本發明專利技術提供了一種華白及的培育方法，屬于植物組織培養技術領域。本發明專利技術提供的華白及培育方法采用華白及假鱗莖和根作為外植體、通過連續誘導的方法獲得愈傷組織、再由愈傷組織再生完整植株的方式，建立瀕危植物華白及的快速繁殖方法，可為保護華白及種質資源提供效果優良的可行方案，解決了現有技術中華白及組培方案依賴成熟蒴果或種子，而無法避免植株本身具有的生長緩慢、種子成熟周期長、種子萌發困難等限制的問題，能夠實現在沒有華白及成熟蒴果或種子的條件下，快速、批量獲得完整植株，實現華白及植株的快速、穩定、連續的供應，為華白及種質資源保護提供新方法。
1、華白及（
bletilla?sinensis(rolfe)?schltr.）是蘭科白及屬多年生草本植物，最早于1898年由英國植物采集家奧古斯汀·亨利在云南蒙自發現，并于1903年發表于國際植物學期刊《林奈植物學報》。華白及多生長于巖壁或石縫中，自然結實率非常低，種子萌發條件苛刻，加上氣候變化及人為采摘等因素，華白及接近滅絕。華白及已經被世界自然保護聯盟（iucn）紅色名錄列為瀕危物種，并在《瀕危野生動植物種國際貿易公約》（cites）中被列為附錄ⅱ物種。
2、中國專利cn115589948a公開了一種華白及非共生萌發培養基及繁殖方法，所述培養基為改良kc培養基，所述改良kc培養基為：在kc基本培養基的基礎上再加上椰子粉和活性碳粉進行改良，所述繁殖方法包括以下步驟：華白及果莢消毒及種子處理；華白及非共生萌發及培養：將華白及種子播種至改良kc培養基上進行萌發；華白及幼苗繼代培養：將華白及萌發培養后未褐化的幼苗長到3-4cm高時進行繼代培養；華白及種苗移栽種植：華白及幼苗長到培養瓶蓋頂時，即可煉苗出瓶移栽。
3、該方案是以華白及種子作為外植體獲得完整植株的方法，與現有技術中的其他白及屬物種組培方案類似，屬于以成熟蒴果或種子作為外植體進行快繁的方案。但是由于華白及自然界現存數量極少，幾乎沒有成熟果莢，所以已報道的方法存在明顯缺陷，并不適用于華白及種質資源的拯救，實用意義較低。
/>技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種華白及的培育方法，為保護華白及種質資源提供了有效方案。
2、為了實現上述專利技術目的，本專利技術提供以下技術方案：
3、本專利技術提供了一種華白及愈傷組織誘導方法，包括以下步驟：
4、將華白及外植體接種至誘導培養基，進行誘導培養，得到華白及愈傷組織；
5、所述誘導培養基以ms培養基為基礎培養基，含有蔗糖和瓊脂。
6、優選的，所述華白及外植體的來源為華白及的根和/或華白及的假鱗莖。
7、優選的，所述誘導培養基中蔗糖的終濃度為20~40g/l；
8、所述誘導培養基中瓊脂的終濃度為5~10g/l；
9、和/或，所述誘導培養包括進行5~15次繼代培養，每次繼代培養采用相同的培養基；
10、所述繼代培養的繼代頻次為20~30天/次；
11、所述華白及外植體消毒滅菌后進行接種；
12、所述消毒滅菌采用的試劑包括乙醇、無菌水或次氯酸鈉溶液；
13、所述誘導培養的培養條件為：20~25℃，暗培養。
14、本專利技術還提供了通過上述華白及愈傷組織誘導方法得到的華白及愈傷組織。
15、本專利技術還提供了一種華白及植株誘導方法，包括以下步驟：
16、將華白及愈傷組織接種至再生培養基，進行再生誘導培養，得到華白及植株；
17、所述再生培養基以ms培養基為基礎培養基，含有蔗糖、瓊脂、活性炭、6-芐氨基嘌呤和2,4-二氯苯氧乙酸。
18、優選的，所述再生培養基中蔗糖的終濃度為20~40g/l；
19、所述再生培養基中瓊脂的終濃度為5~10g/l；
20、所述再生培養基中活性炭的終濃度為0.5~2g/l；
21、所述再生培養基中6-芐氨基嘌呤的終濃度為0.5~2mg/l；
22、所述再生培養基中2,4-二氯苯氧乙酸的終濃度為1~3g/l；
23、優選的，所述華白及愈傷組織為本專利技術獲得的上述華白及愈傷組織。
24、優選的，所述再生誘導培養過程中包括進行2~5次更換相同的培養基；
25、所述更換相同的培養基的頻次為25~35天/次；
26、所述再生誘導培養的培養條件為：20~25℃，相對濕度60~80%，光照強度1000~2000lx。
27、本專利技術還提供了通過上述華白及植株誘導方法得到的華白及植株。
28、本專利技術還提供了一種華白及土培苗的培育方法，包括以下步驟：
29、將上述華白及植株去除培養基后移栽至營養基質中，培養5天以上，得到華白及土培苗；
30、所述營養基質中含有營養土和蛭石。
31、優選的，所述營養基質中營養土和蛭石的重量比為1.5~2.5:1；
32、所述培養的培養條件為：20~25℃，光照強度1000~2000lx。
33、本專利技術的有益效果：
34、本專利技術提供的華白及培育方法采用華白及假鱗莖和根作為外植體、通過連續誘導的方法獲得愈傷組織、再由愈傷組織再生完整植株的方式，建立瀕危植物華白及的快速繁殖方法，可為保護華白及種質資源提供效果優良的可行方案，能夠實現在沒有華白及成熟蒴果或種子的條件下，快速、批量獲得完整植株。
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【技術保護點】
1.一種華白及愈傷組織誘導方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的華白及愈傷組織誘導方法，其特征在于，所述華白及外植體的來源為華白及的根和/或華白及的假鱗莖。
3.根據權利要求1所述的華白及愈傷組織誘導方法，其特征在于，所述誘導培養基中蔗糖的終濃度為20~40g/L；
4.通過權利要求1~3任一項所述的華白及愈傷組織誘導方法得到的華白及愈傷組織。
5.一種華白及植株誘導方法，其特征在于，包括以下步驟：
6.根據權利要求5所述的華白及植株誘導方法，其特征在于，所述再生培養基中蔗糖的終濃度為20~40g/L；
7.根據權利要求5所述的華白及植株誘導方法，其特征在于，所述再生誘導培養過程中包括進行2~5次更換相同的培養基；
8.通過權利要求5~7任一項所述的華白及植株誘導方法得到的華白及植株。
9.一種華白及土培苗的培育方法，其特征在于，包括以下步驟：
10.根據權利要求9所述的華白及土培苗的培育方法，其特征在于，所述營養基質中營養土和蛭石的重量比為1.5~2.5:1；
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【技術特征摘要】
1.一種華白及愈傷組織誘導方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的華白及愈傷組織誘導方法，其特征在于，所述華白及外植體的來源為華白及的根和/或華白及的假鱗莖。
3.根據權利要求1所述的華白及愈傷組織誘導方法，其特征在于，所述誘導培養基中蔗糖的終濃度為20~40g/l；
4.通過權利要求1~3任一項所述的華白及愈傷組織誘導方法得到的華白及愈傷組織。
5.一種華白及植株誘導方法，其特征在于，包括以下步驟：
6.根據權利要求5...
【專利技術屬性】
技術研發人員：周宇，陳家悅，劉苑坤，
申請(專利權)人：杭州拾光欣雅生物技術有限公司，
類型：發明
國別省市：
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