【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于生物學檢測，具體涉及一種小反芻獸疫病毒特異性單克隆抗體及其應用。
技術介紹
1、小反芻獸疫病毒(peste-des-petits-ruminants?virus，pprv)屬于副黏膜病毒科，麻疹病毒屬的rna病毒。小反芻獸疫病毒的基因組全長約16kb，共編碼6種結構蛋白和2種非結構蛋白。結構蛋白包括n蛋白、m蛋白、h蛋白、f蛋白、p蛋白、l蛋白。非結構蛋白包括c蛋白和v蛋白。其中n蛋白是小反芻獸疫病毒的核衣殼蛋白，核苷酸長度為1674bp，由525個氨基酸組成，分子量大小為128kda。小反芻獸疫病毒只有一個血清型，分為4個基因群，分為i、ii、iii和iv基因群。而中國的毒株大多屬于iv基因群。n蛋白與國內流行株的同源性大約在95％左右，且n蛋白免疫原性較高，保守性較好，常作為血清學診斷、疫苗研發、抗病毒藥物設計的靶蛋白。
2、小反芻獸疫病毒的易感動物為綿羊和山羊，有報道稱，水牛、駱駝、羚羊等反芻動物都會被感染。目前，尚無人感染小反芻獸疫的報道。小反芻獸疫主要呼吸系統進行傳播。小反芻獸疫的發病率和死亡率很高，會給當地造成嚴重的經濟損失。
3、我國是養羊大國，2005年以來年均飼養量超過5.5億，超過全球年飼養量的20％，因此，開展常態化監控事關畜牧養殖業的持續健康發展，事關農牧民增收，對促進養羊業發展意義重大，但目前該病的檢測手段較為單一、檢出率不高，因此，一種小反芻獸疫病毒特異性單克隆抗體及其應用亟待提出。
技術實現思路
1、為解決現有技術
2、為了解決上述技術問題，本專利技術提供了如下的技術方案：
3、本專利技術第一目的提供一種小反芻獸疫病毒特異性單克隆抗體，所述單克隆抗體由小反芻獸疫病毒n蛋白篩選得到，所述小反芻獸疫病毒n蛋白的氨基酸序列如seq?id?no:1所示，所述小反芻獸疫病毒n蛋白由小反芻獸疫病毒n基因轉錄得到，密碼子優化后的小反芻獸疫病毒n基因核酸序列如seq?id?no:2所示。
4、優選的，所述單克隆抗體含有重鏈可變區和輕鏈可變區，所述重鏈可變區和輕鏈可變區均由決定簇互補區和框架區組成；所述重鏈可變區和輕鏈可變區的決定簇互補區均由cdr1、cdr2和cdr3組成；
5、所述輕鏈可變區的cdr1的氨基酸序列如seq?id?no.3的第27-37位所示；
6、所述輕鏈可變區的cdr2的氨基酸序列如seq?id?no.3的第55-57位所示；
7、所述輕鏈可變區的cdr3的氨基酸序列如seq?id?no.3的第94-102位所示；
8、所述重鏈可變區的cdr1的氨基酸序列如seq?id?no.4的第26-33位所示；
9、所述重鏈可變區的cdr2的氨基酸序列如seq?id?no.4的第51-58位所示；
10、所述重鏈可變區的cdr3的氨基酸序列如seq?id?no.4的第97-108位所示。
11、優選的，所述輕鏈可變區的氨基酸序列如seq?id?no.3所示，所述重鏈可變區的氨基酸序列如seq?id?no.4所示。
12、優選的，所述單克隆抗體含有重鏈可變區和輕鏈可變區，所述重鏈可變區和輕鏈可變區均由決定簇互補區和框架區組成；所述重鏈可變區和輕鏈可變區的決定簇互補區均由cdr1、cdr2和cdr3組成；
13、所述輕鏈可變區的cdr1的氨基酸序列如seq?id?no.5的第27-31位所示；
14、所述輕鏈可變區的cdr2的氨基酸序列如seq?id?no.5的第49-51位所示；
15、所述輕鏈可變區的cdr3的氨基酸序列如seq?id?no.5的第88-96位所示；
16、所述重鏈可變區的cdr1的氨基酸序列如seq?id?no.6的第26-33位所示；
17、所述重鏈可變區的cdr2的氨基酸序列如seq?id?no.6的第51-57位所示；
18、所述重鏈可變區的cdr3的氨基酸序列如seq?id?no.6的第96-110位所示。
