【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于合成生物學(xué)，具體涉及一種新型的基因工程重組膠原蛋白、其制備方法及用途。
技術(shù)介紹
1、膠原蛋白是一種生物高分子蛋白，是動物體內(nèi)分布最廣、含量最豐富、種類較多的纖維蛋白質(zhì)家族，占蛋白質(zhì)總量的25％-30％。作為細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分，其具有抗原性低、可生物降解、易吸收、無毒、生物相容性好等特點，且與組織的形成、成熟、細(xì)胞間信息的傳遞以及關(guān)節(jié)潤滑、傷口愈合、鈣化作用、血液凝固和衰老等有著密切的關(guān)系，是生物科技產(chǎn)業(yè)最關(guān)鍵的原材料之一，在醫(yī)學(xué)材料、化妝品、食品工業(yè)中均有廣泛應(yīng)用。
2、止血是指在出血時通過生理自發(fā)或外來干預(yù)快速讓血液停止向外流動的行為。外來干預(yù)則主要是借助止血材料對傷口進行處理，這是控制大量出血采用的必要手段。在創(chuàng)傷急救和外科手術(shù)中，止血是治療的重要一環(huán)。不受控制的失血仍是造成死亡的主要原因。
3、重組膠原蛋白由于其抗原性弱、具有優(yōu)異生物相容性、可被機體吸收、細(xì)胞粘附增殖性高等方面優(yōu)勢，在術(shù)中膠原蛋白材料止血、傷口敷料和組織工程支架等臨床領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。對于止血產(chǎn)品來說止血時間是評判止血效果最有效的指標(biāo)，與手術(shù)常用的無菌紗布按壓止血相比，目前市面上的重組膠原類止血產(chǎn)品如止血海綿、止血紗布等均能有效的縮短止血時間。然而，創(chuàng)口止血是關(guān)乎生命的重大衛(wèi)生健康問題，特別是在軍事、應(yīng)急救援等領(lǐng)域，直接關(guān)系著人們的生命安全。更有效、止血時效更強的產(chǎn)品一直是人們追求的目標(biāo)。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、鑒于上述原因，本專利技術(shù)的目的在于，提供能夠更為快速有效
2、專利技術(shù)人為解決上述技術(shù)問題進行了深入研究，結(jié)果在眾多型別的膠原蛋白中發(fā)現(xiàn)了來自于人xvii型膠原蛋白的一段截短蛋白具有意料不到的特性——其能夠有效縮短止血時間，從而提高快速高效止血的重組xvii型膠原蛋白，以及以該重組xvii型膠原蛋白作為原料的快速止血產(chǎn)品。
3、即，本專利技術(shù)包括：
4、1.一種具有止血功能的重組人xvii型膠原蛋白，其為人xvii型膠原蛋白的截短蛋白，其氨基酸序列如seq?id?no：1所示。
5、2.編碼項1所述的重組人xvii型膠原蛋白的核酸。
6、3.包含項2所述的核酸的表達(dá)載體。
7、4.導(dǎo)入了項3所述的表達(dá)載體的宿主細(xì)胞。所述宿主細(xì)胞可以為畢赤酵母、釀酒酵母、大腸桿菌或枯草芽抱桿菌，優(yōu)選為畢赤酵母。
8、5.一種生產(chǎn)項1所述的重組人xvii型膠原蛋白的方法，其包括：培養(yǎng)項4所述的宿主細(xì)胞并收集細(xì)胞培養(yǎng)物的步驟。
9、6.根據(jù)項5所述的方法，其還包括對所述細(xì)胞培養(yǎng)物進行分離純化的步驟，所述分離純化采用鹽析、色譜層析、離子交換層析、親和層析、疏水層析、酸堿沉淀、膜分離中的一種或幾種的組合。
10、7.一種止血產(chǎn)品，其是以項1所述的重組人xvii型膠原蛋白作為原料制備的。所述止血產(chǎn)品優(yōu)選為醫(yī)療器械，例如止血海綿。
11、8.項1所述的重組人xvii型膠原蛋白在制備止血產(chǎn)品中的用途。所述止血產(chǎn)品優(yōu)選為醫(yī)療器械，例如止血海綿。
12、本專利技術(shù)的有益效果包括：提供了一種新的重組人xvii型膠原蛋白，其具有高效、快速的止血性能，同時該重組膠原蛋白易于分離純化，通過簡單的膜分離及層析分離即可制備純度達(dá)97％以上的純品，其生產(chǎn)工藝易于放大。在止血性能方面，該重組人xvii型膠原蛋白相比市售產(chǎn)品明顯地縮短了止血時間，由止血時間由市售產(chǎn)品的200s左右縮短至該重組人xvii型膠原蛋白產(chǎn)品額148s左右，止血性能提升顯著。
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1.一種具有止血功能的重組人XVII型膠原蛋白，其為人XVII型膠原蛋白的截短蛋白，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。
2.編碼權(quán)利要求1所述的重組人XVII型膠原蛋白的核酸。
3.包含權(quán)利要求2所述的核酸的表達(dá)載體。
4.導(dǎo)入了權(quán)利要求3所述的表達(dá)載體的宿主細(xì)胞；所述宿主細(xì)胞可以為畢赤酵母、釀酒酵母、大腸桿菌或枯草芽抱桿菌，優(yōu)選為畢赤酵母。
5.一種生產(chǎn)權(quán)利要求1所述的重組人XVII型膠原蛋白的方法，其包括：培養(yǎng)權(quán)利要求4所述的宿主細(xì)胞并收集細(xì)胞培養(yǎng)物的步驟。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其還包括對所述細(xì)胞培養(yǎng)物進行分離純化的步驟，所述分離純化采用鹽析、色譜層析、離子交換層析、親和層析、疏水層析、酸堿沉淀、膜分離中的一種或幾種的組合。
7.一種止血產(chǎn)品，其包含權(quán)利要求1所述的重組人XVII型膠原蛋白。
8.權(quán)利要求1所述的重組人XVII型膠原蛋白在制備止血產(chǎn)品中的用途。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種具有止血功能的重組人xvii型膠原蛋白，其為人xvii型膠原蛋白的截短蛋白，其氨基酸序列如seq?id?no：1所示。
2.編碼權(quán)利要求1所述的重組人xvii型膠原蛋白的核酸。
3.包含權(quán)利要求2所述的核酸的表達(dá)載體。
4.導(dǎo)入了權(quán)利要求3所述的表達(dá)載體的宿主細(xì)胞；所述宿主細(xì)胞可以為畢赤酵母、釀酒酵母、大腸桿菌或枯草芽抱桿菌，優(yōu)選為畢赤酵母。
5.一種生產(chǎn)權(quán)利要求1所述的重組人x...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：范代娣，董楊芳，段志廣，徐茹，黃蓉，宇文偉剛，陳志奇，劉紅艷，嚴(yán)建亞，
申請(專利權(quán))人：西安巨子生物基因技術(shù)股份有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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