【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及酶學(xué)領(lǐng)域，特別涉及用于合成十八碳烯類化合物的蛋白及合成十八碳烯類化合物的方法。
技術(shù)介紹
1、性信息素作為交配行為過程中重要的化學(xué)信號物質(zhì)，主要是由雌蛾合成和釋放的。性信息素既可以遠距離吸引雄蛾，又可以近距離調(diào)控雄蛾的求偶行為。近年來，信息素作為防治害蟲的新力量掘地而起，尤其是性信息素，已應(yīng)用于多種蛾類害蟲的防治。
2、但是目前昆蟲性信息素主要依靠化學(xué)合成，高昂的原材料成本和苛刻的反應(yīng)條件使人工合成性信息素產(chǎn)品的價格非常昂貴。另外，一些催化劑反應(yīng)的技術(shù)還不夠成熟，產(chǎn)生大量副產(chǎn)物，導(dǎo)致產(chǎn)品純度不夠高，不僅使其防治害蟲的效果大打折扣，又變相地二次污染環(huán)境。因此，綠色高效合成昆蟲性信息素，是防治農(nóng)業(yè)害蟲最有效的策略之一。
3、(z)-13-十八碳烯酸是(z)-13-十八碳烯乙酸酯、(z)-13-十八碳烯醛和(z)-13-十八碳烯醇三種性信息素的前體物質(zhì)。在合成(z)-13-十八碳烯酸之后，只需經(jīng)過已知的還原或酯化反應(yīng)即可生成三種性信息素。目前，(z)-13-十八碳烯酸主要依賴于化工合成，導(dǎo)致合成過程中副產(chǎn)物的生成、環(huán)境污染、成本昂貴及最終產(chǎn)物純度低等弊端。
4、因此，亟需開發(fā)出一種能夠極大解決化學(xué)合成過程中環(huán)境污染、成本昂貴以及純度偏低等問題的(z)-13-十八碳烯酸合成方法。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)之一提供了一種蛋白，其氨基酸序列與如seq?id?no.?3所示的序列具有95%以上的一致性。
2、在一個具體實施方式中，
3、本專利技術(shù)之二提供了編碼如本專利技術(shù)之一所述蛋白的核酸。
4、在一個具體實施方式中，所述核酸的堿基序列如seq?id?no.?2所示。
5、本專利技術(shù)之三提供了根據(jù)本專利技術(shù)之一所述的蛋白或如本專利技術(shù)之二所述的核酸在用于生物合成(z)-13-十八碳烯酸中的應(yīng)用。
6、在一個具體實施方式中，將所述蛋白與十六碳脂肪酸特異性硫酯酶、z11去飽和酶、基因沉默抑制子和植物油脂合成相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子共同在植物中表達以用于合成(z)-13-十八碳烯酸。
7、在一個具體實施方式中，所述十六碳脂肪酸特異性硫酯酶的氨基酸序列的登錄號為agg79283.1，所述z11去飽和酶的氨基酸序列的登錄號為qga89354.1，所述基因沉默抑制子的氨基酸序列如seq?id?no.?5所示，所述植物油脂合成相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的氨基酸序列的登錄號為np_191000.3。
8、在一個具體實施方式中，編碼所述十六碳脂肪酸特異性硫酯酶的核酸的堿基序列的登錄號為kc675176.1，編碼所述z11去飽和酶的核酸的堿基序列的登錄號為mn453822.1，編碼所述基因沉默抑制子的核酸的堿基序列如seq?id?no.?4所示，編碼所述植物油脂合成相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的核酸的堿基序列的登錄號為nm_115292.4。
9、在一個具體實施方式中，所述(z)-13-十八碳烯酸經(jīng)過酯化反應(yīng)生成(z)-13-十八碳烯乙酸酯。
10、在一個具體實施方式中，所述(z)-13-十八碳烯酸經(jīng)過還原反應(yīng)生成(z)-13-十八碳烯醛。
11、在一個具體實施方式中，所述(z)-13-十八碳烯酸經(jīng)過還原反應(yīng)生成(z)-13-十八碳烯醇。
12、本專利技術(shù)之四提供了一種合成(z)-13-十八碳烯酸的方法，其包括使根據(jù)本專利技術(shù)之一所述的蛋白與十六碳脂肪酸特異性硫酯酶、z11去飽和酶、基因沉默抑制子和植物油脂合成相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子共同在煙草中表達來合成所述(z)-13-十八碳烯酸。
13、在一個具體實施方式中，通過向所述煙草中轉(zhuǎn)入編碼如本專利技術(shù)之一所述蛋白的核酸、編碼所述十六碳脂肪酸特異性硫酯酶的核酸、編碼所述z11去飽和酶的核酸、編碼所述基因沉默抑制子的核酸和編碼所述植物油脂合成相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的核酸，使它們共同在煙草中表達來合成所述(z)-13-十八碳烯酸。
14、在一個具體實施方式中，編碼如本專利技術(shù)之一所述蛋白的核酸的堿基序列如seq?idno.?2所示。
15、在一個具體實施方式中，編碼所述十六碳脂肪酸特異性硫酯酶的核酸的堿基序列的登錄號為kc675176.1，編碼所述z11去飽和酶的核酸的堿基序列的登錄號為mn453822.1，編碼所述基因沉默抑制子的核酸的堿基序列如seq?id?no.?4所示，編碼所述植物油脂合成相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的核酸的堿基序列的登錄號為nm_115292.4。