19、優選的，所述輕鏈可變區的氨基酸序列如seq?id?no.5所示，所述重鏈可變區的氨基酸序列如seq?id?no.6所示。
20、本專利技術第二目的提供一種含有小反芻獸疫病毒特異性單克隆抗體的化學發光檢測試劑盒。
21、優選的，所述試劑盒中包含有偶聯有所述單克隆抗體的免疫磁珠、小反芻獸疫病毒n蛋白校準品質控品、堿性磷酸酶標記的所述單克隆抗體、化學發光底物
22、本專利技術相較于現有技術，具有以下有益效果：
23、本專利技術所提供的單克隆抗體能夠與小反芻獸疫病毒n蛋白特異性結合，效價高，親和力好，同時基于該抗體對制備的檢測試劑盒可以有效的開展小反芻獸疫病毒檢測，可以為小反芻獸疫病毒感染的流行病學監測和診斷提供技術支持。
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1.一種小反芻獸疫病毒特異性單克隆抗體，其特征在于，所述單克隆抗體由小反芻獸疫病毒N蛋白篩選得到，所述小反芻獸疫病毒N蛋白的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1所示，所述小反芻獸疫病毒N蛋白由小反芻獸疫病毒N基因轉錄得到，密碼子優化后的小反芻獸疫病毒N基因核酸序列如SEQ?ID?NO:2所示。
2.根據權利要求1所述的小反芻獸疫病毒特異性單克隆抗體，其特征在于，所述單克隆抗體含有重鏈可變區和輕鏈可變區，所述重鏈可變區和輕鏈可變區均由決定簇互補區和框架區組成；所述重鏈可變區和輕鏈可變區的決定簇互補區均由CDR1、CDR2和CDR3組成；
3.根據權利要求2所述的小反芻獸疫病毒特異性單克隆抗體，其特征在于，所述輕鏈可變區的氨基酸序列如SEQ?ID?No.3所示，所述重鏈可變區的氨基酸序列如SEQ?ID?No.4所示。
4.根據權利要求1所述的小反芻獸疫病毒特異性單克隆抗體，其特征在于，所述單克隆抗體含有重鏈可變區和輕鏈可變區，所述重鏈可變區和輕鏈可變區均由決定簇互補區和框架區組成；所述重鏈可變區和輕鏈可變區的決定簇互補區均由CDR1、CDR2和CDR
5.根據權利要求4所述的小反芻獸疫病毒特異性單克隆抗體，其特征在于，所述輕鏈可變區的氨基酸序列如SEQ?ID?No.5所示，所述重鏈可變區的氨基酸序列如SEQ?ID?No.6所示。
6.一種含有如權利要求1-5任一所述的小反芻獸疫病毒特異性單克隆抗體的化學發光檢測試劑盒。
7.根據權利要求6所述的化學發光檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中包含有偶聯有如權利要求2或3所述單克隆抗體的免疫磁珠、小反芻獸疫病毒N蛋白校準品質控品、堿性磷酸酶標記的如權利要求4或5所述單克隆抗體、化學發光底物。
...【技術特征摘要】
1.一種小反芻獸疫病毒特異性單克隆抗體，其特征在于，所述單克隆抗體由小反芻獸疫病毒n蛋白篩選得到，所述小反芻獸疫病毒n蛋白的氨基酸序列如seq?id?no:1所示，所述小反芻獸疫病毒n蛋白由小反芻獸疫病毒n基因轉錄得到，密碼子優化后的小反芻獸疫病毒n基因核酸序列如seq?id?no:2所示。
2.根據權利要求1所述的小反芻獸疫病毒特異性單克隆抗體，其特征在于，所述單克隆抗體含有重鏈可變區和輕鏈可變區，所述重鏈可變區和輕鏈可變區均由決定簇互補區和框架區組成；所述重鏈可變區和輕鏈可變區的決定簇互補區均由cdr1、cdr2和cdr3組成；
3.根據權利要求2所述的小反芻獸疫病毒特異性單克隆抗體，其特征在于，所述輕鏈可變區的氨基酸序列如seq?id?no.3所示，所述重鏈可變區的氨基酸序列如seq?id?no.4所示。
4.根據...
【專利技術屬性】
技術研發人員：孫英杰，丁鏟，屈陽，劉彥峰，譚磊，廖瑛，仇旭升，宋翠萍，劉忠媛，
申請(專利權)人：中國農業科學院上海獸醫研究所中國動物衛生與流行病學中心上海分中心，
類型：發明
國別省市：
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