【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試裝置及方法，屬于中風后小鼠的行為絕望實驗研究。
技術介紹
1、中風是全球第三大致死和致殘原因。中風后恢復的患者通常會表現出情緒和情感障礙的跡象，尤其是抑郁癥。中風后的抑郁狀態被定義為卒中后抑郁（psd）。大多數受影響的個體在中風后不久會發展出輕度至中度的抑郁，但抑郁癥可能在數月或數年后出現。中風幸存者中，一年期中，抑郁癥的發病率為大約1/3。患有psd的患者更容易出現認知缺陷、自殺傾向和長期殘疾。psd的發病可能受到多種因素的影響，與重大抑郁癥（mdd）相似而不相同。然而，最近進行的幾項多中心、雙盲、隨機、安慰劑對照研究并不支持在中風后使用選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑（ssris），這是首選的抗抑郁藥6-8，這在psd的臨床治療中留下了空白。需要進一步的研究來確定原因和干預措施，以預防和治療psd。
2、抑郁情緒和快感缺失是重性抑郁障礙（mdd）的兩個基本癥狀，至少必須有一個與其他關鍵癥狀一起出現才能診斷為mdd。在臨床上，個體的自我報告提供了抑郁癥的關鍵信息。然而，在實驗室中，很難確定一只小鼠是否“抑郁”。人類和小鼠無法通過語言溝通是部分原因。幸運的是，通過簡短觀察特定物種典型行為，這些行為類似于人類抑郁的某些方面，已經建立了幾種行為測試，并廣泛用于評估嚙齒動物的抑郁樣狀態，例如懸尾測試（tst）和強迫游泳測試（fst）用于絕望，蔗糖偏好測試（spt）用于快感缺失，以及新奇抑制進食測試（nsft）、開放場測試（oft）和高架十字迷宮測試（epmt）用于評估小鼠抑
3、懸尾試驗（tst）是一種評估小鼠行為絕望的經典方法，常用于抑郁癥的基礎和臨床前研究。然而，tst本身依賴于運動功能，當應用于嚴重運動協調受損的小鼠，如中風后抑郁模型小鼠時，測試結果可能會產生誤導。總的來說，cms同時在小鼠中引起行為絕望（在fst和tst中與對照組相比靜止時間增加）和快感缺失（在spt中與對照組相比蔗糖偏好降低），如圖1a-d所示。然而，我們發現，與對照組小鼠相比，缺血小鼠在spt中蔗糖偏好降低，但在fst和tst中的不動時間相似（圖1a-d）。mcao引起的運動功能受損（圖1e,f）可以解釋這種差異，而mcao不影響運動活動（圖1g）。運動功能受損使得小鼠在懸掛或游泳時協調變得困難，所以小鼠本能地為平衡而掙扎，而不是為了生存，導致不動時間減少。此外，使用深度學習框架deeplabcut35對tst視頻進行無標記姿態估計（圖1h）發現了mcao小鼠后爪軌跡的特征。對照組和cms小鼠的兩個后爪軌跡相對分開，但mcao小鼠的軌跡大大重疊，進一步支持了mcao小鼠在tst中的不平衡運動（圖1i）。總之，經典的tst和fst在用于評估中風后小鼠的行為絕望時會提供誤導信息。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試裝置及方法，是一種基于經典tst改良后的方法，避免運動功能受損的干擾，并可用于評估中風后小鼠的行為絕望，用以解決現有技術的fst或tst不適合評估嚴重中風后嚙齒動物的行為絕望的技術問題。
2、本專利技術用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試裝置采用如下技術方案：一種用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試裝置，其包括懸掛室，懸掛室的前側面為透明板，懸掛室外的前方設有攝像機，懸掛室頂部安裝有用于懸吊小鼠的吊件，吊件上連接有壓力傳感器，所述懸掛室內部設有斜板組件，斜板組件包括斜向設置的斜板和滑動支撐件，滑動支撐件設置在斜板底部對斜板進行支撐，所述斜板由前到后向上傾斜且斜板位于吊件的下方，所述斜板與水平面的夾角為40°-80°。
3、所述斜板的底部連接有底板，所述滑動支撐件包括底板和分別設置在底板左右兩側的導軌，所述底板與斜板的底部固定連接，兩個導軌平行設置且沿前后方向延伸，兩個導軌相互靠近的內側設有導軌槽，所述底板的兩側分別滑動安裝在導軌槽內，每個導軌槽上分別設有用將底板鎖緊的鎖緊件。
