【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及畜牧業檢測，具體是一種檢測肉牛營養代謝產物水平的試劑盒及其應用。
技術介紹
1、肉牛繁殖母牛的養殖目的是生產優質犢牛，為肉牛產業的健康可持續發展提供優質種源與牛源基礎。近幾年，我國肉牛場不斷投入生產，出現了許多單體萬頭級別的超大肉牛場，甚至出現了在國內能夠見到的萬頭級別或是準萬頭級別的肉牛母牛場。當前，對于肉用母牛的營養狀況與其生產效率的相關性，以及高品質健康牛肉生產的重要性，日益得到肉牛產業健康發展的高度關注。尤其是對于基層養殖戶而言，新生犢牛的產量與質量與產業經濟效益息息相關。
2、通過影響母牛高效生產性能的研究現狀分析，母牛營養狀態一直是被忽略的問題。母牛的生產性能往往是通過采用繁殖生物技術等手段來提高母牛繁殖率和受胎率以及調控犢牛出生時間，以此提升犢牛季節性存活率并減輕養殖戶的勞動強度。然而，隨著母牛養殖規模與數量不斷增加，母牛的健康狀態與生產性能并非處于良性循環狀態，其不同生理時期營養不足或過剩問題帶來的代謝性疾病與體況問題日顯突出，從而導致犢牛出生間隔時間延長，養殖戶經濟損失不斷增加。另一方面，盡管對母牛適時進行了人工授精，但由于母牛營養狀況的差異，引起胚胎流產、畸形牛犢出生以及維持滿足犢牛最大生長速度的泌乳量的不足等問題時常發生。因此，需要一個能夠評估母牛營養狀況的評估依據與方法。
3、綜上，為了解決這些直接關系到肉牛養殖業健康發展及農戶直接收益的關鍵問題，需要開發一個能夠監測與評估肉牛產業中繁殖母牛營養水平的更高效、更準確、更快捷的診斷技術。
4、然而，目前在牛肉
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種檢測肉牛營養代謝產物水平的試劑盒，以解決上述
技術介紹
中提出的問題。
2、為實現上述目的，本專利技術實施例提供如下技術方案：
3、一種檢測肉牛營養代謝產物水平的試劑盒，其包括用于檢測肉牛血液中的尿素氮的脲酶-靛酚法試劑盒或貝克曼庫爾特法試劑盒，以及用于檢測肉牛血液中的能量因子的非酯化脂肪酸檢測試劑盒；
4、所述脲酶-靛酚法試劑盒包括磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉單水合物、乙二胺四乙酸、硝普鈉、脲酶、苯酚、次氯酸鈉和氫氧化鈉；
5、所述貝克曼庫爾特法試劑盒包括脲酶、2-酮戊二酸、nadh和谷氨酸脫氫酶；
6、所述非酯化脂肪酸檢測試劑盒包括酰基輔酶a合成酶、輔酶a、三磷酸腺苷、4-氨基安替比林、抗壞血酸氧化酶、疊氮化鈉、緩沖液、酰基輔酶a氧化酶、過氧化物酶和3-甲基-n-(β-羥乙基)苯胺。
7、優選地，所述脲酶為刀豆來源的脲酶。
8、本專利技術的另一目的在于提供一種上述的檢測肉牛營養代謝產物水平的試劑盒在基于非診斷為目的檢測肉牛營養代謝產物水平中的應用。
9、優選地，利用脲酶-靛酚法試劑盒檢測肉牛血液中的尿素氮的方法包括以下步驟：
10、往檢測肉牛血液中加入蒸餾水、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉單水合物、乙二胺四乙酸、硝普鈉、脲酶進行反應，得到含有氨和二氧化碳的產物；
11、往含有氨和二氧化碳的產物中加入苯酚、次氯酸鈉和氫氧化鈉，得到含有藍色靛酚的產物，通過該產物檢測肉牛血液中的尿素氮濃度。
12、優選地，磷酸二氫鉀的終濃度為12-16mmol/l；磷酸氫二鈉單水合物的終濃度為40-45mmol/l；乙二胺四乙酸的終濃度為34-36mmol/l；硝普鈉的終濃度為1.5-2mmol/l；脲酶的終濃度為0.5-1.5g/l；苯酚的終濃度為100-140mmol/l；次氯酸鈉的終濃度為25-30mmol/l；氫氧化鈉的終濃度為120-160mmol/l。
13、優選地，利用貝克曼庫爾特法試劑盒檢測肉牛血液中的尿素氮的方法包括以下步驟：
14、往檢測肉牛血液中加入蒸餾水和脲酶進行反應后，再加入2-酮戊二酸、nadh和谷氨酸脫氫酶進行反應，得到含有藍色l-谷氨酸的產物，通過該產物檢測肉牛血液中的尿素氮濃度。
15、優選地，利用非酯化脂肪酸檢測試劑盒檢測肉牛血液中的能量因子的方法包括以下步驟：
16、以非酯化脂肪酸作為能量因子的標志物，往檢測肉牛血液中加入酰基輔酶a合成酶、輔酶a、三磷酸腺苷進行反應，得到含有酰基輔酶a的產物；
17、往含有酰基輔酶a的產物中加入酰基輔酶a氧化酶、抗壞血酸氧化酶、疊氮化鈉、緩沖液進行氧化反應，得到含有2,3-反式烯酰輔酶a、過氧化氫和氫過氧化物的產物；
