【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及生物，具體地，涉及一種研究耳念珠菌系統性感染的果蠅模型的構建方法及其應用。
技術介紹
1、耳念珠菌是一種機會性真菌病原體，由于其對抗真菌藥物具有廣泛的先天和獲得性耐藥，同時在世界范圍內廣泛傳播，已被全球公認為是一種嚴重的健康威脅。在醫院環境中，耳念珠菌能同時定植于生物表面和非生物表面，這增加了免疫缺陷人群感染的風險，并且往往容易發展為嚴重的系統性感染。果蠅作為科學研究中應用最廣泛的模式生物之一，已普遍用于研究宿主-病原體相互作用，這歸因于果蠅和哺乳動物在進化中的保守性。因此，果蠅可用于研究耳念珠菌的致病機制。
2、目前現有的耳念珠菌果蠅模型使用toll免疫缺陷型果蠅[1]，其不具備完整免疫系統，因而無法明確了解宿主免疫系統是如何應對病原真菌入侵。已有研究表明適應性免疫反應對宿主防御耳念珠菌感染的作用有限[2,3]。同時，在小鼠的系統性感染動物模型中，耳念珠菌能夠在小鼠宿主體內持續存在，不能有效被宿主先天免疫系統識別和清除[4]。因此，沒有獲得性免疫，只依賴先天免疫反應防御病原體的野生型果蠅是研究耳念珠菌感染的合適模型。
技術實現思路
1、本專利技術開發了一種果蠅動物模型用于研究耳念珠菌系統性感染，同時評估了其可行性與可重復性，以期為研究耳念珠菌潛在的致病機制提供一個簡單且具有成本效益的替代模型。
2、本專利技術的第一方面，提供了一種用于研究耳念珠菌系統性感染的果蠅模型的構建方法，所述方法包括以下步驟：
3、(1)提供待感染的果蠅，所
4、(2)對所述待感染的果蠅感染耳念珠菌，感染量為每只果蠅100-10000個耳念珠菌。
5、在另一優選例中，所述果蠅模型用于：
6、(a)研究耳念珠菌的致病機制；和/或
7、(b)研究耳念珠菌在宿主內的免疫逃逸機制。
8、在另一優選例中，所述待感染的果蠅為果蠅成蟲。
9、在另一優選例中，所述待感染的果蠅在25℃環境中飼養。
10、在另一優選例中，在步驟(2)中，采用顯微注射的方式將耳念珠菌注射進待感染的果蠅體內，注射劑量為每只果蠅100-10000個耳念珠菌。
11、在另一優選例中，在步驟(2)中，所述注射劑量為每只果蠅10000個耳念珠菌。
12、在另一優選例中，在步驟(2)中，所述注射劑量為每只果蠅5000個耳念珠菌。
13、在另一優選例中，在步驟(2)中，所述注射劑量為每只果蠅1000個耳念珠菌。
14、在另一優選例中，在步驟(2)中，所述注射劑量為每只果蠅100個耳念珠菌。
15、在另一優選例中，在步驟(2)中，每只果蠅僅進行一次注射感染耳念珠菌。
16、在另一優選例中，所述構建方法還包括步驟(3)：將注射感染耳念珠菌的果蠅在29℃環境中飼養。
17、在另一優選例中，所述構建方法中，所用果蠅都在12h光照/12h黑暗的循環條件下飼養，以保證果蠅正常的生物節律。
18、本專利技術的第二方面，提供了一種野生型果蠅orer的用途，用于構建研究耳念珠菌系統性感染的動物模型。
19、在另一優選例中，所述耳念珠菌感染的研究包括：
20、(a)研究耳念珠菌的致病機制；和/或
21、(b)研究耳念珠菌在宿主內的免疫逃逸機制。
22、本專利技術的第三方面，提供了一種研究耳念珠菌系統性感染的方法，所述方法包括：使用通過如本專利技術第一方面所述的構建方法所獲得的果蠅模型進行研究。
23、在另一優選例中，所述耳念珠菌感染的研究包括：
24、(a)研究耳念珠菌的致病機制；和/或
25、(b)研究耳念珠菌在宿主內的免疫逃逸機制。
26、在另一優選例中，所述方法具體包括以下步驟：
27、(i)提供待感染的果蠅，所述果蠅為野生型果蠅orer；
28、(ii)對所述待感染的果蠅進行注射感染耳念珠菌，注射劑量為每只果蠅100-10000個耳念珠菌；
29、(iii)將注射感染耳念珠菌的果蠅在29℃環境中飼養，在感染后6小時-24小時通過檢測果蠅轉錄組研究耳念珠菌對宿主的影響，例如，在感染后6小時和/或24小時通過檢測果蠅轉錄組研究耳念珠菌對宿主的影響。
30、在本專利技術的第四方面，提供了一種用于研究耳念珠菌系統性感染的果蠅模型，所述果蠅模型使用如本專利技術第一方面所述的構建方法構建獲得。
31、在另一優選例中，所述果蠅模型用于研究耳念珠菌的致病機制。
32、在另一優選例中，所述果蠅模型用于研究耳念珠菌在宿主內的免疫逃逸機制。
33、應理解，在本專利技術范圍內，本專利技術的上述各技術特征和在下文(如實施例)中具體描述的各技術特征之間都可以互相組合，從而構成新的或優選的技術方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
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1.一種用于研究耳念珠菌系統性感染的果蠅模型的構建方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述果蠅模型用于：
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟(2)中，對所述待感染的果蠅通過顯微注射的方式感染耳念珠菌，注射劑量為每只果蠅100-10000個耳念珠菌。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，在步驟(2)中，所述注射劑量為每只果蠅10000個耳念珠菌。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述構建方法還包括步驟(3)：將注射感染耳念珠菌的果蠅在29℃環境中飼養。
6.一種野生型果蠅oreR的用途，其特征在于，用于構建研究耳念珠菌感染的動物模型。
7.如權利要求6所述的用途，其特征在于，所述耳念珠菌感染的研究包括：
8.一種研究耳念珠菌系統性感染的方法，所述方法包括：使用通過如權利要求1所述的構建方法所獲得的果蠅模型進行研究。
9.如權利要求8所述的方法，其特征在于，所述耳念珠菌感染的研究包括：
10.如權利要求8所述
...【技術特征摘要】
1.一種用于研究耳念珠菌系統性感染的果蠅模型的構建方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述果蠅模型用于：
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟(2)中，對所述待感染的果蠅通過顯微注射的方式感染耳念珠菌，注射劑量為每只果蠅100-10000個耳念珠菌。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，在步驟(2)中，所述注射劑量為每只果蠅10000個耳念珠菌。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述構建方法還包括步驟...
【專利技術屬性】
技術研發人員：潘磊，李杰，趙婭婭，曾祥康，
申請(專利權)人：中國科學院上海巴斯德研究所，
類型：發明
國別省市：
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