【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于植物基因工程，具體涉及一種應(yīng)用ofnac72基因增加桂花花瓣天然香氣物質(zhì)芳樟醇及其氧化物和紫羅酮的方法。
技術(shù)介紹
1、萜烯類化合物是重要的香氣活性物質(zhì)，萜類物質(zhì)芳樟醇及其氧化物、β-紫羅酮、二氫-β-紫羅酮等是桂花關(guān)鍵的香氣活性物質(zhì)。芳樟醇(linalool)是從植物中提取到的一種鏈狀萜烯醇類化合物，常溫下為無(wú)色的易流動(dòng)液體，具有鈴蘭香氣、木青香氣和果香。它是芳樟葉油、芳樟油、伽羅木油、玫瑰木油、芫荽子油、白蘭葉油、薰衣草油、玳玳葉油、香檸檬油、香紫蘇油等精油的主要成分之一，也是綠茶香氣的主要成分之一。芳樟醇常用于合成香精、香料，同時(shí)芳樟醇入藥可用于鎮(zhèn)靜、抗菌和殺蟲(chóng)，除此之外可作為除臭劑，具有很強(qiáng)的掩蓋不良?xì)馕兜哪芰Α７颊链季哂卸喾N氧化物，芳樟醇及其氧化物是各品種中含量豐富且賦予花香特色的關(guān)鍵物質(zhì)，β-紫羅酮作為桂花中最為主要的呈香物質(zhì)，對(duì)香味貢獻(xiàn)也較大，并且還具有一系列藥理作用，例如抗癌、化學(xué)預(yù)防、抗炎和抗菌等。
2、桂花(osmanthus?fragrans?lour.)是重要的香花植物，經(jīng)濟(jì)和保健價(jià)值極高。香味是衡量其觀賞和經(jīng)濟(jì)價(jià)值的重要指標(biāo)，桂花中單萜類芳樟醇及其衍生物含量豐富，在各品種中分布廣泛，是桂花中關(guān)鍵香氣活性物質(zhì)。nac轉(zhuǎn)錄因子家族是植物特有的一類轉(zhuǎn)錄因子家族，其家族龐大，成員數(shù)超過(guò)100個(gè)，它由兩個(gè)結(jié)構(gòu)域組成：一個(gè)高度保守的n端nac結(jié)合結(jié)構(gòu)域，其參與順式作用元件的特異性結(jié)合；另一個(gè)是可變的c端結(jié)構(gòu)域，負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄激活的調(diào)節(jié)。nac轉(zhuǎn)錄因子主要參與植物生長(zhǎng)發(fā)育、抗衰、抗逆等生物學(xué)過(guò)程。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的上述問(wèn)題，本專利技術(shù)提供一種與桂花芳樟醇及其氧化物和紫羅酮合成相關(guān)的ofnac72基因，過(guò)表達(dá)所述基因可促進(jìn)桂花芳樟醇及反式芳樟醇氧化物和各類紫羅酮的合成，可用于桂花基因工程中提高桂花香氣品質(zhì)及優(yōu)良品種選育等工作。
2、為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本專利技術(shù)所采用的技術(shù)方案如下：
3、與桂花芳樟醇及其氧化物和紫羅酮合成相關(guān)的ofnac72基因，所述ofnac72基因的cds序列如seq?id?no.1所示，其編碼蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.2所示。
4、含有ofnac72基因的生物材料，包括表達(dá)盒、表達(dá)載體、重組菌。
5、ofnac72基因的應(yīng)用，包括：
6、(1)在桂花育種中的應(yīng)用；
7、(2)在促進(jìn)桂花關(guān)鍵香氣物質(zhì)芳樟醇及反式芳樟醇氧化物和紫羅酮(包括α-紫羅酮、β-紫羅酮、二氫-β-紫羅蘭酮)合成中的應(yīng)用。
8、一種促進(jìn)桂花芳樟醇及反式芳樟醇氧化物和紫羅酮合成的方法，包括以下步驟：
9、(1)構(gòu)建含有如seq?id?no.1所示的ofnac72基因的超表達(dá)載體；
10、(2)將所述的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌，得到重組表達(dá)農(nóng)桿菌；
11、(3)用所述的重組農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化桂花，在桂花中超表達(dá)ofnac72基因；
