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    一種玻璃基核酸適配體生物傳感器及其制備方法技術

    技術編號:43959702 閱讀:14 留言:0更新日期:2025-01-07 21:43
    本發明專利技術提供了一種玻璃基核酸適配體生物傳感器及其制備方法,屬于分析化學檢測技術領域。本發明專利技術提供的制備方法包括先對玻璃基材進行特定預處理、然后再與核酸適配體混合孵育完成修飾的步驟,解決了現有技術中核酸適配體修飾步驟復雜、且材料成本較高的問題。本發明專利技術提供的玻璃基核酸適配體生物傳感器制備方法簡單、穩定可控、活性強、原料便宜、可批量制備,重現性好,能夠顯著提高核酸固載效率。本發明專利技術為開展穩定可靠適配體比色傳感技術提供了技術支撐,提高了比色傳感技術的抗干擾性能,進而提高檢測的準確度,提升檢測批次之間的重現性,同時降低了檢測的難度。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術涉及分析化學檢測,尤其涉及一種玻璃基核酸適配體生物傳感器及其制備方法


    技術介紹

    1、核酸適配體生物傳感器是一種利用核酸適配體作為探針,檢測特定目標分子(如蛋白質、小分子、病原體等)的傳感器。由于核酸適配體具有高特異性、高親和力和良好的穩定性,因此它們在生物傳感器的開發中受到廣泛關注。核酸適配體生物傳感器通常通過以下步驟工作:適配體的固定:將選擇到的核酸適配體固定在固體基材(如金屬表面、玻璃、塑料等)上。靶標的結合:當樣品中靶標分子存在時,它會與固定的適配體結合,形成適配體-靶標復合物。信號檢測:利用不同的信號轉導方法(如電化學、熒光、表面增強拉曼散射等),檢測適配體-靶標結合造成的變化,并通過這些信號分析靶標的濃度。目前核酸適配體生物傳感器廣泛用于醫療診斷、食品安全、環境監測等。

    2、近年來,為了提高核酸適配體在固相表面的固定效率和結合性能,界面修飾技術得到了越來越多的關注。自組裝單層技術是通過化學反應將單分子層緊密固定在金屬材料(如金或銀)或其他固體基材表面的方法。該技術在核酸適配體的固定中表現出色。如常用的sam組分為長鏈硫醇分子,它們在金屬表面形成自組裝單層。在膜的末端引入帶有核酸適配體的分子,可以有效提高核酸的結合能力和濃度。聚合物材料(如聚乙烯醇、聚丙烯酰胺等)作為載體,能夠為核酸適配體提供更大的固定表面積,更易于優化適配體的固定效率。如聚合物鏈上的功能團可以通過共價鍵將適配體固定在表面,例如通過氨基或羧基與適配體的氨基或羧基結合。相較于化學固定,物理吸附方法簡單易行,但由于較弱的結合強度,會受到環境條件的影響。此外,納米材料(如金納米粒子、碳納米管等)由于其高比表面積和良好的生物相容性,被廣泛應用于核酸適配體的界面修飾。金納米粒子其表面可以通過硫醇基團與核酸適配體進行結合。碳納米管和石墨:能夠增強導電性和比表面積,提高生物傳感器的靈敏度。通過化學氧化處理,這些材料的表面功能化可以很方便地實現適配體的固定。

    3、中國專利cn118290728a公開了一種納米復合材料、電化學核酸適配體生物傳感器及其制備方法和應用。該專利技術首先制備具有良好電導率的au/pani/mwcnts-cooh/mos2納米復合材料,然后將該納米復合材料吸附在導電基底表面,再通過金硫鍵自組裝法在納米復合材料表面修飾核酸適配體,得到電化學核酸適配體生物傳感器。該專利技術提供的傳感器能夠實現對內毒素的特異性選擇,并且穩定性好、檢測限低、靈敏度高,具有良好的重現性,可用于食品內毒素檢測。

    4、但是上述方案中核酸適配體修飾步驟復雜、且材料成本較高。


    技術實現思路

    1、本專利技術的目的在于提供一種玻璃基核酸適配體生物傳感器及其制備方法,具有更廣闊的應用前景。

    2、為了實現上述專利技術目的,本專利技術提供以下技術方案:

    3、本專利技術提供了一種玻璃基核酸適配體生物傳感器的制備方法,包括如下步驟:

    4、s1、將玻璃基材與試劑a接觸,處理3~12h;

