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【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于提純,涉及一種l-高絲氨酸發(fā)酵液的純化方法。
技術(shù)介紹
1、l-高絲氨酸((s)-2-氨基-4-羥基丁酸)是一種非蛋白質(zhì)氨基酸,其衍生物不僅可以通過(guò)酶促反應(yīng)轉(zhuǎn)化為其他重要化工中間體,而且具有豐富的生物活性,例如可以有效地抑制鐮狀紅細(xì)胞、抗真菌。另外,l-高絲氨酸還是合成手性除草劑l-草銨膦的一種重要中間體。因此,在藥學(xué)和生物學(xué)等方面,對(duì)于l-高絲氨酸的研究越來(lái)越受到科研工作者的重視。
2、l-高絲氨酸發(fā)酵液是一種成分復(fù)雜的混合物,除含有l(wèi)-高絲氨酸外,還存在大量的菌體、蛋白質(zhì)、殘?zhí)恰⑸睾蜔o(wú)機(jī)鹽等成分。蛋白質(zhì)、色素和無(wú)機(jī)鹽的去除是提取l-高絲氨酸的關(guān)鍵,工業(yè)上常用的脫色和除鹽方法為活性炭脫色、離子交換除鹽或電滲析除鹽。活性炭脫色會(huì)產(chǎn)生大量的廢炭,同時(shí)截留部分發(fā)酵液,降低產(chǎn)物收率;離子交換除鹽有廢水產(chǎn)生,并消耗大量酸堿;電滲析技術(shù)有處理時(shí)間長(zhǎng)、除鹽率不高、產(chǎn)物純度低等缺點(diǎn)。
3、引用文獻(xiàn)1提供了一種制備l-高絲氨酸的方法,其以l-天冬氨酸為原料制備l-天門冬氨酸甲酯或乙酯,再利用金屬?gòu)?fù)氫化合物為還原劑在有機(jī)溶劑中常壓制備l-高絲氨酸,但是此方法的提純步驟繁瑣,環(huán)境污染嚴(yán)重。
4、引用文獻(xiàn)2提供了一種l-高絲氨酸及其衍生物的生物合成方法,其以丙酮酸和醛類化合物為底物,在醛縮酶的催化作用下進(jìn)行反應(yīng),所得產(chǎn)物依次經(jīng)過(guò)層析分離、脫鹽、脫色、濃縮結(jié)晶、干燥等步驟得到l-高絲氨酸,其在后處理過(guò)程中采用離子交換色譜法作為關(guān)鍵純化步驟,具有回收率高、雜質(zhì)去除徹底、處理量大等優(yōu)點(diǎn),但在樹(shù)脂再生過(guò)程中
5、引用文獻(xiàn):
6、引用文獻(xiàn)1:cn101100438a
7、引用文獻(xiàn)2:cn105506014a
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、專利技術(shù)要解決的問(wèn)題
2、由于l-高絲氨酸發(fā)酵液產(chǎn)品含有大量的可溶性雜質(zhì),不利于后續(xù)工藝開(kāi)發(fā),現(xiàn)有的提純方法往往存在產(chǎn)物純度低、工藝復(fù)雜、處理時(shí)間長(zhǎng)和環(huán)境污染嚴(yán)重等問(wèn)題,基于上述問(wèn)題,急需一種新的提取l-高絲氨酸的方法。
3、用于解決問(wèn)題的方案
4、[1]、本專利技術(shù)提供了一種從發(fā)酵液中純化l-高絲氨酸的方法,其包括如下步驟:
5、(1)獲得一段l-高絲氨酸:將l-高絲氨酸發(fā)酵液和不良性溶劑混合,析出沉淀,過(guò)濾得到固體1和濾液1,所述固體1為一段l-高絲氨酸;
6、(2)獲得二段l-高絲氨酸:將所述一段l-高絲氨酸和混合溶劑混合至溶解,使體系分成兩相,分相得到上層相1和下層相1,使所述上層相1析出沉淀,過(guò)濾得到固體2和濾液2,所述固體2為二段l-高絲氨酸;
7、(3)獲得三段l-高絲氨酸:將所述二段l-高絲氨酸和良性溶劑混合至溶解,脫色后與不良性溶劑混合并加熱,使體系分成兩相,分相得到上層相2和下層相2,使所述上層相2析出沉淀,過(guò)濾得到固體3和濾液3,所述固體3為三段l-高絲氨酸。
8、[2]、根據(jù)[1]所述的方法,其中,
9、所述發(fā)酵液中l(wèi)-高絲氨酸的絕對(duì)含量為30-55wt%。
10、[3]、根據(jù)[1]或[2]所述的方法,其中,
11、所述不良性溶劑為醇類或腈類;
12、和/或,
13、所述良性溶劑為水;
14、和/或,
15、所述一段l-高絲氨酸和所述混合溶劑的質(zhì)量比為1:3~1:6;
16、和/或,
17、所述混合溶劑為醇類水溶液。
18、[4]、根據(jù)[1]~[3]任一項(xiàng)所述的方法,其中,步驟(1)中,
19、所述l-高絲氨酸發(fā)酵液和所述不良性溶劑的質(zhì)量比為1:1.0~1:2.0;
20、和/或,
21、所述析出沉淀的溫度為0~30℃;
22、和/或,
23、所述一段l-高絲氨酸為濕品。
24、[5]、根據(jù)[1]~[4]任一項(xiàng)所述的方法,其中,步驟(1)中,
25、所述濾液1用于回收含水的不良性溶劑;
26、優(yōu)選地,所述回收通過(guò)蒸餾和任選的濃縮來(lái)進(jìn)行。
