【技術實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術屬于生物醫(yī)藥，具體涉及用于防治蜂巢小甲蟲的dsrna及其應用。
技術介紹
1、蜂巢小甲蟲(aethina?tumida，small?hive?beetle，shb)，又名蜂箱小甲蟲或蜂房小甲蟲，是一種完全變態(tài)(發(fā)育歷程：卵期、幼蟲期、蛹期和成蟲期)的鞘翅目昆蟲且寄生在蜂群內(nèi)的重要害蟲，原分布于非洲南部，隨后擴散至澳洲、美洲、亞洲等各州多個國家，在世界各地均引起不同程度的蜂群危害和經(jīng)濟損失，被世界動物衛(wèi)生組織(oie)列為蜜蜂六大重要病原體之一。蜂巢小甲蟲幼蟲和成蟲均會對蜜蜂造成嚴重的危害，它們?nèi)∈郴ǚ邸⒎涿酆兔鄯溆紫x，因而會導致蜜蜂幼蟲死亡、蜂蜜發(fā)酵和巢脾損毀，常造成整個蜂巢坍塌、蜂群棄巢飛逃。
2、目前，治理蜂巢小甲蟲的主要手段是化學防治，但大面積地使用化學殺蟲劑導致抗藥性的產(chǎn)生、對蜜蜂的危害以及生態(tài)環(huán)境的破壞等，不利于蜂巢小甲蟲防治的可持續(xù)治理。因此，研發(fā)綠色分子靶標對于防治蜂巢小甲蟲是迫在眉睫的。
3、rna干擾(rnainterference，rnai)是一種由雙鏈rna(double?strand?rna，dsrna)分子引起的特異性轉(zhuǎn)錄后基因沉默的現(xiàn)象，是研究基因功能的有力工具，同時在害蟲防治方面也具有極大潛力。基于rnai技術的害蟲防治手段具有專一性，且對非靶標生物安全。蜂巢小甲蟲屬于鞘翅目昆蟲具有高效的rnai機制，將dsrna注射蜂巢小甲蟲卵、幼蟲、蛹或成蟲均可以抑制目的基因的表達。因此，篩選出影響蜂巢小甲蟲生長發(fā)育的關鍵靶標，對于加速rnai技術在保護蜜蜂、防治蜂巢小甲蟲具有
技術實現(xiàn)思路
1、本專利技術的目的在于旨在至少解決現(xiàn)有技術中存在的技術問題之一。本專利技術人以atcyp4g279基因為靶標，設計dsrna，將其注入蜂巢小甲蟲體內(nèi)，發(fā)現(xiàn)明顯抑制蜂巢小甲蟲的存活率。表明atcyp4g279基因是影響蜂巢小甲蟲的重要靶標基因。
2、本專利技術所采取的技術方案是：
3、本專利技術的第一方面，提供atcyp4g279基因抑制劑在(a1)～(a8)任一項中的應用，
4、(a1)抑制昆蟲羽化成蟲；
5、(a2)制備抑制昆蟲羽化成蟲的產(chǎn)品；
6、(a3)抑制昆蟲生長；
7、(a4)制備抑制昆蟲生長的產(chǎn)品；
8、(a5)降低昆蟲存活率；
9、(a6)制備降低昆蟲存活率的產(chǎn)品；
10、(a7)防治有害昆蟲；
11、(a8)制備防治有害昆蟲的產(chǎn)品。
12、在本專利技術的一些實施方式中，所述atcyp4g279基因抑制劑包括抑制atcyp4g279基因表達、沉默或敲除基因的物質(zhì)，和/或，抑制atcyp4g279基因編碼的蛋白含量和/或活性的物質(zhì)；
13、優(yōu)選地，所述抑制劑包括shrna、sirna、dsrna、sgrna、mirna、cdna、反義rna/dna、小分子化合物、肽、抗體中的至少一種；
14、在本專利技術的一些實施方式中，所述有害昆蟲為鞘翅目昆蟲。
15、在本專利技術的一些實施方式中，所述鞘翅目昆蟲為蜂巢小甲蟲。
16、在本專利技術的一些實施方式中，所述dsrna的核苷酸序列如seq?id?no：2所示。
17、本專利技術的第二方面，提供一種dsrna，所述dsrna的核苷酸序列如seq?id?no：2所示。
18、在本專利技術的一些實施方式中，合成所述dsrna的引物序列如seq?id?no:3和seq?idno:4所示。
19、本專利技術的第三方面，提供本專利技術第二方面所述的dsrna的相關生物材料，所述相關生物材料為下述(b1)～(b8)中的任一種：
20、(b1)編碼所述dsrna的核酸分子；
21、(b2)含有(b1)所述核酸分子的表達盒；
22、(b3)含有(b1)所述核酸分子的重組載體；
23、(b4)含有(b2)所述表達盒的重組載體；
24、(b5)含有(b1)所述核酸分子的重組微生物；
25、(b6)含有(b2)所述表達盒的重組微生物；
26、(b7)含有(b3)所述重組載體的重組微生物；
27、(b8)含有(b4)所述重組載體的重組微生物。
28、本專利技術的第四方面，提供本專利技術第二方面所述的dsrna或第三方面所述的相關生物材料在(a1)～(a8)任一項中的應用，
29、(a1)抑制昆蟲羽化成蟲；
30、(a2)制備抑制昆蟲羽化成蟲的產(chǎn)品；
31、(a3)抑制昆蟲生長；
32、(a4)制備抑制昆蟲生長的產(chǎn)品；
33、(a5)降低昆蟲存活率；
34、(a6)制備降低昆蟲存活率的產(chǎn)品；
35、(a7)防治有害昆蟲；
36、(a8)制備防治有害昆蟲的產(chǎn)品。