4、所述鎖緊件包括u型件，u型件的開口朝向對應的導軌槽且卡在導軌槽上，u型件的下側壓緊在底板上，u型件的上側位于導軌的上方，所述u型件的上側設有螺紋孔，螺紋孔內安裝有用于頂緊導軌的螺栓。
5、所述底板的前端設有手柄，用于斜板位置調整。
6、所述懸掛室的左右兩側面和頂面均為不透明板，懸掛室的后側面和底面均為白色發光背板，所述吊件為掛鉤。
7、本專利技術用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試方法采用如下技術方案：一種用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試方法，其是采用上述懸尾測試裝置，包括以下步驟：（1）剪取一段膠帶，該膠帶用于固定在小鼠尾巴上；（2）將小鼠放在測試臺上，讓其自由移動，從小鼠尾巴末端標記3厘米的距離，拉直小鼠尾巴，將步驟（1）剪取的膠帶的一端固定在小鼠尾巴的腹側，另一端固定在小鼠尾巴的背側，膠帶兩端粘貼在小鼠尾巴上的長度相等，均為小鼠尾巴末端至3厘米段的長度，將膠帶的兩端粘合在一起并確保小鼠尾巴被膠帶緊密包裹，膠帶的中間部位形成一個環；（3）對粘貼有膠帶的小鼠稱重，記錄該小鼠的體重為x克；（4）將粘貼有膠帶的同窩調試小鼠懸掛在懸掛室內，將膠帶環掛在吊件上，保持小鼠的背部朝向攝像頭，移動斜板直到小鼠的前爪剛好能接觸到斜板的表面，當壓力傳感器的數字顯示會在x-1至x克之間閃爍時，斜板定位成功，將斜板鎖緊該固定位置處；（5）使用同一只小鼠重復步驟（4），直至其他懸掛室調試完成，將小鼠從懸掛室中取出，移除膠帶，撫觸小鼠并將其放回原籠；（6）打開與攝像機連接電腦行為記錄軟件的預覽窗口，調整相機參數以獲得清晰的視頻，并記錄一個11秒的懸掛室無鼠的背景視頻；（7）重復步驟（1）-（3）的操作過程，然后將實驗測試小鼠懸掛在懸掛室內，保持小鼠的背部朝向攝像機的攝像頭，確保懸掛的小鼠僅能用前爪觸碰到斜板的表面，壓力傳感器顯示的數字在x-1至x克之間；（8）對小鼠進行固定時長的視頻錄制，在測試期間避免噪音、光線和顯著的環境變化；視頻錄制結束后，將小鼠從懸掛室中取出，并取下小鼠尾巴上的膠帶，撫觸小鼠并將其放回原籠；（9）重復測試程序，即重復上述步驟（7）-（8），直到待測試的所有小鼠都完成測試；（10）選擇步驟（8）拍攝的視頻用于分析，在行為分析軟件中打開實驗中錄制的視頻，并設置分析框，分析框為軟件分析涵蓋的區域，確保分析框在步驟（8）錄制的視頻的任何時間點都能容納小鼠的身體；利用行為分析軟件進行自動行為分析；（11）步驟（10）得到小鼠的行為分析結本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試裝置，其包括懸掛室，懸掛室的前側面為透明板，懸掛室外的前方設有攝像機，懸掛室頂部安裝有用于懸吊小鼠的吊件，吊件上連接有壓力傳感器，其特征在于：所述懸掛室內部設有斜板組件，斜板組件包括斜向設置的斜板和滑動支撐件，滑動支撐件設置在斜板底部對斜板進行支撐，所述斜板由前到后向上傾斜且斜板位于吊件的下方，所述斜板與水平面的夾角為40°-80°。
2.根據權利要求1所述的用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試裝置，其特征在于：所述斜板的底部連接有底板，所述滑動支撐件包括底板和分別設置在底板左右兩側的導軌，所述底板與斜板的底部固定連接，兩個導軌平行設置且沿前后方向延伸，兩個導軌相互靠近的內側設有導軌槽，所述底板的兩側分別滑動安裝在導軌槽內，每個導軌槽上分別設有用將底板鎖緊的鎖緊件。
3.根據權利要求2所述的用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試裝置，其特征在于：所述鎖緊件包括U型件，U型件的開口朝向對應的導軌槽且卡在導軌槽上，U型件的下側壓緊在底板上，U型件的上側位于導軌的上方，所述U型件的上側設有螺紋孔，螺紋孔內安裝有用于頂緊導
4.根據權利要求2所述的用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試裝置，其特征在于：所述底板的前端設有手柄，用于斜板位置調整。
