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    腺病毒載體與p53基因的基因重組體的應用制造技術

    技術編號:44044024 閱讀:4 留言:0更新日期:2025-01-15 01:22
    本發明專利技術涉及基因工程技術領域,具體公開了腺病毒載體與p53基因的基因重組體的應用,利用腺病毒載體與人p35基因來構建重組體在制備治療增生性疾病的藥物中的應用;本發明專利技術采用AdMax包裝系統構架包裝重組腺病毒,通過細胞內同源重組得到E1/E2缺失的復制缺陷型腺病毒,能得到比較高滴度的重組病毒顆粒,并且能在增生性疾病的細胞中具有較高表達,使受治療者自身變成一個可生產人類腫瘤抑制因子p53蛋白的“源泉”,這種方法實現將外源p53基因的體內轉移并在病人增生組織內高效表達而達到治療目的,使得增生性疾病的基因治療成為現實。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術屬于基因工程,具體涉及腺病毒載體與p53基因的基因重組體的應用


    技術介紹

    1、增生性疾病是以細胞增生和/或代謝產物異常表達為特征的一種基因病,是廣泛發生于人體各組織器官(如皮膚、骨髓、乳腺等)并產生不同程度功能障礙的一種良性增生。瘢痕是人類創傷修復過程中必然的產物和最終結果,任何創傷的愈合都會有不同程度的瘢痕形成。它們臨床表現為過度生長,超過原傷口界限,侵犯臨近組織,自始至終不退化且單純手術切除后易復發等特點。有眾多的實驗證實,瘢痕疙瘩存在p53基因的突變,目前仍然缺乏治療瘢痕疙瘩的明確且有效的方案,它是整形外科面臨的一個最重要的難題之一。

    2、腺病毒包裝細胞hek293作為可用于基因治療的各種載體,本身不具有任何治療疾病的意義、無臨床應用價值。只有將具有潛在治療作用的基因與可轉移基因的載體結合,通過后者介導,將目的基因導入靶細胞并表達,才能達到真正的臨床治療效果。因此,構建治療基因與基因載體的融合序列是實現基因治療的關鍵。

    3、將目的基因的表達與載體進行融合常用的方法是在真核細胞中進行同源重組,過程復雜,費時費力。而使用在原核細胞(大腸桿菌)中實現同源重組、構建融合表達載體的新技術則可有效解決上述問題。研究表明,腺病毒載體e1或e3缺失區攜帶外源性基因時,可以實現目的基因的較長時間的表達,且可降低其免疫原性;逆轉錄病毒載體能攜帶外源性基因整合進靶細胞基因組中實現目的基因穩定持久的表達,但逆轉錄病毒體外繁殖滴度低、轉染效率低,只感染分裂期細胞。

    4、因此,有必要提出腺病毒載體與p53基因的基因重組體的應用,以至少部分地解決現有技術中存在的問題。

    5、本
    技術介紹
    所公開的上述信息僅僅用于增加對本專利技術
    技術介紹
    的理解,因此,其可能包括不構成本領域普通技術人員已知的現有技術。


    技術實現思路

    1、本專利技術的目的在于提供腺病毒載體與p53基因的基因重組體的應用,以解決上述
    技術介紹
    中提出的問題。

    2、為實現上述目的,本專利技術提供如下技術方案:

    3、腺病毒載體與p53基因的基因重組體的應用,利用腺病毒載體與人p35基因來構建重組體在制備治療增生性疾病的藥物中的應用。

    4、優選的,所述其融合序列為:

