【技術實現步驟摘要】
本專利技術生物材料保存，具體涉及一種促進骨細胞分化抑制骨包蟲生長的骨修復材料保存液及其制備方法。
技術介紹
1、在骨科、骨傷科等臨床醫療工作中，為了保持手術后骨窗融合的速度，減少排異性反應，采用自體骨材料回植修復術后的組織缺損已經成為越來越常用的方法。因此，骨組織材料的無損、活性化保存就成為回植成功與否、病體恢復程度的重要因素。
2、目前，保存骨材料的方法，第一類是以蜂蜜、酒精、洗必泰、福爾馬林、甘油液為保存基質的濕法保存，但是酒精、福爾馬林、洗必泰保存液會產生脫鈣作用，損害骨組織密度，蜂蜜、甘油液及其它生物保存液沒有殺菌去病毒效果，第二類是低溫保存法，將骨材料保存于深低溫環境（-80℃），回植前，凍干骨在術前1小時取出，于林格氏液中重新水合，操作不當，往往造成骨移植材料的斷裂，同時排除操作因素的意外損壞也難以避免；同時，繁瑣的操作容易引起骨材料污染，導致骨回植失敗。第三類是凍干后常溫保存。只適用于部分允許經脫鈣或脫蛋白處理后凍干保存的骨材料，也存在骨材料生物活性和力學強度下降的缺陷。
3、因此，有必要尋找一種非深度低溫長效化的保存方法。
技術實現思路
1、針對上述技術問題，本專利技術擬通過dmem培養液為基本保存液，加入pgs-cmcs凝膠，按照一定濃度和比例合理搭配，顯著提高了保存過程中成骨細胞高活性，實現了成骨細胞快速附著復溫骨材料的效果。
2、專利技術人團隊對聚癸二酸甘油酯促進成骨分化方向開展了一系列研究，在制備微圖案化結構調控干細胞的分
3、具體的，本專利技術的技術方案如下：
4、一種促進骨細胞分化抑制骨包蟲生長的骨修復材料保存液，包括20~30g/l的pgs-cmcs凝膠、高糖型deme培養基(d-葡萄糖濃度為4500mg/l）和雙氫青蒿素；所述pgs-cmcs凝膠由聚癸二酸甘油酯混合羧甲基殼聚糖后浸泡生理鹽水得到；所述聚癸二酸甘油酯與羧甲基殼聚糖的質量比為3~5：1。
5、進一步的，所述pgs-cmcs凝膠濃度為20~25g/l；所述促進骨細胞分化的骨修復材料保存液的ph為7.10~7.40。
6、進一步的，所述骨修復材料包括具有固定形狀的自體或異體移植骨、仿生骨、軟骨移植物。
7、本專利技術還一種促進骨細胞分化抑制骨包蟲生長的骨修復材料保存液的制備方法，包括如下步驟：
8、s1：將癸二酸和甘油按1：1.5~2的摩爾比熔融聚合后得到聚癸二酸甘油酯，按質量比為3~5：1混合羧甲基殼聚糖，混合物浸泡等質量生理鹽水得到pgs-cmcs凝膠；
9、s2：使用注射器抽取pgs-cmcs凝膠，注入攪拌中的高糖型deme培養基，加入雙氫青蒿素，使其終濃度為40μmol/l~80μmol/l，持續攪拌5~10min，調節ph至7.10~7.50，分袋存裝。
10、進一步的，使用平均分子量在5000~20000以內的聚癸二酸甘油酯浸泡于甘油、生理鹽水的混合溶液，可以實現本專利技術所制備的pgs相同效果。
11、進一步的，本專利技術的一種促進骨細胞分化抑制骨包蟲生長的骨修復材料保存液具有促進干細胞分化為骨細胞的效果，可作為成骨分化培養基使用。
12、本專利技術還提供上述一種促進骨細胞分化抑制骨包蟲生長的骨修復材料保存液在保存骨修復材料中的應用，所述應用包括：將促進骨細胞分化的骨修復材料保存液放入容器內以10~15r/min的速度攪動2~3min，骨修復材料經無菌生理鹽水清洗，放入促進骨細胞分化的骨修復材料保存液浸泡，密封后于0~4℃下保存。
