【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及生物，具體涉及辣椒賴氨酸桿菌及其在降解pbat塑料的應用。
技術介紹
1、隨著全球塑料污染問題的加劇,尋找替代傳統塑料的可持續發展方案成為當前科學研究和產業發展的熱點.在這一背景下,可生物降解塑料的相關研究備受關注,其中,聚己二酸丁二烯對苯二甲酸酯(pbat)因在環境中具有良好的降解性能而成為關注的焦點之一。pbat是一種聚酯類塑料,其結構由對苯二甲酸(簡稱“t”)、己二酸(簡稱“a”)和1,4-丁二醇(簡稱“b”)3種單體組成.反應條件溫和的微生物降解是pbat塑料降解的主要途徑之一.通過微生物的作用,高分子聚合物可以逐漸降解為較小的分子,減輕其對生態系統的不良影響。
2、在土壤環境等自然場景中pbat的降解都基于水解,在土壤場景中土質和濕度是重要影響因素,微生物種類和數量的差異性影響了pbat在自然場景中的降解速率的大小.所以在pbat降解的不同環境里面微生物降解起到了重要作用。那么尋找一種能夠對pbat高效降解的微生物菌成為環?？沙掷m發展所研究的重要課題。
技術實現思路
1、本專利技術所要解決的技術問題在于針對上述現有技術的不足，本專利技術在沙灘土壤中篩出的辣椒賴氨酸桿菌對pbat的降解起到了促進作用，且辣椒賴氨酸桿菌在添加額外碳源蛋白胨的條件下對pbat降解15天效率達到25.071±0.971%。
2、為了實現上述目的，本專利技術采用如下技術方案：
3、辣椒賴氨酸桿菌，其基因組序列如序列表1所示，能夠以pbat為唯一碳源存
4、本專利技術的辣椒賴氨酸桿菌的分類命名為： lysinibacillus?capsici?m32-j1
5、保藏單位名稱為：廣東省微生物菌種保藏中心
6、保藏單位地址為：廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓
7、保藏日期為：2024年9月11日
8、保藏編號為：65121
9、本專利技術的另一種技術方案為辣椒賴氨酸桿菌的富集與分離方法，包括如下步驟：
10、s1、取定量沙灘土壤覆蓋于pbat薄膜的上下兩側；
11、s2、經過土壤填埋數天后取出pbat薄膜，并放入含有無機鹽培養基中繼續培養數天；
12、s3、取一定量的富集培養液加入無菌生理鹽水制備菌懸液并稀釋，稀釋后取定量的菌懸液涂布于lb固體培養基培養，再分離出pbat的降解菌；
13、s4、在分離出的pbat降解菌中篩選出可以以pbat為唯一碳源生長的細菌，即獲得辣椒賴氨酸桿菌。
14、優選的，富集與分離方法具體為：
15、從惠州采集沙灘土壤，用無菌玻璃器具裝有沙灘土壤的5-10cm沙灘土樣后平放入一片100mg的pbat薄膜，然后在薄膜上面再覆蓋5-10cm沙灘土樣，保持土壤含水率在60%；
16、土壤填埋30d后，取出填埋在土壤中的pbat薄膜，此時薄膜已被部分降解且富集微生物，將其放入含50ml無機鹽培養基的100ml錐形瓶中，在150r，30℃的環境下繼續培養7d；
17、取1ml的富集培養液加入9ml無菌生理鹽水制備菌懸液，將制備的菌懸液按一定比例稀釋，取50ul稀釋后的菌懸液涂布于lb固體培養基，每12h觀察一次，2d后對不同形態的單菌落進行劃線培養，分離出的單菌落為pbat的降解菌；
18、將分離出的pbat降解菌接種到以pbat為唯一碳源的液體培養基中進行驗證，接種量為2%，液體培養基121°c滅菌20min處理，于30°c?條件下在恒溫搖床培養箱培養，7d后進行觀察，篩選出可以以pbat為唯一碳源生長的細菌，即獲得辣椒賴氨酸桿菌，并于-80°c保存。