    5、腺病毒基因組序列右側-atgtttaccgccacactcgcagggtctgcacctggtgcgggtctcatcgtacctcagcaccttccagatc,tctgacatgcgatgtcgactcgactgcttcgcgatgtacgggccagatatacgcgtatctgaggggactagggtgtgtttaggcgaaaagcggggcttcggttgtacgcggttaggagtcccctcaggatatagtagtttcgcttttgcatagggagggggaaatgtagtcttatgcaatactcttgtagtcttgcaacatggtaacgatgagttagcaacatgccttacaaggagagaaaaagcaccgtgcatgccgattggtggaagtaaggtggtacgatcgtgccttattaggaaggcaacagacgggtctgacatggattggacgaaccactgaattccgcattgcagagatattgtatttaagtgcctagctcgatacaataaacgccatttgaccattcaccacattggtgtgcacctccaagcttggtaccgagctcggatcccgs23ctagagccaccctccagggagcaggtagctgctgggctccggggacactttgcgttcgggctgggagcgtctttccacgacggtgacacgcttccctggattggcagccagactgctttccgggtcactgcc6satggaggagccgcagtcagatcctagcgtcgagccccctctgagtcaggaaacattttcagacctatggaaactacttcctgaaaacaaccttctgtcccccttgccgtcccaagcaatggatgatttgatgctgtccccggacgatattgaacaatggttcactgaagacccaggtccagatgaagctcccagaatgccagaggctgctccccccgtggcccctgcaccagcagctcctacaccggcggcccctgcaccacccccctcctggcccctgtcatcttctgtcccttcccagaaaacctaccagggcagctacggtttccgtctgggcttcttgcattctgggacagccaagtctgtgacttgcacgtactcccctgccctcaacaagatgttttgccaactggccaagacctgccctgtgcagctgtgggttgattccacacccccgcccggcacccgcgtccgcgccatggccatctacaagcagtcacagcacatgacggaggttgtgaggcgctgcccccaccatgagcgctgctcagatagcgatggtctggcccctcctcagcatcttatccgagtggaaggaaatttgcgtgtggagtatttggatgacagaaacacttttcgacatagtctggtggtgccctatgagccgcctgaggttggctctgactgtaccaccatccactacaactacatgtgtaacagttcctgcatgggcggcatgaaccggaggcccatcctcaccatcatcacactggaagactccagtggtaatctactgggacggaacagctttgaggtgcgtgtttgtgcctgtcctgggagagaccggcgcacagaggaagagaatctccgcaagaaaggggagcctcaccacgagctgcccccagggagcactaagcgagcactgcccaacaacaccagctcctctccccagccaaagaagaaaccactggatggagaatatttcacccttcagatccctgggcctgagcgcttcgagatgttccgagagctgaatgaggccttggaactcaaggatgcccaggctgggaaggagccaggggggagcagggctcactccagccacctgaagtccaaaaagggtcagtctacctcccgccataaaaaactcatgttcaagacagaagggcctgactcagactgaigcattctccacttcttgttccccactgacagcctcccacccccatctctccctcccctgccattttgggttttgggtctttgaacccttgcttgcaataggtgtgcgtcagaagcacccaggacttccatttgctttgtcccggggc本文檔來自技高網...

    【技術保護點】

    1.腺病毒載體與p53基因的基因重組體的應用,其特征在于,利用腺病毒載體與人p35基因來構建重組體在制備治療增生性疾病的藥物中的應用。

    2.根據權利要求1所述的腺病毒載體與p53基因的基因重組體的應用,其特征在于:所述重組體包括以下核苷酸序列:

    3.根據權利要求1所述的腺病毒載體與p53基因的基因重組體的應用,其特征在于:所述的增生性疾病為瘢痕。

    4.根據權利要求1所述的腺病毒載體與p53基因的基因重組體的應用,其特征在于:所述的瘢痕是病理性瘢痕。

    5.根據權利要求1所述的腺病毒載體與p53基因的基因重組體的應用,其特征在于:所述的病理性瘢痕是瘢痕疙瘩。

    6.根據權利要求1所述的腺病毒載體與p53基因的基因重組體的應用,其特征在于:所述的重組體為腺病毒包裝細胞HEK293。

    【技術特征摘要】

    1.腺病毒載體與p53基因的基因重組體的應用,其特征在于,利用腺病毒載體與人p35基因來構建重組體在制備治療增生性疾病的藥物中的應用。

    2.根據權利要求1所述的腺病毒載體與p53基因的基因重組體的應用,其特征在于:所述重組體包括以下核苷酸序列:

    3.根據權利要求1所述的腺病毒載體與p53基因的基因重組體的應用,其特征在于:所述的增生性疾病為瘢痕。...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:華永祖
    申請(專利權)人:湖北和光諾康生物科技有限公司
    類型:發明
    國別省市:

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