13、本專利技術的有益效果在于：本專利技術提供了一種促進骨細胞分化抑制骨包蟲生長的骨修復材料保存液，該保存液具有維持成骨細胞高活性、減少骨細胞凋亡、保持骨組織良好生物學活性、減少骨基質降解的作用，同時該保存液對骨組織的無機質（鈣質）沒有破壞溶解作用，因而可以長期保持骨組織修復材料的力學性能，是一種兼備生物相容性和生物活性的保存液。
14、此外，通過過量甘油聚合形成的混合聚癸二酸甘油酯凝膠交織羧甲基殼聚糖形成的混合凝膠（pgs-cmcs凝膠），顯著增加了保存液的各項性能，尤其是抗菌性能，羧甲基殼聚糖在促進pgs水溶性，同pgs形成交聯網絡，起到載體和助溶作用，同時該混合物對羧甲基殼聚糖起到緩釋作用，以保持較長時間的抗菌作用，相比以dmem培養基作為主要成分的骨修復材料保存液，本專利技術的保存液成本更低，制備更加方便，成骨細胞共培養實驗證實，在骨髓間充質干細胞同骨修復材料共培養時，該保存液有助于促進骨細胞分化。
15、通過在骨修復材料保存液加入雙氫青蒿素，浸泡保存的骨修復材料可特定用于骨包蟲導致的骨缺損修復。
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1.一種促進骨細胞分化抑制骨包蟲生長的骨修復材料保存液，其特征在于，包括20~30g/L的PGS-CMCS凝膠和高糖型DEME培養基；所述PGS-CMCS凝膠由聚癸二酸甘油酯混合羧甲基殼聚糖后浸泡生理鹽水得到；所述聚癸二酸甘油酯與羧甲基殼聚糖的質量比為3~5：1；
2.如權利要求1所述的一種促進骨細胞分化抑制骨包蟲生長的骨修復材料保存液，其特征在于，所述PGS-CMCS凝膠濃度為20~25g/L；所述促進骨細胞分化的骨修復材料保存液的pH為7.10~7.40。
3.如權利要求1所述的一種促進骨細胞分化抑制骨包蟲生長的骨修復材料保存液，其特征在于，所述骨修復材料包括具有固定形狀的自體或異體移植骨、仿生骨、軟骨移植物。
4.一種促進骨細胞分化抑制骨包蟲生長的骨修復材料保存液的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
5.權利要求1所述的一種促進骨細胞分化抑制骨包蟲生長的骨修復材料保存液在保存骨修復材料中的應用，包括：將促進骨細胞分化的骨修復材料保存液放入容器內以10~15r/min的速度攪動2~3min，骨修復材料經無菌生理鹽水清洗，放入促
6.權利要求1所述的一種促進骨細胞分化抑制骨包蟲生長的骨修復材料保存液在保存修復骨包蟲骨缺損的骨修復材料中的應用。
...【技術特征摘要】
1.一種促進骨細胞分化抑制骨包蟲生長的骨修復材料保存液，其特征在于，包括20~30g/l的pgs-cmcs凝膠和高糖型deme培養基；所述pgs-cmcs凝膠由聚癸二酸甘油酯混合羧甲基殼聚糖后浸泡生理鹽水得到；所述聚癸二酸甘油酯與羧甲基殼聚糖的質量比為3~5：1；
2.如權利要求1所述的一種促進骨細胞分化抑制骨包蟲生長的骨修復材料保存液，其特征在于，所述pgs-cmcs凝膠濃度為20~25g/l；所述促進骨細胞分化的骨修復材料保存液的ph為7.10~7.40。
3.如權利要求1所述的一種促進骨細胞分化抑制骨包蟲生長的骨修復材料保存液，其特征在于，所述骨修復材料包...
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