【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及細胞檢測，特別是涉及一種用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料及其制備方法和應用。
技術介紹
1、自身免疫性腦炎是一類由自身免疫反應引起的中樞神經系統炎性疾病，其中抗體介導的自身免疫性腦炎是最常見的類型。近年來，研究發現多種自身抗體(如抗nmdar、gababr、ampar1、ampar2、caspr2、iglon5、lgi1、dppx抗體)與不同類型的自身免疫性腦炎密切相關。因此，快速、準確地檢測這些抗體對于疾病的早期診斷、治療方案的制定以及預后評估具有重要的臨床意義。
2、目前，臨床上常用的抗體檢測方法包括酶聯免疫吸附試驗(elisa)、免疫印跡(western?blotting)、免疫熒光(if)等。這些檢測方法存在一些局限性，如靈敏度和特異性不高、操作步驟繁瑣、耗時長、需要特定設備等。此外，這些檢測方法往往只能檢測一種或幾種抗體，難以同時檢測多種自身免疫性腦炎相關抗體，從而限制了其在臨床診斷中的應用。
3、現有的抗體檢測方法中，抗原蛋白通常被固定在玻片或微孔板等固體表面上。然而，這種固定方式常常會導致抗原蛋白的結構改變或部分丟失其天然活性，從而影響抗體與其結合的效率，導致檢測靈敏度下降。此外，常用的固體表面材料(如玻璃、塑料等)對細胞和蛋白質的吸附性較差，難以保持抗原蛋白的穩定性和活性。
4、羥基磷灰石是一種常用于生物材料和檢測平臺的無機物，因其良好的生物相容性和能夠與多種生物分子(如蛋白質、核酸等)結合的特性，廣泛應用于醫學診斷。然而，未經改性的羥基磷灰石表面親水性較低，容易
5、現有檢測方法通常采用單一抗原靶標設計，無法同時檢測多種與自身免疫性腦炎相關的抗體。多重檢測需要不同抗原的空間分布和識別，傳統方法難以實現對多種抗原蛋白的有效共存和充分暴露，導致多重抗體檢測的靈敏度和準確性受限。
技術實現思路
1、基于此，本技術方案旨在提供一種改進的自身免疫性腦炎抗體檢測材料和方法，以提高檢測的靈敏度和特異性，并實現對多種相關抗體的同時檢測。通過使用改性羥基磷灰石(氨基化的羥基磷灰石)，增強抗原蛋白與檢測板的結合力，從而提高細胞和蛋白質在檢測板上的吸附穩定性，保持抗原蛋白的天然結構和活性，增強抗體檢測的靈敏度。通過對羥基磷灰石進行氨基化修飾，提高其表面親水性，使其更容易與抗原蛋白結合，從而提升檢測材料的穩定性和一致性，確保檢測過程中的重復性和可靠性。同時，通過在單個檢測板上同時點樣多種自身免疫性腦炎相關抗原蛋白(nmdar、gababr、ampar1、ampar2、caspr2、iglon5、lgi1、dppx)，結合高效熒光二抗標記技術，使得在一次檢測過程中能夠同時識別和定量多種自身免疫性腦炎抗體，提高檢測效率，降低成本，適用于大規模臨床檢測需求。
2、本專利技術的一個目的在于，提供一種用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料，所述用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料包括如下的組分：自身免疫性腦炎抗體檢測板、工作液、pbs、熒光二抗、封片劑；
3、其中，所述自身免疫性腦炎抗體檢測板為含有nmdar,gababr,ampar1,ampar2,caspr2,iglon5,lgi1,dppx抗原蛋白的hela細胞與改性羥基磷灰石混合后點樣到載玻片上；
4、所述改性羥基磷灰石為氨基化的羥基磷灰石。
5、進一步地，還包括陽性對照和陰性對照。
6、進一步地，所述工作液為山羊血清的pbs緩沖液。
7、進一步地，所述熒光二抗為帶異硫氰酸熒光素。
8、進一步地，所述封片劑為甘油。
9、進一步地，所述陰性對照為8-12wt％的山羊血清。
10、進一步地，所述陽性對照為含有nmdar,gababr,ampar1,ampar2,caspr2,iglon5,lgi1,dppx蛋白的重組抗原。
11、具體地，自身免疫性腦炎與針對神經元細胞表面或突觸蛋白的抗體有關，近年來，以血清和腦脊液中抗原特異性抗體的存在為特征的慢性炎癥性腦疾病譜已顯著擴大。由于自身免疫性腦炎和感染性腦炎的臨床、影像學和實驗室表現有許多相似之處，因此其臨床診斷存在一定的困難。已報道神經抗原如nmdar，gababr，ampar1，ampar2，caspr2，iglon5，lgi1，dppx的自身抗體陽性高度提示自身免疫性腦炎疾病的存在。本產品綜合檢測nmdar,gababr,ampar1,ampar2,caspr2,iglon5,lgi1和dppx自身抗體，有助于邊緣性腦炎及不明原因導致的腦炎疾病輔助診斷，為臨床自身免疫性腦炎以及與其他疾病的鑒別診斷提供依據。
12、本專利技術還提供所述用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料的制備方法，包括如下步驟：
13、s1.將羥基磷灰石納米顆粒加入溶劑中，再加入水解偶聯劑溶液，攪拌均勻，加熱反應，得到改性羥基磷灰石；
14、s2.將含有nmdar,gababr,ampar1,ampar2,caspr2,iglon5,lgi1,dppx蛋白的hela細胞與改性羥基磷灰石分散液混合后，點樣到載玻片上，切割后形成所述檢測條，得到所述用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料。
