【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于生物材料，具體涉及一種用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法。
技術介紹
1、皮膚是內臟器官與外界其他地方之間的保護屏障，但皮膚處容易受到細菌感染，成為了阻礙傷口正常愈合和皮膚生成的常見問題，這將會導致長期的慢性炎癥和感染。針對細菌感染的傷口，臨床上常見的方法是通過抗生素進行治療，但抗生素的濫用會導致細菌產生耐藥性，進而變為多重耐藥(mdr)細菌，危及抗生素治療的療效，如果機體內保留更多無法控制的耐藥菌，在突發嚴重疾病時抗生素不會起到很好的藥效，同時也會產生胃腸道刺激、嘔吐、腸道紊亂等副作用。預計到2050年，mdr細菌感染會導致超過1000萬人死亡，如何提高mdr細菌感染傷口處的抗菌效果是一個有待探究的問題。為了有效根除mdr細菌和減少抗生素用量，面對mdr細菌的泛濫和難以清除的特點，近年來提出的結合納米抗菌劑抗菌的方式，基于納米材料的水凝膠的抗菌性能得到了廣泛的研究，由于其涉及到多種抗菌機制，有望成為抗生素的有效替代品。
2、近年來，在創面修復領域，難愈性創面治療的研究熱點是以水凝膠為載體，進一步摻入特定的抗菌納米粒子而構建的納米復合水凝膠，應用在mdr細菌感染創面處。利用水凝膠敷料良好的生物相容性、仿細胞外基質的3d微環境、與天然皮膚組織黏彈性類似等特性，提供支撐細胞生長的支架方式形成抗感染屏障，從而促進血液的自然凝結，阻斷神經末梢以減輕疼痛，吸收創面滲出液。相較于傳統的水凝膠敷料，納米復合水凝膠將納米粒子或納米結構的材料均勻地分散在聚合物網絡中，通過物理或化學交聯形成水
技術實現思路
1、本專利技術所要解決的技術問題在于針對上述現有技術的不足，提供一種用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法。該方法以含mxene@cutcpp復合納米粒子的改性重組膠原蛋白體系以及聚乙烯醇溶液為主要原料，經攪拌混合得到用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠，可以緊密貼合多重耐藥菌感染傷口，可通過光熱治療和光動力治療，兼具抗菌特性和可自愈特性，能夠全面高效針對感染處的傷口進行管理和治療。
2、為解決上述技術問題，本專利技術采用的技術方案是：一種用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
3、步驟一、采用mxene納米片和銅卟啉納米片制備mxene@cutcpp復合納米粒子；
4、步驟二、利用edc和nhs對重組膠原蛋白進行改性，得到改性重組膠原蛋白；
5、步驟三、將步驟一中制備的mxene@cutcpp復合納米粒子經co60照射滅菌；
6、步驟四、將步驟二中所述改性重組膠原蛋白溶解于磷酸鹽緩沖溶液中，得到質量濃度為10％～15％的改性重組膠原蛋白溶液；
7、步驟五、將步驟三中滅菌后的mxene@cutcpp復合納米粒子與步驟四中所述改性重組膠原蛋白溶液混合，攪拌1min～2min，得到體系a；
8、步驟六、將步驟五中所述體系a加入聚乙烯醇溶液中，混合均勻，得到用于多重耐藥菌感染性傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠。
9、上述的用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟一中mxene@cutcpp復合納米粒子的制備方法具體包括：
10、步驟101、將碳化鈦鋁用氫氟酸刻蝕12h～96h，離心，干燥，得到mxene多層納米片；
11、步驟102、將步驟101所述mxene多層納米片用四甲基氫氧化銨溶液剝離12h～48h，離心，干燥，得到少層mxene納米片；
12、步驟103、將四(4-羧基苯基)卟吩超聲均勻分散在n,n-二甲基甲酰胺和乙醇的混合溶液中，得到四(4-羧基苯基)卟吩混懸液，將二水合氯化銅和聚乙烯吡咯烷酮加入所述混懸液中，在70℃～90℃下水浴加熱，劇烈攪拌5h～9h，離心后冷凍干燥，得到銅卟啉納米片；
13、步驟104、將步驟102所述mxene納米片和步驟103所述銅卟啉納米片超聲均勻分散在n,n-二甲基甲酰胺和乙醇的混合溶液中，得到含有銅卟啉和mxene的混懸液，在70℃～90℃下水浴加熱，劇烈攪拌5h～9h，離心，冷凍干燥，得到mxene@cutcpp納米片。
14、上述的用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟101中所述氫氟酸的質量為碳化鈦鋁質量的5倍～10倍，所述氫氟酸的質量百分含量為30％～45％；步驟102中所述四甲基氫氧化銨溶液的質量為碳化鈦鋁質量的5倍～10倍，所述四甲基氫氧化銨溶液中四甲基氫氧化銨的質量百分含量為25％～50％。
15、上述的用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟103中所述n,n-二甲基甲酰胺和乙醇的混合溶液中n,n-二甲基甲酰胺與乙醇的體積比為(3～4):1；所述四(4-羧基苯基)卟吩的質量與n,n-二甲基甲酰胺和乙醇的混合溶液的體積之比為(4～5):1，其中質量的單位為mg，體積的單位為ml；所述四(4-羧基苯基)卟吩的質量為二水合氯化銅質量的150％～200％，聚乙烯吡咯烷酮的質量為二水合氯化銅質量的100％～130％；步驟104中所述n,n-二甲基甲酰胺和乙醇的混合溶液中n,n-二甲基甲酰胺與乙醇的體積比為(3～4):1，所述mxene納米片的質量為銅卟啉納米片質量的80％～150％，mxene納米片的質量與n,n-二甲基甲酰胺和乙醇的混合溶液的體積之比為(4～5):1，其中質量的單位為mg，體積的單位為ml。