12、優(yōu)選地，所述步驟(3)中用重組菌轉(zhuǎn)化桂花花瓣；
13、優(yōu)選地，所述的農(nóng)桿菌為農(nóng)桿菌gv3101。
14、相比于現(xiàn)有技術(shù)，本專利技術(shù)的有益效果為：
15、本專利技術(shù)提供的一種促進(jìn)桂花芳樟醇及其氧化物和紫羅酮合成相關(guān)ofnac72基因，是一種nac轉(zhuǎn)錄因子基因，將含有基因ofnac72的超表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到桂花花瓣進(jìn)行瞬時(shí)表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，瞬時(shí)轉(zhuǎn)化的桂花花瓣中ofnac72基因表達(dá)量顯著增加，花瓣中芳樟醇及反式芳樟醇氧化物和各類紫羅酮(α-紫羅酮、β-紫羅酮、二氫-β-紫羅蘭酮)含量相較于對(duì)照組顯著上升，表明ofnac72基因在促進(jìn)桂花芳樟醇及其氧化物和各類紫羅酮合成方面發(fā)揮了重要作用，可用于桂花基因工程中提高觀賞性狀及遺傳品質(zhì)等繁育工作。
本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.與桂花芳樟醇及其氧化物和紫羅酮合成相關(guān)的OfNAC72基因，其特征在于，所述OfNAC72基因的CDS序列如?SEQ?ID?NO.1所示。
2.權(quán)利要求1所述OfNAC72基因的編碼蛋白，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如SEQID?NO.2所示。
3.含有權(quán)利要求1所述OfNAC72基因的生物材料，其特征在于，所述生物材料包括表達(dá)盒、表達(dá)載體、重組菌。
4.權(quán)利要求1所述的OfNAC72基因或權(quán)利要求2所述的編碼蛋白或權(quán)利要求3所述的生物材料在促進(jìn)桂花芳樟醇及反式芳樟醇氧化物和紫羅酮合成中的應(yīng)用。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述紫羅酮包括α-紫羅酮、β-紫羅酮、二氫-β-紫羅蘭酮。
6.權(quán)利要求1所述的OfNAC72基因或權(quán)利要求2所述的編碼蛋白或權(quán)利要求3所述的生物材料在桂花育種中的應(yīng)用。
7.一種促進(jìn)桂花芳樟醇及反式芳樟醇氧化物和紫羅酮合成的方法，其特征在于，在桂花中超表達(dá)權(quán)利要求1所述的OfNAC72基因。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，包括以下步驟：>
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述步驟（3）中用重組菌轉(zhuǎn)化桂花花瓣。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述的農(nóng)桿菌為農(nóng)桿菌GV3101。
...【技術(shù)特征摘要】
1.與桂花芳樟醇及其氧化物和紫羅酮合成相關(guān)的ofnac72基因，其特征在于，所述ofnac72基因的cds序列如?seq?id?no.1所示。
2.權(quán)利要求1所述ofnac72基因的編碼蛋白，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如seqid?no.2所示。
3.含有權(quán)利要求1所述ofnac72基因的生物材料，其特征在于，所述生物材料包括表達(dá)盒、表達(dá)載體、重組菌。
4.權(quán)利要求1所述的ofnac72基因或權(quán)利要求2所述的編碼蛋白或權(quán)利要求3所述的生物材料在促進(jìn)桂花芳樟醇及反式芳樟醇氧化物和紫羅酮合成中的應(yīng)用。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：鄭日如，嚴(yán)怡然，巨歡，張婷鈺，楊沁連，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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