【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于生物膜領域，具體涉及富馬酸抑制副溶血性弧菌生物膜形成的應用和抑制方法。
技術介紹
1、由于海產品有許多潛在的健康益處，海產品已成為全球人類飲食中越來越重要的一部分。目前，阻礙海產品行業發展的主要障礙之一是病原體污染。副溶血性弧菌是一種廣泛存在于海洋環境中的革蘭氏陰性病原菌，可導致腸胃炎敗血癥和傷口感染，也會對海產品造成嚴重的質量損失和經濟損失。弧菌物種對不同環境條件的適應對其生存和定植至關重要。生物膜的形成是細菌在各種環境中存活和傳播的關鍵因素。副溶血性弧菌可以粘附在生物和非生物體表面形成一種由微生物細胞和胞外聚合物質組成的具有空間立體結構的復雜微生物群落，稱為生物膜。從浮游細菌到生物膜形成是一個復雜的動態過程，這些階段分別為細菌的浮游階段，黏附階段、微集落形成階段、生物膜成熟和擴散階段。首先游離的細菌粘附在生物或非生物體表面，離散細胞簇的聚集在一起形成小菌落，(它既可以通過附著細胞的克隆生長發生，也可以通過細胞在表面的活躍移位而發生)；小菌落在大小上增長，并結合形成大菌落組成薄厚不同的膜結構，胞外多糖基質保持在大菌落內，形成生物膜；最后，大菌落可以溶解，從生物膜中釋放細胞，脫落的個體又一次附著。
2、與浮游細菌比較，生物膜生存方式增強細菌對抗生素和不利環境(低ph，低溫和高鹽)的抵抗能力，延長細菌在食品工業中存活時間造成持續性污染，并且很難清除，給食品行業造成了極大的經濟損失，引發食品安全隱患，危害人體健康。
3、抗生素的使用是一種抵抗生物膜污染的常見方法，但是過度使用抗生素不僅會使細菌產
4、現有關于抑制生物膜形成、抵抗生物膜污染的報道，比如中國專利文獻cn114917239a，其公開了應用石榴多酚抑制副溶血性弧菌生物膜形成。然而該方法中使用的石榴多酚是通過作為抑菌劑發揮殺菌作用來進一步抑制生物膜形成，且石榴多酚本身來源為生物提取，成本較高。
5、因此，尋找一種安全有效、且低成本的抵抗副溶血性弧菌生物膜形成的抑制劑至關重要。
技術實現思路
1、本專利技術旨在提供富馬酸在抑制副溶血性弧菌生物膜形成中的應用。
2、富馬酸作為一種價格低廉的食品添加劑，廣泛被應用于食品行業中的調味品、飲料、果汁、果醬、面包、蛋糕、糖果、口香糖等產品中。富馬酸可以有效地抑制食物中細菌和霉菌的生長，在肉制品等易腐食品中添加富馬酸可延長其保質期，保證產品的安全性和品質；富馬酸具有較強的酸味和咸味，在魚肉制品等食品中的添加能夠提高味道鮮美度，增強食欲；此外，富馬酸可作為發酵調味劑，用于制作腌制蔬菜和奶酪等產品，增加產品的風味。目前，富馬酸對副溶血性弧菌生物膜形成的影響還沒有被報道。
3、本專利技術首次發現富馬酸顯著降低副溶血性弧菌粘附在不同的食品和食品接觸表面生物膜形成能力，減弱其在食品營養肉汁中的生物膜量，并且干擾生物膜內細菌活性，降低副溶血性弧菌生物膜相關基因的轉錄水平。
4、具體方案內容如下：
5、本專利技術提供一種富馬酸在抑制副溶血性弧菌生物膜形成中的應用。
6、本專利技術提供富馬酸在減少副溶血性弧菌生物膜分泌胞外聚合物中的應用。
7、在本專利技術的一種實施方式中，所述胞外聚合物包括胞外多糖，胞外蛋白、胞外dna。
8、本專利技術提供富馬酸在制備用于抗副溶血性弧菌生物膜形成的產品中的應用。
9、在本專利技術的一種實施方式中，富馬酸可作為一種抗菌膜制劑來控制食品工業中副溶血性弧菌生物膜污染，為食品工業中富馬酸的應用提供理論依據。
10、在本專利技術的一種實施方式中，所述產品包括：用于治療副溶血性弧菌生物膜干擾的藥物、食品用抗菌膜制劑、養殖用抗菌膜制劑。
11、在本專利技術的一種實施方式中，所述產品中還含有任何可與富馬酸協同抑制生物膜形成的物質。
12、在本專利技術的一種實施方式中，所述產品的劑型可以是流體、半流體或固體粉劑等。
13、在本專利技術的一種實施方式中，所述副溶血性弧菌菌株號為atcc17802。
14、本專利技術提供富馬酸在制備副溶血性弧菌生物膜形成抑制劑中的應用。
15、本專利技術提供富馬酸在制備作為食品接觸表面生物膜抑制劑中的應用。
16、本專利技術還提供一種抑制非人類生物或非生物表面、液面及界面形成副溶血性弧菌生物膜的方法，是利用富馬酸作為副溶血性弧菌生物膜形成抑制劑，富馬酸的使用濃度不超過250μg/ml。
17、本專利技術還提供一種抑制食品或食品加工介質表面形成副溶血性弧菌生物膜的方法，是利用富馬酸作為副溶血性弧菌生物膜形成抑制劑，富馬酸的使用濃度不超過250μg/ml。