16、上述的用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟二中改性的方法具體包括：
17、步驟201、將重組膠原蛋白、edc和nhs溶解于磷酸鹽緩沖溶液中，得到混合溶液，將所述混合溶液于20℃～37℃溫度條件下攪拌活化1h～3h，得到活化后的重組膠原蛋白溶液；
18、步驟202、將步驟201活化后的重組膠原蛋白溶液和含3-氨基苯硼酸的緩沖溶液混合，于20℃～37℃溫度條件下攪拌反應12h～16h，將攪拌反應后體系透析，凍干，得到改性重組膠原蛋白。
19、上述的用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟201中所述混合溶液的ph為3～4；所述重組膠原蛋白的質量為磷酸鹽緩沖溶液質量的4％～5％。
20、上述的用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟201中所述重組膠原蛋白為重組膠原蛋白cf-1552，重組膠原蛋白物質的量為步驟202中3-氨基苯硼酸物質的量的1.5倍～2倍；步驟202中所述含3-氨基苯硼酸的緩沖溶液為將3-氨基苯硼酸溶于磷酸鹽緩本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟一中MXene@CuTCPP復合納米粒子的制備方法具體包括：
3.根據權利要求2所述的用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟101中所述氫氟酸的質量為碳化鈦鋁質量的5倍～10倍，所述氫氟酸的質量百分含量為30％～45％；步驟102中所述四甲基氫氧化銨溶液的質量為碳化鈦鋁質量的5倍～10倍，所述四甲基氫氧化銨溶液中四甲基氫氧化銨的質量百分含量為25％～50％。
4.根據權利要求2所述的用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟103中所述N,N-二甲基甲酰胺和乙醇的混合溶液中N,N-二甲基甲酰胺與乙醇的體積比為(3～4):1；所述四(4-羧基苯基)卟吩的質量與N,N-二甲基甲酰胺和乙醇的混合溶液的體積之比為(4～5):1，其中質量的單位為mg，體積的單位為mL
5.根據權利要求1所述的用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟二中改性的方法具體包括：
6.根據權利要求5所述的用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟201中所述混合溶液的pH為3～4；所述重組膠原蛋白的質量為磷酸鹽緩沖溶液質量的4％～5％。
7.根據權利要求5所述的用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟201中所述重組膠原蛋白為重組膠原蛋白CF-1552，重組膠原蛋白物質的量為步驟202中3-氨基苯硼酸物質的量的1.5倍～2倍；步驟202中所述含3-氨基苯硼酸的緩沖溶液為將3-氨基苯硼酸溶于磷酸鹽緩沖液中制備得到的緩沖溶液，緩沖溶液中3-氨基苯硼酸的質量百分含量為4％～5％；3-氨基苯硼酸、EDC和NHS的物質的量之比為(1～1.5):1:1。
8.根據權利要求1所述的用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟五所述體系A中MXene@CuTCPP復合納米粒子的質量百分含量為0.2％～0.5％。
9.根據權利要求1所述的用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟六中所述聚乙烯醇溶液為質量濃度10％～15％的聚乙烯醇水溶液，聚乙烯醇的分子量為89000～98000。
10.根據權利要求1所述的用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟六中聚乙烯醇溶液和體系A的質量比為(1～2):(1～2)。
...【技術特征摘要】
1.一種用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟一中mxene@cutcpp復合納米粒子的制備方法具體包括：
3.根據權利要求2所述的用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟101中所述氫氟酸的質量為碳化鈦鋁質量的5倍～10倍，所述氫氟酸的質量百分含量為30％～45％；步驟102中所述四甲基氫氧化銨溶液的質量為碳化鈦鋁質量的5倍～10倍，所述四甲基氫氧化銨溶液中四甲基氫氧化銨的質量百分含量為25％～50％。
4.根據權利要求2所述的用于多重耐藥菌感染傷口修復的重組膠原蛋白納米復合水凝膠的制備方法，其特征在于，步驟103中所述n,n-二甲基甲酰胺和乙醇的混合溶液中n,n-二甲基甲酰胺與乙醇的體積比為(3～4):1；所述四(4-羧基苯基)卟吩的質量與n,n-二甲基甲酰胺和乙醇的混合溶液的體積之比為(4～5):1，其中質量的單位為mg，體積的單位為ml；所述四(4-羧基苯基)卟吩的質量為二水合氯化銅質量的150％～200％，聚乙烯吡咯烷酮的質量為二水合氯化銅質量的100％～130％；步驟104中所述n,n-二甲基甲酰胺和乙醇的混合溶液中n,n-二甲基甲酰胺與乙醇的體積比為(3～4):1，所述mxene納米片的質量為銅卟啉納米片質量的80％～150％，mxene納米片的質量與n,n-二甲基甲酰胺和乙醇的混合溶液的體積之比為(4～5):1，其中質量的單位為mg，體積的單位為ml。
【專利技術屬性】
技術研發人員：曾丹，李重一，范代娣，張雨曦，王瑞瑤，魏舒暢，
申請(專利權)人：西北大學，
類型：發明
國別省市：
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