37、在本專利技術的一些實施方式中，所述有害昆蟲為鞘翅目昆蟲。
38、在本專利技術的一些實施方式中，所述鞘翅目昆蟲為蜂巢小甲蟲。
39、本專利技術的第五方面，提供一種產(chǎn)品，包括本專利技術第四方面所述的dsrna或第五方面所述的相關生物材料。
40、在本專利技術的一些實施方式在，所述產(chǎn)品的功能為(a1)～(a8)任一項，
41、(a1)抑制昆蟲羽化成蟲；
42、(a2)制備抑制昆蟲羽化成蟲的產(chǎn)品；
43、(a3)抑制昆蟲生長；
44、(a4)制備抑制昆蟲生長的產(chǎn)品；
45、(a5)降低昆蟲存活率；
46、(a6)制備降低昆蟲存活率的產(chǎn)品；
47、(a7)防治有害昆蟲；
48、(a8)制備防治有害昆蟲的產(chǎn)品。
49、在本專利技術的一些實施方式中，所述有害昆蟲為鞘翅目昆蟲。
50、在本專利技術的一些實施方式中，所述鞘翅目昆蟲為蜂巢小甲蟲。
51、在本專利技術的一些實施方式中，所述產(chǎn)品為噴灑式制劑或餌劑。
52、本專利技術的第六方面，提供一種防治有害昆蟲的方法，所述方法包括：所述方法包括：下調(diào)有害昆蟲體內(nèi)atcyp4g279基因的表達或活性。
53、在本專利技術的一些實施方式中，所述下調(diào)有害昆蟲體內(nèi)atcyp4g279基因的表達或活性的方法包括：在有害昆蟲的基因組中敲除或沉默atcyp4g279基因；或?qū)⑾抡{(diào)atcyp4g279基因轉(zhuǎn)錄、多肽表達或多肽活性的下調(diào)劑轉(zhuǎn)入有害昆蟲體內(nèi)。
54、在本專利技術的一些實施方式中，所述方法利用本專利技術第一方面中所述的atcyp4g279基因抑制劑轉(zhuǎn)入有害昆蟲體內(nèi)。
55、在本專利技術的一些實施方式中，所述atcyp4g279基因抑制劑包括本專利技術第二方面所述應用中的dsrna或dsrna的相關生物材料。
56、在本專利技術的一些實施方式中，所述有害昆蟲為鞘翅目昆蟲。
57、在本專利技術的一些實施方式中本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術保護點】
1.AtCYP4G279基因抑制劑在(a1)～(a8)任一項中的應用，
2.根據(jù)權利要求1所述的應用，其特征在于，所述基因抑制劑包括抑制AtCYP4G279表達、沉默或敲除基因的物質(zhì)，和/或，抑制AtCYP4G279編碼的蛋白含量和/或活性的物質(zhì)；
3.一種dsRNA，所述dsRNA的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：2所示。
4.根據(jù)權利要求3所述的dsRNA，其特征在于，合成所述dsRNA的引物序列如SEQ?ID?NO:3和SEQ?ID?NO:4所示。
5.權利要求3或4所述的dsRNA的相關生物材料，所述相關生物材料為下述(b1)～(b8)中的任一種：
6.權利要求5所述的相關生物材料在(a1)～(a8)任一項中的應用，
7.一種產(chǎn)品，包括權利要求3或4所述的dsRNA或權利要求5所述的相關生物材料。
8.根據(jù)權利要求7所述的產(chǎn)品，其特征在于，所述產(chǎn)品為噴灑式制劑或餌劑。
9.一種防治有害昆蟲的方法，所述方法包括：下調(diào)有害昆蟲體內(nèi)AtCYP4G279基因的表達或活性；優(yōu)選地，所述下
10.根據(jù)權利要求9所述的方法，其特征在于，所述方法包括將權利要求3或4所述的dsRNA或權利要求5所述的相關生物材料轉(zhuǎn)入有害昆蟲體內(nèi)。
...【技術特征摘要】
1.atcyp4g279基因抑制劑在(a1)～(a8)任一項中的應用，
2.根據(jù)權利要求1所述的應用，其特征在于，所述基因抑制劑包括抑制atcyp4g279表達、沉默或敲除基因的物質(zhì)，和/或，抑制atcyp4g279編碼的蛋白含量和/或活性的物質(zhì)；
3.一種dsrna，所述dsrna的核苷酸序列如seq?id?no：2所示。
4.根據(jù)權利要求3所述的dsrna，其特征在于，合成所述dsrna的引物序列如seq?id?no:3和seq?id?no:4所示。
5.權利要求3或4所述的dsrna的相關生物材料，所述相關生物材料為下述(b1)～(b8)中的任一種：
6.權利要求5所述的相關生物材料在(a1)～(a...
【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：武麗仙，趙紅霞，張惠霞，劉芳，梅詩瓊，陳海玉，
申請(專利權)人：廣東省科學院動物研究所，
類型：發(fā)明
國別省市：
還沒有人留言評論。發(fā)表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。