【技術實現步驟摘要】
本申請涉及獸醫藥物，尤其是涉及一種肉雞α-干擾素、防治禽流感的藥物及其制備方法。
技術介紹
1、肉雞α-干擾素是一種具有高效和廣譜抗病毒作用的細胞因子，它能夠廣泛用于動物領域的抗病毒治療，誘導細胞表達抗病毒蛋白抑制病毒的增殖。這種肉雞α-干擾素對入侵的各種病毒均有強烈的抵抗或抑制作用，是機體防御病毒體系的一部分，具有廣譜的預防、治療病毒性疾病的作用。這種廣譜、非特異的肉雞α-干擾素不針對特定的病毒，而是對多種病毒都有抑制作用，因此被稱為“綠色”藥品，不污染環境，為動物健康提供了有效的保護。在獸醫臨床上，肉雞α-干擾素被用作一種抗病毒性較強的生物制品，用于預防和控制雞病毒性疾病的流行。
2、抗體治療是現在比較常見的禽類病毒疾病的治療手段。但是，抗體具有病毒特異性，每種病毒的血清型較多，并且變異性較強，針對性的抗體的制備具有很高的要求，所以對大范圍都適應的疫苗制作帶來了很大的困難。
3、禽流感是一種嚴重的家禽疾病，對肉雞的養殖業造成了巨大的經濟損失。目前，盡管有多種針對禽流感的治療和防控方法，但由于禽流感病毒的復雜性和易變性，利用禽流感抗體治療的效果并不理想。
4、因此，開發一種高效、安全的防治禽流感的藥物，對于肉雞養殖業的發展具有重要意義。
技術實現思路
1、為了提高肉雞α-干擾素的效率，提供一種高效安全的防治禽流感的藥物。
2、第一方面，本申請提供一種肉雞α-干擾素，采用如下的技術方案實現。
3、一種肉雞α-干擾素，所述肉
4、第二方面，本申請提供一種防治禽流感的藥物，包括具有生物活性的肉雞α-干擾素，所述肉雞α-干擾素基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
5、優選的，還包括禽流感抗體。
6、第三方面，本申請提供一種肉雞α-干擾素的制備方法，包括以下步驟：
7、從肉雞組織或細胞中提取基因組，采用以下肉雞α-干擾素基因的引物擴增目標基因片段：chi-a-p1：atggctgtgcctgcaag；
8、chi-a-p2：ctaagtgcgcgtgttgcctg；
9、對肉雞α-干擾素基因進行氨基酸優化，去掉基因的信號肽序列，根據優化后的基因序列和載體多克隆位點設計帶有酶切位點的引物如下：
10、chi-a-p1-site1：ggaattccatatggccaccaccgcctccg；
11、chi-a-p2-site2：ataagaatgcggccgcagtgcgcgtgttgcctgtga；
12、形成重組質粒，轉化到宿主細胞e.coli?bl21(de3)中，純化；肉雞α-干擾素具有如seq?id?no.1所示的核苷酸序列。
13、優選的，還包括以下步驟：
14、制備保護劑：稱取稱量葡萄糖50-80g、吐溫-80?3-5g，加入注射用水溶解至1l后，115℃滅菌15min，放涼(4℃)后備用；
15、將肉雞α-干擾素與保護劑混合，加入無菌水，充分攪勻。
16、第四方面，本申請提供一種防治禽流感的藥物的制備方法，制備如權利要求或的肉雞α-干擾素，還包括以下步驟：
17、制備禽流感抗體：
18、制備h9禽流感病毒免疫原：制備油相和水相，按礦物油佐劑與滅活病毒液3∶1(v/v)的比例配制免疫原；
19、對蛋雞進行免疫注射，使其產生特異性抗體；
20、雞蛋驗收消毒，分離蛋黃；
21、制備蛋黃抗體：
22、取蛋黃和滅菌生理鹽水，置于滅菌攪拌缸內，勻漿，過濾加入硫柳汞和青、鏈霉素，充分搖勻；
23、與所述肉雞α-干擾素混合。
24、優選的，所述肉雞α-干擾素與所述禽流感抗體的混合比例為1:2-2:1。
25、綜上所述，本申請包括以下至少一種有益技術效果。
26、1.利用肉雞α-干擾素的廣譜長效的抗病毒性提升機體的免疫力，抗體的即時抗病毒效果提升肉雞對禽流感病毒的抵抗力、增強治療效果。
27、2.通過利用肉雞α-干擾素和禽流感抗體的協同作用，提高治療效果，降低治療成本，同時減少藥物殘留，保障養殖安全、食品安全。
28、3.更有效地抑制禽流感病毒的復制和感染，減輕病毒對肉雞的危害，同時促進肉雞的康復。此外，由于肉雞α-干擾素和抗體均來源于肉雞自身，因此具有更好的生物相容性和安全性，減少了藥物殘留的風險。
29、附圖說明
30、圖1是肉雞α-干擾素基因的信號肽分析結果圖。
31、圖2是肉雞α-干擾素成熟肽片段的切膠回收檢測結果圖。
32、圖3是肉雞α-干擾素表達載體質粒提取電泳檢測圖。
33、圖4是肉雞α-干擾素包涵體的洗滌液和溶解液的western?blot的檢測結果圖。
34、圖5是肉雞α-干擾素雞胚成纖維細胞對抗h9病毒的效果圖。
35、圖6是肉雞α-干擾素+保護劑雞胚成纖維細胞的對抗h9病毒的效果圖。
本文檔來自技高網...【技術保護點】
1.一種肉雞α-干擾素，其特征在于：所述肉雞α-干擾素基因的核苷酸序列如SeqIDNO.1所示。
2.一種防治禽流感的藥物，其特征在于：包括具有生物活性的肉雞α-干擾素，所述肉雞α-干擾素基因的核苷酸序列如SeqIDNO.1所示。
3.根據權利要求2所述的一種防治禽流感的藥物，其特征在于：還包括禽流感抗體。
4.一種肉雞α-干擾素的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
5.根據權利要求4所述的一種肉雞α-干擾素的制備方法，其特征在于，還包括以下步驟：
6.一種防治禽流感的藥物的制備方法，其特征在于，制備如權利要求或的肉雞α-干擾素，還包括以下步驟：
7.根據權利要求6所述的一種防治禽流感的藥物的制備方法，其特征在于：所述肉雞α-干擾素與所述禽流感抗體的混合比例為1:2-2:1。
【技術特征摘要】
1.一種肉雞α-干擾素，其特征在于：所述肉雞α-干擾素基因的核苷酸序列如seqidno.1所示。
2.一種防治禽流感的藥物，其特征在于：包括具有生物活性的肉雞α-干擾素，所述肉雞α-干擾素基因的核苷酸序列如seqidno.1所示。
3.根據權利要求2所述的一種防治禽流感的藥物，其特征在于：還包括禽流感抗體。
4.一種肉雞α-干擾素的制備方法，...
【專利技術屬性】
技術研發人員：杜新永，劉云峰，崔翠，崔耐，王卿君，
申請(專利權)人：青島潤達生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
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