【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于微生物，具體涉及一種具有合成果聚糖能力的非基因修飾益生菌及其構建方法和應用。
技術介紹
1、果聚糖是一種水溶性膳食纖維，能夠促進益生菌生長，具有降血脂、降血糖的功能。目前以乳酸菌為代表的益生菌不具有合成果聚糖的能力。通過基因修飾的方式可以賦予其合成果聚糖的能力，但是基因修飾屬于轉基因范疇，在應用中存在爭議。目前缺少一種利用非基因修飾的方式在不改變乳酸菌基因的前提下賦予其合成果聚糖能力的方法。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種具有合成果聚糖能力的非基因修飾益生菌及其構建方法和應用。本專利技術利用非基因修飾的方式賦予乳酸菌新的功能，避免了因為轉基因引起的爭議。
2、本專利技術提供了一種具有合成果聚糖能力的非基因修飾益生菌，所述益生菌表面結合有含乳酸乳球菌肽聚糖水解酶和果聚糖蔗糖酶的融合酶；所述益生菌包括乳酸菌。
3、優選的是，所述乳酸菌包括乳酸乳球菌、鼠李糖乳桿菌、副干酪乳桿菌或嗜酸乳桿菌。
4、優選的是，所述果聚糖蔗糖酶包括褐色芽孢桿菌果聚糖蔗糖酶。
5、優選的是，編碼所述褐色芽孢桿菌果聚糖蔗糖酶的基因的核苷酸序列如seq?idno.1所示。
6、本專利技術還提供了上述技術方案所述非基因修飾益生菌的構建方法，包括以下步驟：
7、將益生菌與含乳酸乳球菌肽聚糖水解酶和果聚糖蔗糖酶的融合酶混合，結合后得到非基因修飾益生菌。
8、優選的是，所述含乳酸乳球菌肽聚糖水解酶和果聚糖蔗糖酶
9、將重組質粒轉化到大腸桿菌中，培養，誘導，純化，得到含乳酸乳球菌肽聚糖水解酶和果聚糖蔗糖酶的融合酶。
10、優選的是，所述結合的時間為10～60min。
11、本專利技術還提供了基于上述技術方案所述非基因修飾益生菌或上述技術方案所述構建方法構建得到的非基因修飾益生菌進行果汁中糖轉化的方法，包括以下步驟：
12、將所述非基因修飾益生菌與果汁混合，進行糖轉化反應，得到果聚糖。
13、優選的是，所述果汁包括棗汁。
14、優選的是，所述糖轉化反應的溫度為25～40℃；所述糖轉化反應的時間為6～24h。
15、本專利技術提供了一種具有合成果聚糖能力的非基因修飾益生菌。本專利技術獲得的非基因修飾益生菌具有合成果聚糖的能力，并且合成的果聚糖純度較高；本專利技術所述非基因修飾益生菌能夠調節腸道健康，提高機體免疫。本專利技術利用非基因修飾的方式賦予乳酸菌新的功能，避免了因為轉基因引起的爭議。
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1.一種具有合成果聚糖能力的非基因修飾益生菌，其特征在于，所述益生菌表面結合有含乳酸乳球菌肽聚糖水解酶和果聚糖蔗糖酶的融合酶；所述益生菌包括乳酸菌。
2.根據權利要求1所述的非基因修飾益生菌，其特征在于，所述乳酸菌包括乳酸乳球菌、鼠李糖乳桿菌、副干酪乳桿菌或嗜酸乳桿菌。
3.根據權利要求1所述的非基因修飾益生菌，其特征在于，所述果聚糖蔗糖酶包括褐色芽孢桿菌果聚糖蔗糖酶。
4.根據權利要求1所述的非基因修飾益生菌，其特征在于，編碼所述褐色芽孢桿菌果聚糖蔗糖酶的基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。
5.權利要求1～4任一項所述非基因修飾益生菌的構建方法，包括以下步驟：
6.根據權利要求5所述的構建方法，其特征在于，所述含乳酸乳球菌肽聚糖水解酶和果聚糖蔗糖酶的融合酶的制備方法包括以下步驟：將果聚糖蔗糖酶基因構建到含乳酸乳球菌肽聚糖水解酶基因的質粒中，得到重組質粒；
7.根據權利要求5所述的構建方法，其特征在于，所述結合的時間為10～60min。
8.基于權利要求1～4任一項所述非基因修飾益生菌
9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述果汁包括棗汁。
10.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述糖轉化反應的溫度為25～40℃；所述糖轉化反應的時間為6～24h。
...【技術特征摘要】
1.一種具有合成果聚糖能力的非基因修飾益生菌，其特征在于，所述益生菌表面結合有含乳酸乳球菌肽聚糖水解酶和果聚糖蔗糖酶的融合酶；所述益生菌包括乳酸菌。
2.根據權利要求1所述的非基因修飾益生菌，其特征在于，所述乳酸菌包括乳酸乳球菌、鼠李糖乳桿菌、副干酪乳桿菌或嗜酸乳桿菌。
3.根據權利要求1所述的非基因修飾益生菌，其特征在于，所述果聚糖蔗糖酶包括褐色芽孢桿菌果聚糖蔗糖酶。
4.根據權利要求1所述的非基因修飾益生菌，其特征在于，編碼所述褐色芽孢桿菌果聚糖蔗糖酶的基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
5.權利要求1～4任一項所述非基因修飾益生菌的構建方法，包括以下步驟：
6.根據權利...
【專利技術屬性】
技術研發人員：桑亞新，彭凱歌，趙芳坤，高潔，張雪嬌，
申請(專利權)人：河北農業大學，
類型：發明
國別省市：
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