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【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及基因工程,具體地,涉及osralf6基因和/或osralf6蛋白在促進水稻生長中的應用。
技術介紹
1、植物的根系不僅對于吸收水分和養分維持植物生存至關重要,還為植物提供機械支撐,保持植株直立。谷類植物的根系類型屬于須根系統,主要由胚后不定根組成,也稱為節根或冠根,從莖節處基部產生。在胚胎發生過程中分化的根頂端分生組織(root?apicalmeristem,ram)的產生胚根,之后五個胚冠根從胚芽鞘的節處出現。胚后冠根從主莖和分蘗的節基部發生。主根和冠根可以分枝產生兩種類型的次生根,分別是大側根和小側根,小側根不再產生更多的分枝,而大側根能產生更小的側根。主根在種子萌發后的一段時間發揮著重要的作用,直到第十天左右,主根退化,冠根開始行使功能。主根雖然只在萌發后十天內發揮功能,但是主根的正常發育對于幼苗期植物的生長至關重要。
2、主根的伸長受多種因素影響,包括快速堿化因子(rapid-alkalinization-factor,ralf)。ralf的結構主要包括一個位于n端的信號肽和一個位于c端的保守ralf結構域。ralf家族十分龐大,各成員的功能復雜多樣。擬南芥中至少存在35個raif成員,各成員對根的生長作用不盡相同,有些對根的生長起到不同程度的抑制作用,而有些則促進根的發生(強曉楠,李鑫,陳佳,廖紅東,于峰.擬南芥ralf多肽家族的功能多樣性初步分析[j].生物技術通報,2019,35(1):2-10.)。
3、水稻是我國重要的糧食作物之一,水稻產量直接關系到我國的糧食安全。根和穗的
技術實現思路
1、為解決現有技術中存在的上述問題,本專利技術提供了osralf6基因和/或osralf6蛋白在促進水稻生長中的應用
2、本專利技術的第一個目的是提供osralf6基因和/或osralf6蛋白在促進水稻生長中的應用。
3、本專利技術的第二個目的是提供osralf6基因和/或osralf6蛋白在促進水稻的根和/或穗生長中的應用。
4、本專利技術的第三個目的是提供osralf6基因和/或osralf6蛋白在提高水稻產量中的應用。
5、本專利技術的第四個目的是提供抑制osralf6基因和/或osralf6蛋白表達的試劑在促進水稻生長中的應用。
6、本專利技術的第五個目的是提供抑制osralf6基因和/或osralf6蛋白表達的試劑在促進水稻的根和/或穗生長中的應用。
7、本專利技術的第六個目的是提供抑制osralf6基因和/或osralf6蛋白表達的試劑在提高水稻產量中的應用。
8、本專利技術的第七個目的是提供一種促進水稻生長的方法。
9、為了實現上述目的,本專利技術是通過以下方案予以實現的:
10、本專利技術利用基因組靶向編輯系統在水稻中對osralf6基因進行靶向編輯,使目標基因發生突變,致使突變后的基因發生堿基缺失和增添,導致不能生成正常編碼的osralf6蛋白,獲得osralf6功能缺失的突變體水稻。與野生型水稻相比,osralf6功能缺失的突變體水稻具有明顯差異的生長表型,如根長增加,穗長增加。
11、本專利技術請求保護以下內容:
12、osralf6基因和/或osralf6蛋白在促進水稻生長中的應用。
13、osralf6基因和/或osralf6蛋白在促進水稻的根和/或穗生長中的應用。
14、osralf6基因和/或osralf6蛋白在提高水稻產量中的應用。
15、抑制osralf6基因和/或osralf6蛋白表達的試劑在促進水稻生長中的應用。
16、抑制osralf6基因和/或osralf6蛋白表達的試劑在促進水稻的根和/或穗生長中的應用。
17、抑制osralf6基因和/或osralf6蛋白表達的試劑在提高水稻產量中的應用。
18、所述抑制osralf6基因和/或osralf6蛋白表達的試劑為使osralf6基因發生堿基的缺失、增添或替換,不能正常編碼osralf6蛋白,導致osralf6蛋白的表達量降低或osralf6蛋白缺失。
19、優選地,所述試劑包括以osralf6基因和/或osralf6蛋白作為靶標的grna、重組表達載體或重組微生物。
