【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于中藥種苗離體快繁生物，具體涉及一種白前組培成苗與栽培的方法與應用。
技術介紹
1、白前，白前始載于漢魏《名醫別錄》，列為中品，包括蘿藦科植物柳葉白前[cynanchumstauntonii(decne.)schltr.exlévl]或芫花葉白前[cynanchumglaucescens(decne.)hand.-mazz.]具有降氣，消痰，止咳的功效。用于肺氣壅實，咳嗽痰多，胸滿喘急。長期以來，白前處于野生狀態，關于白前種質資源、繁育與栽培研究報道較少。野生白前生長在低山丘陵，河灘砂漬、平原的湖邊、溪邊、溝邊或山谷潮濕處。目前，白前主要以收集成熟的角果，并通過種子播種進行傳統的繁殖。繁殖系數低，經營周期長，效率比較低，嚴重制約了白前的人工栽培發展。所以有必要探索高效的柳葉白前快繁產業化技術。
2、目前，國內外通過組織培養技術來實現白前良種壯苗快速繁殖報道較少，且沒有完整的栽培種植技術支持。建立白前快速繁殖體系與優良的栽培方式對一步建立白前的工廠化繁育，并實現對白前栽培與生理生化研究奠定基礎。
技術實現思路
1、本專利技術的目的是提供一種白前組培成苗與栽培的方法與應用，具有繁殖快且不受季節的限制，實施步驟簡單易行，效果非常顯著的優勢。
2、為了實現上述目的，本專利技術的技術方案為：
3、一方面，本專利技術提供一種白前組培成苗與栽培的方法，包括以下步驟：
4、(1)將白前的外植體誘導出芽培養，得到白前芽；
5、(
6、(3)將白前苗水培栽種。
7、在一些其他實施方式中，步驟(1)中，所述白前為柳葉白前和/或芫花葉白前；
8、所述外植體為幼嫩莖段、不定芽、葉、葉柄或下胚軸；優選的，所述外植體為幼嫩莖段。
9、在一些其他實施方式中，所述誘導出芽培養采用的培養基為：在ms基本培養基中添加6-芐氨基腺嘌呤0.8-2.0mg/l、α-萘乙酸0.1-0.3mg/l、吲哚-3-乙酸0-0.5mg/l、蔗糖30-35g/l、瓊脂7-10g/l、ph5.0-6.0；
10、優選的，所述誘導出芽培養采用的培養基為：在ms基本培養基中添加6-芐氨基腺嘌呤0.5mg/l，α-萘乙酸0.1mg/l，蔗糖30g/l，瓊脂7g/l，ph5.8；
11、所述誘導出芽培養的條件為：培養溫度為25℃，16h光照/8h黑暗培養10-15d。
12、在一些其他實施方式中，所述白前芽為3-4cm，所述生根培養采用的培養基為1/2ms基本培養基中添加α-萘乙酸0.1-0.3mg/l、吲哚-3-乙酸0-0.1mg/l、蔗糖30-35g/l，瓊脂7-10g/l，ph5.0-6.0；
13、優選的，所述生根培養采用的培養基為1/2ms基本培養基中添加naa?0.1mg/l，蔗糖30g/l，瓊脂7g/l，ph5.8。
14、在一些其他實施方式中，所述生根培養的條件為：培養溫度為25℃，16h光照/8h黑暗培養10-15d。
15、在一些其他實施方式中，所述水培栽種采用的營養液為改良的霍格蘭營養液；
16、所述改良的霍格蘭營養液的組成為：硝酸鈣0.8-2.0g/l、硝酸鉀0.5-1.0g/l、硫酸鎂0.5-1.0g/l、磷酸二氫鉀0.25-5.0g/l、硫酸鐵0.05-0.1g/l、螯合鐵2.5-5.0mg/l、硼酸2.86-6.0mg/l、氯化錳1.81-4.0mg/l、硫酸鋅0.86?-2.0mg/l、硫酸銅0.08?-0.2mg/l、鉬酸鈉0.02-0.05mg/l，調整ph值至5.5-6.5。
17、在一些其他實施方式中，所述改良的霍格蘭營養液的組成為：硝酸鈣1.6g/l、硝酸鉀1.0g/l、硫酸鎂1.0g/l、磷酸二氫鉀5.0g/l、硫酸鐵0.1g/l、螯合鐵5.0mg/l、硼酸5.72mg/l、氯化錳3.62mg/l、硫酸鋅1.72mg/l、硫酸銅0.16mg/l、鉬酸鈉0.04mg/l，調整ph值至5.5-6.5；
18、或，所述水培栽種的條件為10-60d，每隔3-5d進行通風。
19、在一些其他實施方式中，還包括在外植體誘導出芽培養前，對外植體進行消毒處理，所述消毒處理為先用70-75vol％乙醇消毒30-60s，再用2.0?-3.0wt％naclo消毒5-20min；
20、優選的，所述消毒處理為先用75vol％乙醇消毒60s，再用2.5wt％naclo消毒15-20min。
21、另一方面，本專利技術提供一種第一方面所述的白前組培成苗與栽培的方法在白前離體快繁中的應用。
22、本專利技術的有益效果：
23、本專利技術采用兩種白前均可以獲得100％誘導獲得白前潛伏芽獲得再生植株，成功建立高效穩定的組培體系，并將組培育種周期縮短至40d，為白前優良種苗產業化生產創造了有利條件。同時通過水培培養將組培苗進行繁育，生長迅速、葉片濃綠、根系發達。本方法繁殖快且不受季節的限制，實施步驟簡單易行，效果非常顯著。
