【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于納米藥物，涉及一種金團簇熒光探針在輻射損傷動物造血干細胞檢測中的應用。
技術介紹
1、研究表明，暴露于超過一定劑量閾值的電離輻射會導致動物機體損傷甚至影響性命，其中，一次性全身接受100-800rad電離輻射即可引起人體骨髓型放射病，導致造血組織損傷，由此引起感染、出血等一系列的病變。由于造血功能障礙、皮膚和粘膜屏障破壞、外周血中性粒細胞數減少、吞噬細胞功能減弱和抗體生成受阻，機體抗感染能力明顯下降。而對于上述癥狀的治療原則是針對病程的各期特點，對癥綜合治療，在初期應盡早使用能改善造血損傷的抗輻射藥物，輸血、尤其是造血干細胞移植對骨髓型放射病是一項重要治療措施。因此，在遭受輻射后對于造血干細胞殘余量進行檢測是判斷放射損傷程度的手段之一，以及在造血干細胞移植后，對造血干細胞殘余量進行的增殖檢測是判斷手術是否成功手段之一，對急性放射病的治療至關重要。但目前實現精確把握造血干細胞在體內的分布和含量，仍然是一項極具挑戰性的研究任務。
2、紅外二區(nir-ii，1000-3000nm)光學成像技術相對于傳統紅外一區(nir-i，750-900nm)，nir-ii穿透深度已經達到厘米級以上，極大地降低了生物組織的吸收和散射，提高了組織穿透深度。nir-ii熒光成像技術極大地促進了疾病的早期發現、手術過程中的精確導航以及治療進展的實時監控。利用nir-ii熒光探針，醫生能夠更為精確地識別和定位處于機體深處的異常組織如微小的腫瘤，從而在病程初期進行干預，大大提高了治愈的可能性。在手術過程中，可以幫助外科醫生清晰地區分
3、因此，本領域技術人員渴望研發一種能夠對輻射損傷后的動物進行體內造血干細胞的精確檢測和治療監測的方法。
技術實現思路
1、本專利技術為解決上述技術問題，提供了金團簇熒光探針在輻射損傷動物造血干細胞檢測中的應用。
2、本專利技術的目的之一在于提供一種金團簇熒光探針在輻射損傷動物造血干細胞檢測中的應用。
3、在本專利技術的一種優選實施例中，所述造血干細胞檢測是指對輻射損傷動物體內造血干細胞殘余量進行檢測。
4、在本專利技術的一種優選實施例中，所述金團簇熒光探針的制備方法包括以下步驟：
5、s1：配置濃度范圍為10-60mm的haucl4溶液，再配置濃度范圍為20-100mm的外層配體l溶液，在室溫條件下將haucl4溶液和外層配體l溶液按照1：(1-3)的質量比加入到去離子水中混合均勻，獲得混合液；在攪拌的條件下，加入0.1-3m的堿溶液進行ph調節，隨后通入還原性氣體，持續2min，上述混合液在室溫下攪拌2-24h，再通過旋轉蒸發儀收集沉淀，使用有機溶劑清洗3-5次，進行真空干燥，獲得金團簇熒光分子粉末；
6、s2：將s1中獲得的金團簇熒光分子粉末置于去離子水中獲得金團簇熒光分子溶液，將上述溶液與偶聯活化劑按照1：(2-5)的質量比混合，室溫攪拌5-60min，超濾10-40min共2次，然后加入10-80μl抗體，在4℃條件下攪拌1-5h，超濾3次，獲得偶聯抗體的金團簇熒光探針。
7、在本專利技術的一種優選實施例中，s1中所述所述金團簇熒光分子的通式為auxmylz，x表示熒光分子所包含的au原子數，m表示熒光分子所包含的其他金屬原子，y表示其他金屬原子數，l表示熒光分子所包含的外層配體，z表示外層配體數；所述x：y：z原子個數比為(25-n)：n：18，n代表0-24中的正整數。
8、在本專利技術的一種優選實施例中，所述m為鈣、鈧、鈦、釩、鉻、錳、鐵、鈷、鎳、銅、鋅、鎵、鍺、鍶、釔、鋯、鈮、鉬、锝、釕、銠、鈀、銀、鎘、銦、錫、銻、碲、鋇、鑭、鉿、鉭、鎢、錸、鋨、銥、鉑、鉈、鉍或釙中的一種或多種。
9、在本專利技術的一種優選實施例中，所述l為谷胱甘肽、半胱氨酸、卡托普利、3-巰基丙酸、對巰基苯甲酸、6-巰基己酸、巰基乙酸或硫辛酸中的一種或多種。
10、在本專利技術的一種優選實施例中，s1中所述ph調節范圍為9-13。
11、在本專利技術的一種優選實施例中，s1中所述還原性氣體為氫氣、一氧化碳、硫化氫或一氧化硫中的一種或多種；s1中所述有機溶劑為乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、正己烷、苯、甲苯、二甲基亞砜、四氫呋喃、異丙醇、乙腈、二甲基甲酰胺或乙醚中的一種或多種。
12、在本專利技術的一種優選實施例中，s2中所述抗體為抗cd3e、抗cd43、抗cd49(integrinα6)、抗cd90(thy-1)、抗c-kit/cd117、抗ly-6a/e(sca-1)、抗cd105、抗cd36、抗cd44、抗cd73、抗nestin、抗stro-1、抗cd11b、抗cd14、抗cd19、抗cd34、抗cd79a或抗hla-dr抗體中的一中或多種。
13、在本專利技術的一種優選實施例中，s2中所述偶聯活化劑為ynamides、edc、nhs、hobt、hbtu、hatu、pybop、dcc或dic中的一種或多種。
14、本專利技術的有益效果：本專利技術提供了金團簇熒光探針在輻射損傷動物造血干細胞檢測中的應用，所述金團簇熒光分子的通式為auxmylz，所述金團簇熒光分子包含其他金屬原子m和外層配體l，通過化學交聯方法將上述金團簇熒光分子與抗體進行偶聯制備獲得偶聯抗體的金團簇熒光探針。