15、進一步地，步驟s1中，所述加熱的溫度為50-65℃。
16、本專利技術還提供一種試劑盒，包括所述用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料。
17、本專利技術具有以下有益效果：
18、本專利技術通過使用改性羥基磷灰石(氨基化的羥基磷灰石)，顯著增強了抗原蛋白與檢測板之間的結合力，提高了細胞和蛋白質在檢測板上的吸附穩定性。這種增強的吸附能力有助于保持抗原蛋白的天然構象和活性，從而提高了抗體檢測的靈敏度和特異性。氨基化的羥基磷灰石具有更高的親水性，使其表面更容易與抗原蛋白結合。這種親水性的提升增強了檢測材料的穩定性和一致性，有助于提高檢測結果的重復性和可靠性，確保在不同檢測條件下均能獲得一致的結果。在單個檢測板上同時點樣多種自身免疫性腦炎相關抗原蛋白(如nmdar、gababr、ampar1、ampar2、caspr2、iglon5、lgi1、dppx)，結合熒光二抗標記技術，實現了對多種相關抗體的同時檢測。這樣能夠顯著提高檢測效率，降低單次檢測的成本，并滿足臨床上對多重抗體檢測的需求，有助于對自身免疫性腦炎的早期診斷和精確分型。通過改性羥基磷灰石的應用和多重抗原共存的設計，解決了傳統檢測方法中抗原蛋白結構改變、檢測靈敏度和多重抗體同時檢測困難等問題，從而提供了一種操作簡便、靈敏度高且特異性強的多重抗體檢測平臺。該方案能夠在復雜的臨床環境下快速、準確地檢測多種自身免疫性腦炎抗體，為疾病的診斷和治療提供了可靠的依據。
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1.一種用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料，其特征在于，所述用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料包括如下的組分：自身免疫性腦炎抗體檢測板、工作液、PBS、熒光二抗、封片劑；
2.根據權利要求1所述用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料，其特征在于，還包括陽性對照和陰性對照。
3.根據權利要求1所述用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料，其特征在于，所述工作液為山羊血清的PBS緩沖液。
4.根據權利要求1所述用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料，其特征在于，所述熒光二抗為帶異硫氰酸熒光素。
5.根據權利要求1所述用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料，其特征在于，所述封片劑為甘油。
6.根據權利要求2所述用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料，其特征在于，所述陰性對照為8-12wt％的山羊血清。
7.根據權利要求2所述用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料，其特征在于，所述陽性對照為含有NMDAR,GABABR,AMPAR1,AMPAR2,CASPR2,IgLON5,LGI1,DPPX蛋白的重組抗原。
8.權利要求1-7任意一項所述用于檢
9.根據權利要求8所述用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料的制備方法，其特征在于，步驟S1中，所述加熱的溫度為50-65℃。
10.一種試劑盒，其特征在于，包括權利要求1-7任一項所述用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料。
...【技術特征摘要】
1.一種用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料，其特征在于，所述用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料包括如下的組分：自身免疫性腦炎抗體檢測板、工作液、pbs、熒光二抗、封片劑；
2.根據權利要求1所述用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料，其特征在于，還包括陽性對照和陰性對照。
3.根據權利要求1所述用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料，其特征在于，所述工作液為山羊血清的pbs緩沖液。
4.根據權利要求1所述用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料，其特征在于，所述熒光二抗為帶異硫氰酸熒光素。
5.根據權利要求1所述用于檢測自身免疫性腦炎抗體的材料，其特征在于，所述封片劑為甘油。
6.根據權利要求2所述用于檢測...
【專利技術屬性】
技術研發人員：卜慶元，王啟飛，張雪艷，黃芳，李碩，
申請(專利權)人：北京精益醫學檢驗實驗室有限公司，
類型：發明
國別省市：
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