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1.一種白前組培成苗與栽培的方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的白前組培成苗與栽培的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述白前為柳葉白前和/或芫花葉白前；
3.根據權利要求1所述的白前組培成苗與栽培的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述誘導出芽培養采用的培養基為：在MS基本培養基中添加6-芐氨基腺嘌呤0.8-2.0mg/L、α-萘乙酸0.1-0.3mg/L、吲哚-3-乙酸0-0.5mg/L、蔗糖30-35g/L、瓊脂7-10g/L、pH5.0-6.0；
4.根據權利要求1所述的白前組培成苗與栽培的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述白前芽為3-4cm，所述生根培養采用的培養基為1/2MS基本培養基中添加α-萘乙酸0.1-0.3mg/L、吲哚-3-乙酸0-0.1mg/L、蔗糖30-35g/L，瓊脂7-10g/L，pH5.0-6.0；
5.根據權利要求1所述的白前組培成苗與栽培的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述生根培養的條件為：培養溫度為25℃，16h光照/8h黑暗培養10-15d。
6.根據權利要求
7.根據權利要求6所述的白前組培成苗與栽培的方法，其特征在于，步驟(3)中，所述改良的霍格蘭營養液的組成為：硝酸鈣1.6g/L、硝酸鉀1.0g/L、硫酸鎂1.0g/L、磷酸二氫鉀5.0g/L、硫酸鐵0.1g/L、螯合鐵5.0mg/L、硼酸5.72mg/L、氯化錳3.62mg/L、硫酸鋅1.72mg/L、硫酸銅0.16mg/L、鉬酸鈉0.04mg/L，調整pH值至5.5-6.5；
8.根據權利要求1所述的白前組培成苗與栽培的方法，其特征在于，步驟(1)中，還包括在外植體誘導出芽培養前，對外植體進行消毒處理，所述消毒處理為先用70-75vol％乙醇消毒30-60s，再用2.0-3.0wt％NaClO消毒5-20min。
9.根據權利要求8所述的白前組培成苗與栽培的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述消毒處理為先用75vol％乙醇消毒60s，再用2.5wt％NaClO消毒15-20min。
10.一種權利要求1-9任一項所述的白前組培成苗與栽培的方法在白前離體快繁中的應用。
...【技術特征摘要】
1.一種白前組培成苗與栽培的方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的白前組培成苗與栽培的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述白前為柳葉白前和/或芫花葉白前；
3.根據權利要求1所述的白前組培成苗與栽培的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述誘導出芽培養采用的培養基為：在ms基本培養基中添加6-芐氨基腺嘌呤0.8-2.0mg/l、α-萘乙酸0.1-0.3mg/l、吲哚-3-乙酸0-0.5mg/l、蔗糖30-35g/l、瓊脂7-10g/l、ph5.0-6.0；
4.根據權利要求1所述的白前組培成苗與栽培的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述白前芽為3-4cm，所述生根培養采用的培養基為1/2ms基本培養基中添加α-萘乙酸0.1-0.3mg/l、吲哚-3-乙酸0-0.1mg/l、蔗糖30-35g/l，瓊脂7-10g/l，ph5.0-6.0；
5.根據權利要求1所述的白前組培成苗與栽培的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述生根培養的條件為：培養溫度為25℃，16h光照/8h黑暗培養10-15d。
6.根據權利要求1所述的白前組培成苗與...
【專利技術屬性】
技術研發人員：劉大會，張婧怡，苗玉煥，黃必勝，方艷，
申請(專利權)人：湖北中醫藥大學，
類型：發明
國別省市：
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