15、本專利技術所提供的偶聯抗體的金團簇熒光探針在450nm和670nm處依然展示出2個極為顯著的光學特征吸收峰，偶聯收率高達94.1％；所述金團簇熒光探針具有優異的近紅外二區發光性能，可以特異性結合于造血干細胞并在特定光源激發下發射紅外二區熒光，該熒光可穿透生物組織，由紅外相機接收后對造血干細胞成像。本專利技術所述提供的偶聯抗體的金團簇熒光探針表現出良好的生物相容性、較強的抗光漂白能力、良好的光穩定性、高靈敏度和高特異性，以及具有造血干細胞的靶向性特征。
16、本專利技術所提供的偶聯抗體的金團簇熒光探針通過熒光強度可對造血干細胞在體內的殘余量進行檢測，實現對造血干細胞的準確檢測及監測，實現對輻射損傷后造血干細胞殘余量的檢測和傷情評估，對推進造血干細胞相關疾病成像領域的研究和臨床轉化具有重要意義。
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1.一種金團簇熒光探針在輻射損傷動物造血干細胞檢測中的應用。
2.根據權利要求1所述的引用，其特征在于，所述造血干細胞檢測是指對輻射損傷動物體內的造血干細胞殘余量進行檢測。
3.根據權利要求1所述的引用，其特征在于，所述金團簇熒光探針的制備方法包括以下步驟：
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，S1中所述所述金團簇熒光分子的通式為AuxMyLz，x表示熒光分子所包含的Au原子數，M表示熒光分子所包含的其他金屬原子，y表示其他金屬原子數，L表示熒光分子所包含的外層配體，z表示外層配體數；所述x：y：z原子個數比為(25-n)：n：18，n代表0-24中的正整數。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述M為鈣、鈧、鈦、釩、鉻、錳、鐵、鈷、鎳、銅、鋅、鎵、鍺、鍶、釔、鋯、鈮、鉬、锝、釕、銠、鈀、銀、鎘、銦、錫、銻、碲、鋇、鑭、鉿、鉭、鎢、錸、鋨、銥、鉑、鉈、鉍或釙中的一種或多種。
6.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述L為谷胱甘肽、半胱氨酸、卡托普利、3-巰基丙酸、對巰基苯甲酸、6-巰基己酸、巰基乙酸或硫
7.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，S1中所述pH調節范圍為9-13。
8.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，S1中所述還原性氣體為氫氣、一氧化碳、硫化氫或一氧化硫中的一種或多種，S1中所述有機溶劑為乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、正己烷、苯、甲苯、二甲基亞砜、四氫呋喃、異丙醇、乙腈、二甲基甲酰胺或乙醚中的一種或多種。
9.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，S2中所述抗體為抗CD3e、抗CD43、抗CD49(integrinα6)、抗CD90(Thy-1)、抗c-Kit/CD117、抗Ly-6A/E(Sca-1)、抗CD105、抗CD36、抗CD44、抗CD73、抗Nestin、抗STRO-1、抗CD11b、抗CD14、抗CD19、抗CD34、抗CD79a或抗HLA-DR抗體中的一中或多種。
10.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，S2中所述偶聯活化劑為Ynamides、EDC、NHS、HOBt、HBTU、HATU、PyBOP、DCC或DIC中的一種或多種。
...【技術特征摘要】
1.一種金團簇熒光探針在輻射損傷動物造血干細胞檢測中的應用。
2.根據權利要求1所述的引用，其特征在于，所述造血干細胞檢測是指對輻射損傷動物體內的造血干細胞殘余量進行檢測。
3.根據權利要求1所述的引用，其特征在于，所述金團簇熒光探針的制備方法包括以下步驟：
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，s1中所述所述金團簇熒光分子的通式為auxmylz，x表示熒光分子所包含的au原子數，m表示熒光分子所包含的其他金屬原子，y表示其他金屬原子數，l表示熒光分子所包含的外層配體，z表示外層配體數；所述x：y：z原子個數比為(25-n)：n：18，n代表0-24中的正整數。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述m為鈣、鈧、鈦、釩、鉻、錳、鐵、鈷、鎳、銅、鋅、鎵、鍺、鍶、釔、鋯、鈮、鉬、锝、釕、銠、鈀、銀、鎘、銦、錫、銻、碲、鋇、鑭、鉿、鉭、鎢、錸、鋨、銥、鉑、鉈、鉍或釙中的一種或多種。
6.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述l為谷胱甘肽、半胱氨酸、卡托普利、3-巰基丙酸、對巰基苯甲酸、6-巰基己酸、...
【專利技術屬性】
技術研發人員：王琪，王治東，李亞瓊，戚振華，沈麗萍，
申請(專利權)人：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，
類型：發明
國別省市：
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