18、往含有2,3-反式烯酰輔酶a、過氧化氫和氫過氧化物的產物中加入4-氨基安替比林、過氧化物酶和3-甲基-n-(β-羥乙基)苯胺進行反應，得到最終產物，通過該產物檢測肉牛血液中的能量因子。
19、優選地，酰基輔酶a合成酶的終濃度為0.5-0.6u/ml；輔酶a的終濃度為0.2-0.4mmol/l；三磷酸腺苷的終濃度為4-5mmol/l；4-氨基安替比林的終濃度為1-2mmol/l；抗壞血酸氧化酶的終濃度為2-3u/ml；酰基輔酶a氧化酶的終濃度為10-15u/ml；3-甲基-n-(β-羥乙基)苯胺的終濃度為2-3mmol/l。
20、本專利技術的另一目的在于提供一種上述的檢測肉牛營養代謝產物水平的試劑盒在調控肉牛飼料營養中的應用。
21、本專利技術提供的一種檢測肉牛營養代謝產物水平的試劑盒，能夠快速檢測肉牛血液尿素氮與血液能量因子等肉牛代謝物質，通過有效檢測與肉牛健康營養水平相關的血液中存在的標志性代謝物質尿素氮和能量因子，可以評估肉牛營養狀況，可以為肉牛不同時期的飼養管理與體況評分等進行飼料原料與配方調節，故能廣泛應用于畜牧業和肉牛產業。
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1.一種檢測肉牛營養代謝產物水平的試劑盒，其特征在于，包括用于檢測肉牛血液中的尿素氮的脲酶-靛酚法試劑盒或貝克曼庫爾特法試劑盒，以及用于檢測肉牛血液中的能量因子的非酯化脂肪酸檢測試劑盒；
2.根據權利要求1所述的檢測肉牛營養代謝產物水平的試劑盒，其特征在于，所述脲酶為刀豆來源的脲酶。
3.一種如權利要求1或2所述的檢測肉牛營養代謝產物水平的試劑盒在基于非診斷為目的檢測肉牛營養代謝產物水平中的應用。
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，利用脲酶-靛酚法試劑盒檢測肉牛血液中的尿素氮的方法包括以下步驟：
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，磷酸二氫鉀的終濃度為12-16mmol/L；磷酸氫二鈉單水合物的終濃度為40-45mmol/L；乙二胺四乙酸的終濃度為34-36mmol/L；硝普鈉的終濃度為1.5-2mmol/L；脲酶的終濃度為0.5-1.5g/L；苯酚的終濃度為100-140mmol/L；次氯酸鈉的終濃度為25-30mmol/L；氫氧化鈉的終濃度為120-160mmol/L。
6.根據權利要求3所述的應用，其
7.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，利用非酯化脂肪酸檢測試劑盒檢測肉牛血液中的能量因子的方法包括以下步驟：
8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，酰基輔酶A合成酶的終濃度為0.5-0.6U/mL；輔酶A的終濃度為0.2-0.4mmol/L；三磷酸腺苷的終濃度為4-5mmol/L；4-氨基安替比林的終濃度為1-2mmol/L；抗壞血酸氧化酶的終濃度為2-3U/mL；酰基輔酶A氧化酶的終濃度為10-15U/mL；3-甲基-N-(β-羥乙基)苯胺的終濃度為2-3mmol/L。
9.一種如權利要求1或2所述的檢測肉牛營養代謝產物水平的試劑盒在調控肉牛飼料營養中的應用。
...【技術特征摘要】
1.一種檢測肉牛營養代謝產物水平的試劑盒，其特征在于，包括用于檢測肉牛血液中的尿素氮的脲酶-靛酚法試劑盒或貝克曼庫爾特法試劑盒，以及用于檢測肉牛血液中的能量因子的非酯化脂肪酸檢測試劑盒；
2.根據權利要求1所述的檢測肉牛營養代謝產物水平的試劑盒，其特征在于，所述脲酶為刀豆來源的脲酶。
3.一種如權利要求1或2所述的檢測肉牛營養代謝產物水平的試劑盒在基于非診斷為目的檢測肉牛營養代謝產物水平中的應用。
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，利用脲酶-靛酚法試劑盒檢測肉牛血液中的尿素氮的方法包括以下步驟：
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，磷酸二氫鉀的終濃度為12-16mmol/l；磷酸氫二鈉單水合物的終濃度為40-45mmol/l；乙二胺四乙酸的終濃度為34-36mmol/l；硝普鈉的終濃度為1.5-2mmol/l；脲酶的終濃度為0.5-1.5g/l；苯酚的終濃度為100-1...
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