20、更優選地,所述grna、重組表達載體或重組微生物的靶向位點的核苷酸序列如seqid?no:3、seq?id?no.3所示序列的完全互補序列、seq?id?no:4或seq?id?no:4所示序列的完全互補序列所示。
21、進一步優選地,所述grna包括核苷酸序列如seq?id?no:5所示或seq?id?no:5所示序列的完全互補序列所示的核酸分子。
22、更優選地,所述重組表達載體包括crispr/cas9載體。
23、進一步優選地,所述crispr/cas9載體為現有技術“cn115011618a”中的pylcrispr/cas9-mh載體。
24、更優選地,所述重組微生物包括農桿菌。
25、進一步優選地,所述農桿菌為eha105。
26、一種促進水稻生長的方法,降低osralf6基因和/或osralf6蛋白在水稻中的表達量。
27、優選地,用抑制osralf6基因和/或osralf6蛋白表達的試劑處理水稻。
28、所述抑制osralf6基因和/或osralf6蛋白表達的試劑為使osralf6基因發生堿基的缺失、增添或替換,不能正常編碼osralf6蛋白,導致osralf6蛋白的表達量降低或osralf6蛋白缺失。
29、更優選地,所述試劑包括以osralf6基因和/或osralf6蛋白作為靶標的grna、重組表達載體或重組微生物。
30、進一步優選地,所述grna、重組表達載體或重組微生物的靶向位點的核苷酸序列如seq?id?no:3、seq?id?no.3所示序列的完全互補序列、seq?id?no:4或seq?id?no:4所示序列的完全互補序列所示。
31、更進一步優選地,所述grna包括核苷酸序列如seq?id?no:5所示或seq?id?no:5所示序列的完全互補序列所示的核酸分子。
32、進一步優選地,所述重組表達載體包括crispr/cas9載體。
33、更進一步優選地,所述crispr/cas9載體為現有技術“cn115011618a”中的pylcrispr/cas9-mh載體。
34、進一步優選地,所述重組微生物包括農桿菌。
35、更進一步優選地,所述農桿菌為eh本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.OsRALF6基因和/或OsRALF6蛋白在促進水稻生長中的應用。
2.OsRALF6基因和/或OsRALF6蛋白在促進水稻的根和/或穗生長中的應用。
3.OsRALF6基因和/或OsRALF6蛋白在提高水稻產量中的應用。
4.抑制OsRALF6基因和/或OsRALF6蛋白表達的試劑在促進水稻生長中的應用。
5.抑制OsRALF6基因和/或OsRALF6蛋白表達的試劑在促進水稻的根和/或穗生長中的應用。
6.抑制OsRALF6基因和/或OsRALF6蛋白表達的試劑在提高水稻產量中的應用。
7.根據權利要求4~6任一項所述的應用,其特征在于,所述試劑包括以OsRALF6基因和/或OsRALF6蛋白作為靶標的gRNA、重組表達載體或重組微生物。
8.根據權利要求7所述的應用,其特征在于,所述gRNA、重組表達載體或重組微生物的靶向位點的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:3、SEQ?ID?NO.3所示序列的完全互補序列、SEQ?IDNO:4或SEQ?ID?NO:4所示序列的完全互補序列所示。
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1.osralf6基因和/或osralf6蛋白在促進水稻生長中的應用。
2.osralf6基因和/或osralf6蛋白在促進水稻的根和/或穗生長中的應用。
3.osralf6基因和/或osralf6蛋白在提高水稻產量中的應用。
4.抑制osralf6基因和/或osralf6蛋白表達的試劑在促進水稻生長中的應用。
5.抑制osralf6基因和/或osralf6蛋白表達的試劑在促進水稻的根和/或穗生長中的應用。
6.抑制osralf6基因和/或osralf6蛋白表達的試劑在提高水稻產量中的應用。
7.根據權利要求4~6任一項所述的應用,其特征在于,所述試劑包括以o...
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