【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及微生物，具體涉及假單胞菌的溶藻菌粉制備方法及應用。
技術介紹
1、近年來，隨著水體富營養化、全球氣候變暖等現象加劇，有害水華的暴發的規模和頻次呈逐年增加趨勢，這類生態異常現象，不僅破壞河湖生態系統平衡，還對周邊居民身心健康產生威脅。銅綠微囊藻是形成有害水華的主要物種之一，在眾多湖泊均有該物種的分布，該物種之所以引起高度關注，主要因為其水華發生時釋放的微囊藻毒素會造成魚類等生物大面積死亡，當人們接觸到含微囊藻毒素的水體時，就可能引起中毒，出現頭痛、惡心、嘔吐等癥狀。因此，開展銅綠微囊藻的水華防控相關工作尤為重要。
2、溶藻菌是一類能夠抑制水體中藻類生長的細菌。它們通過競爭性生長或者產生抑制藻類生長的代謝產物來幫助減少水體中的藻類數量。溶藻菌被廣泛應用于水體生態環境治理中，特別是在湖泊、蓄水池和其他人工水體中，以改善水質和生態平衡。這些細菌可以有效地控制藻類水華的暴發，由此減少藻類所帶來的水質問題，是一種環保和可持續的水體管理方法。。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供假單胞菌的溶藻菌粉制備方法及應用，對菌株進行優化培養和發酵培養，將發酵產物進行菌粉研制，用于銅綠微囊藻的水華現象控制。
2、本專利技術的目的可以通過以下技術方案實現：
3、假單胞菌的溶藻菌粉制備方法，包括如下步驟：將假單胞菌hb01菌液與載體混合均勻、干燥，得到菌粉；
4、所述假單胞菌hb01菌液包括假單胞菌(pseudomonasprotegens)
5、假單胞菌(pseudomonas?protegens)hb01于2024年08月23日保藏于位于中國武漢市武漢大學的中國典型培養物保藏中心(cctcc)，保藏編號cctcc?no:m20241836。
6、作為本專利技術的進一步方案：載體為鋸末和泥炭混合得到。
7、作為本專利技術的進一步方案：假單胞菌hb01菌液中菌種數量為0.1×1010cfu/ml-2×1010cfu/ml。
8、作為本專利技術的進一步方案：鋸末和泥炭的質量比為4:1。
9、作為本專利技術的進一步方案：假單胞菌hb01菌液與載體的質量比為5:1。
10、作為本專利技術的進一步方案：假單胞菌(pseudomonasprotegens)hb01的分離方法包括如下步驟：
11、s1：將環境樣品和生理鹽水混合后靜置取上清液，取生理鹽水將上清液進行10倍稀釋形成濃度梯度，分別取每一濃度的水樣涂布在lb固體培養基上，將涂布平板倒置于恒溫培養箱中培養，得到菌落；
12、s2：菌落進行劃線分離提純2次或2次以上，得到純化菌株；
13、s3：擴大培養：將純化菌株接種至無菌的lb液體培養基中培養。
14、作為本專利技術的進一步方案：假單胞菌(pseudomonasprotegens)hb01的發酵物的制備方法包括如下步驟：將假單胞菌(pseudomonas?protegens)hb01按1-10％接種到經過滅菌后冷卻到30-40℃的lb液體培養基中，在30-37℃條件下發酵；將發酵后的發酵料烘干、粉碎，得到發酵物。
15、作為本專利技術的進一步方案：lb固體培養基的配方為：10.0g胰蛋白胨、5.0g酵母粉、10.0g氯化鈉、15.0g瓊脂、1000ml純凈水，lb固體培養基的ph＝7.1±0.2。
16、作為本專利技術的進一步方案：lb液體培養基的配方為：10.0g胰蛋白胨、5.0g酵母粉、10.0g氯化鈉、1000ml純凈水。
17、上述任一項假單胞菌的溶藻菌粉制備方法制得的溶藻菌粉應用在藻類水華治理。
18、作為本專利技術的進一步方案：藻類為微囊藻、魚腥藻、擬柱孢藻、尖頭藻、微小平裂藻和聚球藻中的一種或多種組合。
19、作為本專利技術的進一步方案：藻類為銅綠微囊藻。
20、作為本專利技術的進一步方案：溶藻菌粉用于水華治理的投加量為每立方水中投加0.1-1kg菌粉。