    5、s2、將玻璃基材進行洗滌;

    6、s3、將玻璃基材與試劑b接觸,處理1~10h;

    7、s4、將玻璃基材進行洗滌、干燥;

    8、s5、將玻璃基材與試劑c接觸,處理10~120min;

    9、s6、將玻璃基材進行洗滌、干燥,得到預處理后的玻璃基材;

    10、s6、將預處理后的玻璃基材與核酸適配體混合孵育,得到玻璃基核酸適配體生物傳感器;

    11、所述試劑a包括丙酮、鹽酸和氨水中的一種或多種;

    12、所述試劑b包括3-氨丙基三甲氧基硅烷、3-巰丙基三甲氧基硅烷、甲苯、乙醇和醋酸中的一種或多種。

    13、優選的,所述試劑c中含有戊二醇。

    14、優選的,所述洗滌采用的試劑包括水和/或乙醇。

    15、優選的,所述洗滌的次數為1~10次。

    16、優選的,所述干燥包括氮氣吹干和/或真空干燥。

    17、優選的,所述真空干燥的時間為1~6h。

    18、優選的,所述真空干燥的溫度為60~160℃。

    19、優選的,所述孵育的時間為6~12h。

    20、優選的,所述孵育后還包括在玻璃基材表面施用sds水溶液或碳酸氫鈉溶液;

    21、所述sds水溶液或碳酸氫鈉溶液的濃度為0.1%~0.6%。

    22、本專利技術還提供了上述制備方法制得的玻璃基核酸適配體生物傳感器。

    23、本專利技術的有益效果:

    24、(1)本專利技術提供的玻璃基核酸適配體生物傳感器制備方法簡單、穩定可控、活性強。

    25、(2)本專利技術提供的玻璃基核酸適配體生物傳感器制備方法原料便宜、可批量制備,重現性好,提高核酸固載效率。

    26、(3)本專利技術提供的玻璃基核酸適配體生物傳感器制備方法,具有簡單、快速等特點,對構建穩定、抗干擾性強比色法適配體傳感器具有重要意義。

    本文檔來自技高網...

    【技術保護點】

    1.一種玻璃基核酸適配體生物傳感器的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:

    2.根據權利要求1所述的玻璃基核酸適配體生物傳感器的制備方法,其特征在于,所述試劑C中含有戊二醇。

    3.根據權利要求1所述的玻璃基核酸適配體生物傳感器的制備方法,其特征在于,所述洗滌采用的試劑包括水和/或乙醇。

    4.根據權利要求3所述的玻璃基核酸適配體生物傳感器的制備方法,其特征在于,所述洗滌的次數為1~10次。

    5.根據權利要求1所述的玻璃基核酸適配體生物傳感器的制備方法,其特征在于,所述干燥包括氮氣吹干和/或真空干燥。

    6.根據權利要求5所述的玻璃基核酸適配體生物傳感器的制備方法,其特征在于,所述真空干燥的時間為1~6h。

    7.根據權利要求5所述的玻璃基核酸適配體生物傳感器的制備方法,其特征在于,所述真空干燥的溫度為60~160℃。

    8.根據權利要求1所述的玻璃基核酸適配體生物傳感器的制備方法,其特征在于,所述孵育的時間為6~12h。

    9.根據權利要求8所述的玻璃基核酸適配體生物傳感器的制備方法,其特征在于,所述孵育后還包括在玻璃基材表面施用SDS水溶液或碳酸氫鈉溶液;

    10.權利要求1~9任一項所述的制備方法制得的玻璃基核酸適配體生物傳感器。

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    【技術特征摘要】

    1.一種玻璃基核酸適配體生物傳感器的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:

    2.根據權利要求1所述的玻璃基核酸適配體生物傳感器的制備方法,其特征在于,所述試劑c中含有戊二醇。

    3.根據權利要求1所述的玻璃基核酸適配體生物傳感器的制備方法,其特征在于,所述洗滌采用的試劑包括水和/或乙醇。

    4.根據權利要求3所述的玻璃基核酸適配體生物傳感器的制備方法,其特征在于,所述洗滌的次數為1~10次。

    5.根據權利要求1所述的玻璃基核酸適配體生物傳感器的制備方法,其特征在于,所述干燥包括氮氣吹干和/或真空干燥。

    6.根據權...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:甄建輝艾連峰梁剛王敬李穎劉慶菊趙杰
    申請(專利權)人:石家莊海關技術中心
    類型:發明
    國別省市:

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