【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于分子生物學，具體涉及一種與番茄果實糖含量相關的分子標記及其應用。
技術介紹
1、植物的三類糖轉運蛋白包括蔗糖轉運蛋白、單糖轉運蛋白和sweet轉運蛋白。sweets是存在于植物質膜或液泡膜中的單糖和蔗糖轉運體，它可以兩個方向運輸糖，并促進糖沿濃度梯度擴散。番茄基因組包含29個sweet基因，其中slsweet7a和slsweet14編碼定位在質膜上的蛋白質，參與果糖、葡萄糖和蔗糖的跨膜運輸，與果實中的糖積累密切相關。相關研究顯示，sweet基因家族在糖合成過程中可能起著關鍵作用。枸杞中lbasweet9和lbasweet29基因表達量與果糖含量呈顯著正相關。masweet1在番茄中進行異源過表達，發現過表達轉基因番茄株系能促進果實中蔗糖和果糖含量的增加。過表達mdsweet23番茄株葉片的蔗糖、果糖、葡萄糖和淀粉含量均顯著高于野生型。雖然以上對番茄果實糖含量的研究比較多，但均未提供一種能快速鑒定出區分番茄果實糖含量的高低的方法。因此，急需提供一種可以區分番茄果實糖含量的方法，便于番茄種質資源的篩選。
技術實現思路
1、鑒于此，本專利技術提供了一種與番茄果實糖含量相關的分子標記及其應用，能夠快速的檢測番茄果實含糖量。
2、為達到上述目的，本專利技術采用以下技術方案：
3、第一方面，本專利技術提供一種番茄果實糖含量相關的分子標記，其所述分子標記的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
4、需要說明的是，當存在所述分子標記時番茄果實糖含
5、優選地，所述分子標記位于番茄4號染色體55102868處。
6、優選地，所述分子標記為16bp。
7、第二方面，本專利技術提供了一種所述的分子標記在檢測番茄果實糖含量中的應用。
8、優選地，所述引物組正向引物的核苷酸序列如seq?id?no.2所示，反向引物的核苷酸序列如seq?id?no.3所示。
9、在驗證上述分子標記準確性中，所述引物組正向引物具體為gagggttattaggtgatagattgt，反向引物具體為cactttcaatgcccaggat。
10、優選地，所述引物組包括內引物組和外引物組，其中，內引物組正向引物indel-inside-f的核苷酸序列如seq?id?no.4所示；反向引物indel-inside-r的核苷酸序列如seqid?no.5所示；外引物組正向引物indel-outside-f的核苷酸序列如seq?id?no.6所示，反向引物indel-outside-r的核苷酸序列如seq?id?no.7所示。
11、在鑒定番茄品種的應用中，所述引物組包括內引物組和外引物組，其中，內引物組正向引物indel-inside-f：atctcattaaatacagatcttagtataaa，反向引物indel-inside-r：ggtagattttatactaagatataatagactc；外引物組正向引物indel-outside-f：atttgttacgatttattgattctta，反向引物indel-outside-r：gagtggcgagtgaaacaag。
12、第三方面，本專利技術提供了一種所述的番茄果實糖含量相關的分子標記的檢測方法，包括以下步驟：
13、s1、以待測番茄的總dna為模板，利用權利要求7所述引物對進行pcr擴增并電泳鑒定；
14、s2、當電泳結果中同時出現579bp和390bp兩條條帶時番茄表現為果實糖含量低，當同時出現563bp和209bp兩條條帶時番茄表現為果實糖含量高。
15、需要說明的是，579bp的核苷酸序列具體為atttgttacgatttattgattcttatattttcattattttttttaattgagtcgaggatccatcgaatgtatctctaaagtgtgtatattcgattcgtttgtgagtccatgttgtggcattacattagataatgttgttgtaattaggtacaaaggaatagaggtggaagcttcatttgagtctattatatctcattaaatacagatcttagtataaaatctaccatatcatatcttattaataaataatgttaaattaagtattattttctctttacttaacgacgcggttacatcctgggcattgaaagtgaaaggactacttcaaataagttcaattgaataaaaataataataatactcgcaatggaagaattcactatttagaagctaatcgtttagttacacgctagtttgcagtaatacaaattttatcgtattttggtattttcagatatgttttagatatatgtatggatacatgaagttaaaattaggaataggtcatttcgaatacaatgtatctaagtggactctcatgtaatctcgctcgccagtctcttgtttcactcgccactc。