16、本專利技術(shù)的有益效果：本專利技術(shù)發(fā)現(xiàn)將氨基酸序列如seq?id?no.?3所示的蛋白與十六碳脂肪酸特異性硫酯酶、z11去飽和酶、基因沉默抑制子和植物油脂合成相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子共同在植物中表達可以合成(z)-13-十八碳烯酸。利用植物合成(z)-13-十八碳烯酸的過程綠色無污染，由于純化簡單方便，因而環(huán)境污染程度低，且提取的純度高(hong-lei?wang?,bao-jian?ding,?jian-qing?dai,?tara?j.?nazarenus,?rafael?borges,?agenor?mafra-neto?,?edgar?b.?cahoon?,?per?hofvander?,?sten?stymne?&?christer?l?fstedt.insect?pest?management?with?sex?pheromone?precursors?from?engineered?oilseedplants.?2022.)，這改變了依賴于化工合成的路徑，解決了化工合成復(fù)雜、副產(chǎn)物量大、環(huán)境污染、成本昂貴及最終產(chǎn)物純度低等弊端。
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1.?一種蛋白，其氨基酸序列與如SEQ?ID?No.?3所示的序列具有95%以上的一致性。
2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如SEQ?ID?No.?3所示。
3.編碼如權(quán)利要求1或2所述蛋白的核酸。
4.?根據(jù)權(quán)利要求3所述的核酸，其特征在于，所述核酸的堿基序列如SEQ?ID?No.?2所示。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的蛋白或如權(quán)利要求3或4所述的核酸在用于生物合成(Z)-13-十八碳烯酸中的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，將所述蛋白與十六碳脂肪酸特異性硫酯酶、Z11去飽和酶、基因沉默抑制子和植物油脂合成相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子共同在植物中表達以用于合成(Z)-13-十八碳烯酸。
7.?根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述十六碳脂肪酸特異性硫酯酶的氨基酸序列的登錄號為AGG79283.1，所述Z11去飽和酶的氨基酸序列的登錄號為QGA89354.1，所述基因沉默抑制子的氨基酸序列如SEQ?ID?No.?5所示，所述植物油脂合成相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的氨基酸序列的登錄號為NP
8.?根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，編碼所述十六碳脂肪酸特異性硫酯酶的核酸的堿基序列的登錄號為KC675176.1，編碼所述Z11去飽和酶的核酸的堿基序列的登錄號為MN453822.1，編碼所述基因沉默抑制子的核酸的堿基序列如SEQ?ID?No.?4所示，編碼所述植物油脂合成相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的核酸的堿基序列的登錄號為NM_115292.4。
9.?根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述(Z)-13-十八碳烯酸經(jīng)過酯化反應(yīng)生成(Z)-13-十八碳烯乙酸酯；和/或
10.一種合成(Z)-13-十八碳烯酸的方法，其包括使根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的蛋白與十六碳脂肪酸特異性硫酯酶、Z11去飽和酶、基因沉默抑制子和植物油脂合成相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子共同在煙草中表達來合成所述(Z)-13-十八碳烯酸。
...【技術(shù)特征摘要】
1.?一種蛋白，其氨基酸序列與如seq?id?no.?3所示的序列具有95%以上的一致性。
2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.?3所示。
3.編碼如權(quán)利要求1或2所述蛋白的核酸。
4.?根據(jù)權(quán)利要求3所述的核酸，其特征在于，所述核酸的堿基序列如seq?id?no.?2所示。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的蛋白或如權(quán)利要求3或4所述的核酸在用于生物合成(z)-13-十八碳烯酸中的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，將所述蛋白與十六碳脂肪酸特異性硫酯酶、z11去飽和酶、基因沉默抑制子和植物油脂合成相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子共同在植物中表達以用于合成(z)-13-十八碳烯酸。
7.?根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述十六碳脂肪酸特異性硫酯酶的氨基酸序列的登錄號為agg79283.1，所述z11去飽和酶的氨基酸序列的登錄號為qga89354...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：劉夢雨，丁寶建，譚暢，
申請(專利權(quán))人：湘湖實驗室農(nóng)業(yè)浙江省實驗室，
類型：發(fā)明
國別省市：
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