18、本專利技術還提供一種抑制水產品養殖環境形成副溶血性弧菌生物膜的方法，是利用富馬酸作為副溶血性弧菌生物膜形成抑制劑，富馬酸的使用濃度不超過250μg/ml。
19、在本專利技術的一種實施方式中，富馬酸的使用濃度進一步為62.5-250μg/ml。具體可選62.5，125和250μg/ml。
20、在本專利技術的一種實施方式中，非人類生物可選海洋生物，包括魚類、蝦類、蟹類、貝類等。
21、在本專利技術的一種實施方式中，食品加工介質包括不銹鋼，玻璃和食品級硅膠等等。
22、在本專利技術的一種實施方式中，食品具體可選食品營養肉汁。比如蝦，牡蠣，鱸魚的肉汁。
23、作為優選，所述抑制副溶血性弧菌生物膜形成包括以下至少一項：
24、(1)抑制副溶血性弧菌的運動能力；
25、(2)降低副溶血性弧菌生物膜內細胞的新陳代謝活性；
26、(3)減少副溶血性弧菌胞外聚合物(胞外多糖，胞外蛋白和胞外dna)的分泌；
27、(4)影響副溶血性弧菌生物膜微觀結構；
28、(5)下調副溶血性弧菌生物膜相關基因的表達。
29、在本專利技術的一種實施方式中，富馬酸能減少副溶血性弧菌粘附在食品和食品加工介質(不銹鋼，玻璃和食品級硅膠)表面生物膜形成量，減弱副溶血性弧菌在食品營養肉汁(蝦，牡蠣，鱸魚)生物膜形成能力。
30、與現有技術相比，本專利技術具有以下的專利技術原理及有益效果：
31、本專利技術不使用具有抑菌活性的抑菌劑，只需加入少量的富馬酸即可實現顯著抑制副溶血性弧菌生物膜形成的效果。
32、本專利技術中，富馬酸具有顯著抑制副溶血性弧菌生物膜形成能力，且不抑制副溶血性弧菌生長。在亞抑制濃度下，富馬酸顯著減低副溶血性弧菌在實驗室肉湯(3％?nacl?lb肉湯)和食品營養肉汁(蝦汁，鱸魚汁和牡蠣汁)生物膜形成量，并且也降低了副溶血性弧菌粘附在食品(蝦殼和蟶子殼)和食品接觸表面(硅膠和不銹鋼)生物膜形成能力。富馬酸顯著降低副溶血性弧菌運動能力。并且能夠降低副溶血性弧菌在物體表面的定植能力。富馬酸明顯地降低生物膜成分(胞外多糖，胞外蛋白和胞外dna)本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.富馬酸在抑制副溶血性弧菌生物膜形成中的應用。
2.富馬酸在制備用于抗副溶血性弧菌生物膜形成的產品中的應用。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述產品包括：用于治療副溶血性弧菌生物膜干擾的藥物、食品用抗菌膜制劑、養殖用抗菌膜制劑。
4.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述產品中還含有任何可與富馬酸協同抑制生物膜形成的物質。
5.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述產品的劑型為流體、半流體或固體粉劑。
6.富馬酸在減少副溶血性弧菌生物膜分泌胞外聚合物中的應用。
7.根據權利要求1-6任一項所述的應用，其特征在于，富馬酸的使用濃度不超過250μg/mL。
8.一種抑制非人類生物或非生物表面、液面及界面形成副溶血性弧菌生物膜的方法，是利用富馬酸作為副溶血性弧菌生物膜形成抑制劑，富馬酸的使用濃度不超過250μg/mL。
9.一種抑制食品或食品加工介質表面形成副溶血性弧菌生物膜的方法，是利用富馬酸作為副溶血性弧菌生物膜形成抑制劑，富馬酸的使用濃度不超過250μg/mL。<...
【技術特征摘要】
1.富馬酸在抑制副溶血性弧菌生物膜形成中的應用。
2.富馬酸在制備用于抗副溶血性弧菌生物膜形成的產品中的應用。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述產品包括：用于治療副溶血性弧菌生物膜干擾的藥物、食品用抗菌膜制劑、養殖用抗菌膜制劑。
4.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述產品中還含有任何可與富馬酸協同抑制生物膜形成的物質。
5.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述產品的劑型為流體、半流體或固體粉劑。
6.富馬酸在減少副溶血性弧菌生物膜分泌胞外聚合物中的應用。
7.根據權利要求...
【專利技術屬性】
技術研發人員：夏效東，朱文秀，程遠航，王梓軒，張炎焜，龔嫚嫚，譚佳琦，孫歆然，
申請(專利權)人：大連工業大學，
類型：發明
國別省市：
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