21、本專利技術的有益效果：
22、本專利技術公開了一株具有高效溶藻能力的假單胞菌hb01，并利用含有這種假單胞菌hb01或其發酵物的菌液對銅綠微囊藻水華進行處理，用于控制銅綠微囊藻引起的藍藻水華現象。假單胞菌hb01來源于藍藻水華環境下的底泥，假單胞菌hb01菌液具有很好的溶藻活性，應用于湖泊藍藻水華的治理，具有該環境良好兼容性，不會造成殘留污染，屬于生態環保藥劑，本專利技術獲得的假單胞菌hb01對銅綠微囊藻的溶藻效果很好，72小時內的去除率可達到85％以上，對于其他常見的水華藻類也具有很好的表現，其發酵液可以用于新型除藻劑的研發和生產，最終應用于藍藻水華的控制。
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1.假單胞菌的溶藻菌粉制備方法，其特征在于，包括如下步驟：將假單胞菌HB01菌液與載體混合均勻、干燥，得到菌粉；
2.根據權利要求1所述的假單胞菌的溶藻菌粉制備方法,其特征在于，所述載體為鋸末和泥炭混合得到。
3.根據權利要求1所述的假單胞菌的溶藻菌粉制備方法,其特征在于，所述假單胞菌HB01菌液中菌種數量為0.1×1010cfu/mL-2×1010cfu/mL。
4.根據權利要求1所述的假單胞菌的溶藻菌粉制備方法,其特征在于，所述假單胞菌(Pseudomonas?protegens)HB01的分離方法包括如下步驟：
5.根據權利要求1所述的假單胞菌的溶藻菌粉制備方法,其特征在于，所述假單胞菌(Pseudomonas?protegens)HB01的發酵物的制備方法包括如下步驟：將假單胞菌(Pseudomonasprotegens)HB01按1-10％接種到經過滅菌后冷卻到30-40℃的LB液體培養基中，在30-37℃條件下發酵；將發酵后的發酵料烘干、粉碎，得到發酵物。
6.根據權利要求4所述的假單胞菌的溶藻菌粉制備方法,
7.根據權利要求4-5中任一項所述的假單胞菌的溶藻菌粉制備方法,其特征在于，所述LB液體培養基的配方為：10.0g胰蛋白胨、5.0g酵母粉、10.0g氯化鈉、1000mL純凈水。
8.根據權利要求1-6中任一項所述的假單胞菌的溶藻菌粉制備方法制得的溶藻菌粉應用在藻類水華治理中。
9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，所述藻類為銅綠微囊藻。
10.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，所述溶藻菌粉用于水華治理的投加量為每立方水中投加0.1-1kg菌粉。
...【技術特征摘要】
1.假單胞菌的溶藻菌粉制備方法，其特征在于，包括如下步驟：將假單胞菌hb01菌液與載體混合均勻、干燥，得到菌粉；
2.根據權利要求1所述的假單胞菌的溶藻菌粉制備方法,其特征在于，所述載體為鋸末和泥炭混合得到。
3.根據權利要求1所述的假單胞菌的溶藻菌粉制備方法,其特征在于，所述假單胞菌hb01菌液中菌種數量為0.1×1010cfu/ml-2×1010cfu/ml。
4.根據權利要求1所述的假單胞菌的溶藻菌粉制備方法,其特征在于，所述假單胞菌(pseudomonas?protegens)hb01的分離方法包括如下步驟：
5.根據權利要求1所述的假單胞菌的溶藻菌粉制備方法,其特征在于，所述假單胞菌(pseudomonas?protegens)hb01的發酵物的制備方法包括如下步驟：將假單胞菌(pseudomonasprotegens)hb01按1-10％接種到經過滅菌后冷卻到30-...
【專利技術屬性】
技術研發人員：黃孟斌，張瀚文，魏偉，賈慧然，陳琴，李思琪，程行，
申請(專利權)人：武漢市漢陽市政建設集團有限公司，
類型：發明
國別省市：
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