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    一種用于間充質干細胞的凍存液制造技術

    技術編號:44123247 閱讀:10 留言:0更新日期:2025-01-24 22:43
    本發明專利技術涉及干細胞凍存技術領域,具體提供了一種用于間充質干細胞的凍存液;用于間充質干細胞的凍存液使用質量份數為17~28%的中藥提取物、質量份數為35%的海藻糖、質量份數為32%的乙二醇和補足余量的脂肪間充質干細胞培養基。本發明專利技術針對直接放入?196℃液氮的凍存方法;以胞外大分子海藻糖作非滲透性保護劑,以透膜小分子乙二醇作滲透性保護劑,通過滲透效應促進細胞脫水且穩定細胞膜的同時避免細胞內冰晶形成;進一步以中藥提取物配合,提高細胞活性、減輕低溫傷害和各保護劑對細胞可能的傷害。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術涉及干細胞凍存,尤其涉及一種用于間充質干細胞的凍存液


    技術介紹

    1、間充質干細胞是一類源自中胚層的多能干細胞,在人體多種組織中廣泛存在,這些獨特的細胞具有自我更新能力和多向分化潛能,能夠在特定條件下分化為多種組織細胞,如成骨細胞、軟骨細胞和脂肪細胞等。脂肪來源的間充質干細胞顯示出與傳統的骨髓間充質干細胞相似的生物學特性,但更容易獲取和擴增,且免疫原性低,因此脂肪間充質干細胞成為熱點應用方向。

    2、目前臨床使用的間充質干細胞大多都是經體外培養后凍存,之后再復蘇移植使用的,間充質干細胞的高效凍存是維持其移植時細胞活性的必要條件,常常利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,一般采用梯度式降溫,但過程繁瑣,還需要程序降溫儀等儀器,不利于間充質干細胞凍存技術的推廣;新型的玻璃化冷凍技術通過滲透性保護劑和非滲透性保護劑的協同作用實現了將間充質干細胞與凍存液混合后直接浸入液氮的簡便操作,然而針對其復蘇后細胞的活性還有較大改進空間。

    3、因此,提供一種復蘇后脂肪間充質干細胞的活性較高的細胞凍存液具有重要的現實意義。


    技術實現思路

    1、為了解決上述問題,本專利技術目的是提供一種用于間充質干細胞的凍存液。

    2、本專利技術提供了一種用于間充質干細胞的凍存液,所述用于間充質干細胞的凍存液由以下組分組成:

    3、質量份數為17~28%的中藥提取物、質量份數為35%的海藻糖、質量份數為32%的乙二醇和補足余量的脂肪間充質干細胞培養基;

    <p>4、所述中藥提取物的提取方法為:

    5、取質量分數為13~21%的淫羊藿、質量分數為11~18%的紅花、質量分數為8~16%的紅景天、質量分數為8~15%的丹參、質量分數為6~12%的黃連和補齊其余質量分數的純水,將淫羊藿、紅花、紅景天、丹參和黃連切碎過20目篩后按10kg/h的投料速度加入轉速6000r/min且出料細度設為200目的錘式粉碎機粉碎至出料得細物料,加入質量為所述細物料質量4倍的85%乙醇35℃浸沒24h后400目過濾得提取液;將所述提取液和所述純水于69℃下,真空度800mbar減壓蒸餾至無液體連續流出,收集剩余液0.22μm薄膜過濾得所述中藥提取物。

    6、進一步地,所述淫羊藿的質量分數為18%。

    7、進一步地,所述紅花的質量分數為15%。

    8、進一步地,所述紅景天的質量分數為13%。

    9、進一步地,所述丹參的質量分數為12%。

    10、進一步地,所述黃連的質量分數為9%。

    11、進一步地,所述中藥提取物的質量分數為23%。

    12、通過本專利技術能夠帶來如下有益效果:

    13、本專利技術針對直接放入-196℃液氮的凍存方法;以胞外大分子海藻糖作非滲透性保護劑,以透膜小分子乙二醇作滲透性保護劑,通過滲透效應促進細胞脫水且穩定細胞膜的同時避免細胞內冰晶形成;進一步以中藥提取物配合,提高細胞活性、減輕低溫傷害和各保護劑對細胞可能的傷害。

    14、淫羊藿促進細胞增殖,紅花保護細胞膜,紅景天改善細胞代謝,淫羊藿、紅花和紅景天配合,保護細胞活性,修復細胞損傷;丹參和黃連有抗氧化損傷、維持胞內環境穩定和抑制細胞凋亡作用,二者配合減輕低溫傷害和各保護劑對細胞可能的傷害;淫羊藿、紅花、紅景天、丹參和黃連配合,提高細胞活性、減輕低溫傷害和各保護劑對細胞可能的傷害。

    15、海藻糖、乙二醇和中藥提取物配合,形成本專利技術特有的防凍-保護體系,有效防止冰晶形成,還能最大限度地保護細胞的完整性和功能,從而改善細胞活性。

    本文檔來自技高網
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    【技術保護點】

    1.一種用于間充質干細胞的凍存液,其特征在于,所述用于間充質干細胞的凍存液由以下組分組成:

    2.根據權利要求1所述的用于間充質干細胞的凍存液,其特征在于,所述淫羊藿的質量分數為18%。

    3.根據權利要求1所述的用于間充質干細胞的凍存液,其特征在于,所述紅花的質量分數為15%。

    4.根據權利要求1所述的用于間充質干細胞的凍存液,其特征在于,所述紅景天的質量分數為13%。

    5.根據權利要求1所述的用于間充質干細胞的凍存液,其特征在于,所述丹參的質量分數為12%。

    6.根據權利要求1所述的用于間充質干細胞的凍存液,其特征在于,所述黃連的質量分數為9%。

    7.根據權利要求1所述的用于間充質干細胞的凍存液,其特征在于,所述中藥提取物的質量分數為23%。

    【技術特征摘要】

    1.一種用于間充質干細胞的凍存液,其特征在于,所述用于間充質干細胞的凍存液由以下組分組成:

    2.根據權利要求1所述的用于間充質干細胞的凍存液,其特征在于,所述淫羊藿的質量分數為18%。

    3.根據權利要求1所述的用于間充質干細胞的凍存液,其特征在于,所述紅花的質量分數為15%。

    4.根據權利要求1所述的用于間充質干細胞的凍存液...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:祝天成袁丹丹胡曉倩華帥
    申請(專利權)人:麗山健康山東集團有限公司
    類型:發明
    國別省市:

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