390bp的核苷酸序列具體為atctcattaaatacagatcttagtataaaatctaccatatcatatcttattaataaataatgttaaattaagtattattttctctttacttaacgacgcggttacatcctgggcattgaaagtgaaaggactacttcaaataagttcaattgaataaaaataataataatactcgcaatggaagaattcactatttagaagctaatcgtttagttacacgctagtttgcagtaatacaaattttatcgtattttggtattttcagatatgttttagatatatgtatggatacatgaagttaaaattaggaataggtcatttcgaatacaatgtatctaagtggactctcatgtaatctcgctcgccagtctcttgtttcactcgccactc。
16、563bp的核苷酸序列具體為atttgttacgatttattgattcttatattttcattattttttttaattgagtcgaggatccatcgaatgtatctctaaagtgtgtatattcgattcgtttgtgagtccatgttgtggcattacattagataatgttgttgtaattaggtacaaaggaatagaggtggaagcttcatttgagtctattatatcttagtataaaatctaccatatcatatcttattaataaataatgttaaattaagtattattttctctttacttaacgacgcggttacatcctgggcattgaaagtgaaaggactacttcaaataagttcaa本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種番茄果實糖含量相關的分子標記，其特征在于，所述分子標記的核苷酸序列如SEQ?ID?No.1所示。
2.根據權利要求1所述的分子標記，其特征在于，所述分子標記位于番茄4號染色體55102868處。
3.根據權利要求1所述的分子標記，其特征在于，所述分子標記為16bp。
4.根據權利要求1-3任一項所述的分子標記在檢測番茄果實糖含量中的應用。
5.一種擴增權利要求1-3任一項所述的番茄果實糖含量相關的分子標記的引物對。
6.根據權利要求5所述的引物對，其特征在于，所述引物組正向引物的核苷酸序列如SEQ?ID?No.2所示，反向引物的核苷酸序列如SEQ?ID?No.3所示。
7.根據權利要求5所述的引物對，其特征在于，所述引物組包括內引物組和外引物組，其中，內引物組正向引物Indel-Inside-F的核苷酸序列如SEQ?ID?No.4所示；反向引物Indel-Inside-R的核苷酸序列如SEQ?ID?No.5所示；外引物組正向引物Indel-Outside-F的核苷酸序列如SEQ?ID?No.6所示，反
8.根據權利要求1-3任一項所述的番茄果實糖含量相關的分子標記的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：
9.根據權利要求8所述的檢測方法，其特征在于，所述PCR反應體系：13μL?Taq?Masterbuffer，1μL?DNA模板，1.5μL?Indel-Outside-F，0.5μL?Indel-Outside-R，0.5μL?Indel-Inside-F，1.5μL?Indel-Inside-R，H2O補齊到25μL；所述PCR擴增程序為：94℃預變性3min，94℃變性30s，50-56℃復性30s，72℃延伸1min，34個循環，最后72℃延伸5min。
10.根據權利要求9所述的檢測方法，其特征在于，所述PCR擴增程序中所述復性溫度為54.8℃。
...【技術特征摘要】
1.一種番茄果實糖含量相關的分子標記，其特征在于，所述分子標記的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
2.根據權利要求1所述的分子標記，其特征在于，所述分子標記位于番茄4號染色體55102868處。
3.根據權利要求1所述的分子標記，其特征在于，所述分子標記為16bp。
4.根據權利要求1-3任一項所述的分子標記在檢測番茄果實糖含量中的應用。
5.一種擴增權利要求1-3任一項所述的番茄果實糖含量相關的分子標記的引物對。
6.根據權利要求5所述的引物對，其特征在于，所述引物組正向引物的核苷酸序列如seq?id?no.2所示，反向引物的核苷酸序列如seq?id?no.3所示。
7.根據權利要求5所述的引物對，其特征在于，所述引物組包括內引物組和外引物組，其中，內引物組正向引物indel-inside-f的核苷酸序列如seq?id?no.4所示；反向引物indel-inside-r的核苷酸序列如seq?id...
【專利技術屬性】
技術研發人員：葉杰，鄭涵鍇，謝紫妍，葉志彪，張俊紅，張余洋，王嘉穎，
申請(專利權)人：華中農業大學，
類型：發明
國別省市：
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