5.根據權利要求1所述的用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試裝置，其特征在于：所述懸掛室的左右兩側面和頂面均為不透明板，懸掛室的后側面和底面均為白色發光背板，所述吊件為掛鉤；所述斜板與水平面的夾角為60°。
6.一種用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試方法，其是采用權利要求1中所述的懸尾測試裝置，其特征在于，包括以下步驟：
7.根據權利要求6所述的用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試方法，其特征在于：所述懸掛室有4個，4個懸掛室同時用于小鼠行為絕望的懸尾測試；在步驟（5）中，每個小鼠尾巴粘附膠帶環，依次將4只小鼠分別掛在4個懸掛室中，每次均保持小鼠背部朝向攝像頭；每只小鼠的懸掛標準應與步驟（4）中的一致，在同一場次中測試的4只小鼠盡可能快速地依次懸掛，10秒內完成4只小鼠的懸掛。
8.根據權利要求6所述的用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試方法，其特征在于：步驟（6）中錄制視頻的時長為6min；步驟（9）中，錄制視頻的時長為11s。
9.根據權利要求6所述的用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試方法，其特征在于：每次測試時，打開懸掛室的發光背板，并關閉檢測室內其他燈光，在測試整個過程中，保持懸掛室的發光背板作為唯一的光源；每次測試開始前，用無味洗潔精清潔懸掛室，并用70%的乙醇徹底擦拭斜板，以驅散之前測試過的小鼠留下的氣味。
10.根據權利要求6所述的用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試方法，其特征在于：步驟（10）中，分析框比小鼠身體大，分析框中分別在小鼠身體的左右兩側留出一個身體寬度的空間。
...【技術特征摘要】
1.一種用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試裝置，其包括懸掛室，懸掛室的前側面為透明板，懸掛室外的前方設有攝像機，懸掛室頂部安裝有用于懸吊小鼠的吊件，吊件上連接有壓力傳感器，其特征在于：所述懸掛室內部設有斜板組件，斜板組件包括斜向設置的斜板和滑動支撐件，滑動支撐件設置在斜板底部對斜板進行支撐，所述斜板由前到后向上傾斜且斜板位于吊件的下方，所述斜板與水平面的夾角為40°-80°。
2.根據權利要求1所述的用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試裝置，其特征在于：所述斜板的底部連接有底板，所述滑動支撐件包括底板和分別設置在底板左右兩側的導軌，所述底板與斜板的底部固定連接，兩個導軌平行設置且沿前后方向延伸，兩個導軌相互靠近的內側設有導軌槽，所述底板的兩側分別滑動安裝在導軌槽內，每個導軌槽上分別設有用將底板鎖緊的鎖緊件。
3.根據權利要求2所述的用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試裝置，其特征在于：所述鎖緊件包括u型件，u型件的開口朝向對應的導軌槽且卡在導軌槽上，u型件的下側壓緊在底板上，u型件的上側位于導軌的上方，所述u型件的上側設有螺紋孔，螺紋孔內安裝有用于頂緊導軌的螺栓。
4.根據權利要求2所述的用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試裝置，其特征在于：所述底板的前端設有手柄，用于斜板位置調整。
5.根據權利要求1所述的用于評估中風后小鼠行為絕望的懸尾測試裝置，其特征在于：所述懸掛室的左右兩側面和頂面均為不...
【專利技術屬性】
技術研發人員：羅春霞，吳海銀，林瑜輝，常磊，孔沛冉，
申請(專利權)人：南京醫科大學，
類型：發明
國別省市：
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