蘚糖醇、麥芽糖醇和淀粉中的任意一種或幾種的組合。
4.根據權利要求1所述的中藥提取物在制備細胞壞死性凋亡抑制劑中的應用，其特征在于，所述細胞壞死性凋亡抑制劑中的有效成分包括生物堿類33種，碳水化合物類7種，脂肪酸類12，聚酮類5種，莽草酸和苯丙烷類38種，萜類19種。
5.根據權利要求4所述的中藥提取物在制備細胞壞死性凋亡抑制劑中的應用，其特征在于，所述細胞壞死性凋亡抑制劑的有效成分包括：2-furoic?acid、marmesin、procyanidin?b2、4-piperidinemethanol,4-fluoro-、linamarin、maltotetraose、cycloleucin、atractylenolide?iii、180-181pe、coniferyl?alcohol、parthenolide、liquiritin、agmatine、pro-arg、d-proline、aspartic?acid、aspartylphenylalanine、asparagine、methyl?3-aminobenzoate、guanosine、deoxyribose、adenosinemonophosphate、luteolin、1,5-anhydro-d-sorbitol、hypoxanthine、glycerophosphocholine、leu-leu、ganciclovir、z...
【專利技術屬性】
技術研發人員：王媛媛，許二平，李自波，龔育杭，栗俞程，劉思琪，盧可怡，白明，汪保英，閆向麗，蘇攀，時依凡，
申請(專利權)人：河南中醫藥大學，
類型：發明
國別省市：
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