27、[6]、根據(jù)[1]~[5]任一項(xiàng)所述的方法,其中,步驟(2)中,
28、所述溶解的溫度為30~70℃;
29、和/或,
30、所述析出沉淀的溫度在20℃以下。
31、[7]、根據(jù)[1]~[6]任一項(xiàng)所述的方法,其中,步驟(2)中,
32、所述下層相1和/或所述濾液2用于獲得額外的二段l-高絲氨酸;
33、優(yōu)選地,所述額外的二段l-高絲氨酸通過(guò)如下步驟獲得:將所述下層相1和/或所述濾液2加熱,使體系分成兩相,分相得到上層相1’和下層相1’,使所述上層相1’析出沉淀,過(guò)濾得到固體2’和濾液2’,所述固體2’為額外的二段l-高絲氨酸;
34、更優(yōu)選地,在獲得所述額外的二段l-高絲氨酸的步驟中,所述加熱的目標(biāo)溫度為30~70℃;和/或,所述析出沉淀的溫度在20℃以下。
35、[8]、根據(jù)[1]~[7]任一項(xiàng)所述的方法,其中,步驟(3)中,
36、所述二段l-高絲氨酸和所述良性溶劑的質(zhì)量比為1:0.8-1:1;
37、和/或,
38、所述溶解的溫度為20~60℃;
39、和/或,
40、所述脫色的溫度為20~60℃;和/或,所述脫色通過(guò)活性炭吸附來(lái)進(jìn)行;優(yōu)選地,所述活性炭的相對(duì)用量為0.5-1.5wt%;
41、和/或,
42、所述二段l-高絲氨酸和所述不良性溶劑的質(zhì)量比為1:1.5-1:2.5;
43、和/或,
44、所述加熱的目標(biāo)溫度為30~70℃;
45、和/或,
46、所述析出沉淀的溫度在20℃以下。
47、[9]、根據(jù)[1]~[7]任一項(xiàng)所述的方法,其中,步驟(3)中,
48、所述下層相2用于獲得額外的三段l-高絲氨酸;
49、優(yōu)選地,所述額外的三段l-高絲氨酸通過(guò)如下步驟獲得:將所述下層相2析出沉淀,過(guò)濾得到固體3’和濾液3’,所述固體3’為額外的三段l-高絲氨酸;
50、更優(yōu)選地,在獲得所述額外的三段l-高絲氨酸的步驟中,所述析出沉淀的溫度在20℃以下。
51、[10]、根據(jù)[1]~[9]任一項(xiàng)所述的方法,其中,所述方法還包括如下步驟:
52、(4)獲得純品l-高絲氨酸:將所述三段l-高絲氨酸加入不良性溶劑中打漿,過(guò)濾得到固體4和濾液4,所述固體4為純品l-高絲氨酸;
53、優(yōu)選地,步驟(4)中,所述不良性溶劑為醇類或腈類。
54、專利技術(shù)的效果
55、1、本專利技術(shù)建立l-高絲氨酸發(fā)酵液純化方法,高產(chǎn)率獲得高光學(xué)純度l-高絲氨酸,產(chǎn)品純度達(dá)到99%以上。
56、本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種從發(fā)酵液中純化L-高絲氨酸的方法,其包括如下步驟:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法,其特征在于,
4.根據(jù)權(quán)利要求1~3任一項(xiàng)所述的方法,其特征在于,步驟(1)中,
5.根據(jù)權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述的方法,其特征在于,步驟(1)中,
6.根據(jù)權(quán)利要求1~5任一項(xiàng)所述的方法,其特征在于,步驟(2)中,
7.根據(jù)權(quán)利要求1~6任一項(xiàng)所述的方法,其特征在于,步驟(2)中,
8.根據(jù)權(quán)利要求1~7任一項(xiàng)所述的方法,其特征在于,步驟(3)中,
9.根據(jù)權(quán)利要求1~7任一項(xiàng)所述的方法,其特征在于,步驟(3)中,
10.根據(jù)權(quán)利要求1~9任一項(xiàng)所述的方法,其特征在于,所述方法還包括如下步驟:
【技術(shù)特征摘要】
1.一種從發(fā)酵液中純化l-高絲氨酸的方法,其包括如下步驟:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法,其特征在于,
4.根據(jù)權(quán)利要求1~3任一項(xiàng)所述的方法,其特征在于,步驟(1)中,
5.根據(jù)權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述的方法,其特征在于,步驟(1)中,
6.根據(jù)權(quán)利要求1~5任一...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員:劉文,魏榮輝,周波,程柯,左翔,
申請(qǐng)(專利權(quán))人:利爾化學(xué)股份有限公司,
類型:發(fā)明
國(guó)別省市:
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