19、優選的，以pbat為唯一碳源的液體培養基的配方為：?nh4cl?2g/l，kh2po4?1g/l，na2hpo4?1.5g/l，mgs4o·7h2o?0.20g/l，kcl?0.2g/l,cacl2?0.1g/l，?feso4·2h2o?0?.01g/l。
20、為實現本專利技術的目的，本專利技術的另一種技術方案為：
21、上述的辣椒賴氨酸桿菌或者上述的富集與分離方法所制備的辣椒賴氨酸桿菌在降解pbat塑料的應用，pbat塑料可以作為辣椒賴氨酸桿菌的唯一碳源，也可以添加額外的碳源蛋白胨以提高對pbat降解的效率。
22、與現有技術相比本專利技術達到了如下技術效果：
23、1.本專利技術的辣椒賴氨酸桿菌對pbat具有降解能力；而且本專利技術的辣椒賴氨酸桿菌分離自沙灘土壤，其來源為被分離出降解pbat的微生物，并且其使用安全性高。利用本專利技術的辣椒賴氨酸桿菌能夠實現對pbat的生物降解。
24、2.本專利技術的辣椒賴氨酸桿菌的富集與分離方法簡單，所使用的原料來源廣泛易于獲得，并且制備效率高。
25、3.本專利技術將辣椒賴氨酸桿菌應用于pbat降解時，辣椒賴氨酸桿菌在添加額外碳源蛋白胨的條件下對pbat降解15天效率達到25.071±0.971%。
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1.辣椒賴氨酸桿菌，其特征在于，其基因組序列如序列表1所示。
2.根據權利要求1所述的辣椒賴氨酸桿菌，其特征在于，能夠以PBAT為唯一碳源存活。
3.根據權利要求1所述的辣椒賴氨酸桿菌，其特征在于，能降解PBAT塑料。
4.辣椒賴氨酸桿菌的富集與分離方法，其特征在于，包括如下步驟：
5.根據權利要求4所述的辣椒賴氨酸桿菌的富集與分離方法，其特征在于，具體為：
6.根據權利要求5所述的辣椒賴氨酸桿菌的富集與分離方法，其特征在于，以PBAT為唯一碳源的液體培養基的配方為：?NH4Cl?2g/L，KH2PO4?1g/L，Na2HPO4?1.5g/L，MgS4O·7H2O0.20g/L，KCl?0.2g/L,CaCl2?0.1g/L，?FeSO4·2H2O?0?.01g/L。
7.權利要求1-3中任意一項所述的辣椒賴氨酸桿菌或者權利要求4-5中任意一項富集與分離方法所制備的辣椒賴氨酸桿菌在降解PBAT塑料的應用。
8.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，PBAT塑料作為辣椒賴氨酸桿菌的唯一碳源。
...【技術特征摘要】
1.辣椒賴氨酸桿菌，其特征在于，其基因組序列如序列表1所示。
2.根據權利要求1所述的辣椒賴氨酸桿菌，其特征在于，能夠以pbat為唯一碳源存活。
3.根據權利要求1所述的辣椒賴氨酸桿菌，其特征在于，能降解pbat塑料。
4.辣椒賴氨酸桿菌的富集與分離方法，其特征在于，包括如下步驟：
5.根據權利要求4所述的辣椒賴氨酸桿菌的富集與分離方法，其特征在于，具體為：
6.根據權利要求5所述的辣椒賴氨酸桿菌的富集與分離方法，其特征在于，以pbat為唯一碳源的液體培養基的配方為：?nh4cl?2...
【專利技術屬性】
技術研發人員：陳姍姍，胡穎，陳永康，欒天罡，
申請(專利權)人：廣東工業大學，
類型：發明
國別省市：
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