【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于動物基因工程以及生物醫藥領域，具體涉及動物fcrn蛋白在控制豬繁殖與呼吸綜合征病毒感染性中的應用。
技術介紹
1、豬繁殖與呼吸綜合征(prrs)是由prrs病毒(prrsv)引起的以母豬繁殖障礙和所有年齡段豬呼吸困難為特征的高度接觸性傳染病(pejsak?et?al?1997)。該病自1980年代末在北美和歐洲暴發以來，給全球養豬業造成了巨大損失(neumann?et?al?2005，tian?et?al2007)。目前我國prrs流行現狀為：屬于prrsv-2的lineage?1prrsv(類nadc30、類nadc34)成為主流毒株，lineage?8、lineage?5、lineage?3prrsv共存(張洪亮2022)；prrsv-1在全國多地散發，但檢出率較低(譚菲菲等2022)。prrsv的變異性高，目前商品化的滅活苗和減毒活疫苗只能為感染lineage?1prrsv的豬提供部分保護(wei?et?al?2019，li?et?al?2022)，而針對類nadc30、類nadc34毒株的疫苗還尚未面世，同時我國尚未批準prrsv-1疫苗，我國prrs防控形勢復雜嚴峻。
2、國外研究團隊已培育出cd163?srcr5基因缺失的抗prrsv感染的基因編輯豬(whitworth?et?al?2016)并申請了專利(利利科等2019)。因此，尋找新的抗prrsv感染的宿主因子或受體具有重要科學意義和巨大的應用價值。
3、新生兒fc受體(fcrn)是igg的唯一轉運受體，由重鏈(fcgrt基
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供了動物fcrn蛋白在控制豬繁殖與呼吸綜合征病毒感染性中的應用。
2、為了達到上述目的，本專利技術采取以下技術措施：
3、本專利技術的保護范圍包括：
4、動物fcrn蛋白在控制豬繁殖與呼吸綜合征病毒感染性中的應用。
5、以上所述的應用，具體如下：
6、動物fcrn蛋白的阻斷劑或表達抑制劑在制備抗豬繁殖與呼吸綜合征病毒感染的藥物中的應用，所述的fcrn蛋白為新生兒fc受體蛋白。
7、以上所述的應用，優選的，所述的動物fcrn蛋白的阻斷劑包括：動物fcrn蛋白抗體或動物igg；
8、以上所述的應用，優選的，所述的動物igg包括豬igg、兔igg和/或小鼠igg。
9、以上所述的應用，優選的，所述的動物fcrn蛋白抗體為fcgrt和/或b2m抗體；
10、以上所述的應用，所述的動物fcrn蛋白表達抑制劑的抑制對象為動物fcrn蛋白的重鏈和/或輕鏈編碼基因的抑制劑。
11、以上所述的應用，所述的抑制劑為針對動物fcrn蛋白的重鏈和/或輕鏈編碼基因的grna、反義rna或小干擾rna。
12、以上所述的應用，優選的，所述的動物包括豬或綠猴。
13、以上所述的應用，優選的，所述的重鏈為豬的fcgrt基因，genbank登錄號為xm_021093554.1；輕鏈為豬的b2m基因，genbank登錄號為xr_002345118.1。
14、以上所述的應用，優選的，所述的重鏈為綠猴的fcgrt基因，genbank登錄號為xm_037991921.1；輕鏈為綠猴的b2m基因，genbank登錄號為xm_038009930.1。
15、以上所述的應用，優選的，針對豬的fcrn蛋白的重鏈編碼基因的抑制劑為shrna：為ggaacaagcagaagctctttc、gcgaggagtttatgaagttcg、ggtcgtcgctaac?agtcaaga和gcttcctactgctcttgatcg。
16、以上所述的應用，優選的，針對綠猴的fcrn蛋白的重鏈編碼基因的抑制劑為sgrna：cctgagctacgatagcctg和/或為輕鏈編碼基因sgrna：acccagacacatagcaatt?c。
17、一種制備抗豬繁殖與呼吸綜合征病毒感染細胞的方法，包括將細胞中的fcrn蛋白的重鏈和/或輕鏈編碼基因進行敲除或抑制。
18、一種制備豬繁殖與呼吸綜合征病毒易感細胞的方法，包括在細胞中過表達動物fcrn蛋白。
19、以上所述的方法制備的細胞用于制備豬繁殖與呼吸綜合征病毒易感細胞模型。
20、與現有技術相比，本專利技術具有以下優點：
21、本專利技術首先通過shrna特異性敲低fcgrt和過表達fcgrt實驗發現fcrn對prrs?v感染有正調控作用，再通過特異性抗fcrn?igg或正常igg阻斷fcrn實驗進一步發現阻斷fcrn抑制prrsv增殖，接著通過crispr/cas9基因編輯技術敲除和回補fcrn實驗證實fcrn是prrsv感染不可或缺的受體，隨后通過吸附、內化實驗及ifa確定fcrn參與prrsv脫衣殼，最后通過共聚焦和免疫沉淀實驗發現fcrn與prrsv的m、n蛋白在早期內體互作。本專利技術為研制有效防治prrs的藥物提供了新的靶標，也為抗prrs豬的育種研究提供了新候選基因。
本文檔來自技高網...【技術保護點】
1.動物FcRn蛋白的阻斷劑或表達抑制劑在制備抗豬繁殖與呼吸綜合征病毒感染的藥物中的應用，所述的FcRn蛋白為新生兒Fc受體蛋白。
2.根據權利要求1所述的應用，所述的動物FcRn蛋白的阻斷劑包括：動物FcRn蛋白抗體或動物IgG。
3.根據權利要求1所述的應用，所述的動物包括豬IgG、兔IgG和/或小鼠IgG。
4.根據權利要求1所述的應用，所述的動物FcRn蛋白表達抑制劑的抑制對象為動物FcRn蛋白的重鏈和/或輕鏈編碼基因的抑制劑。
5.根據權利要求1所述的應用，所述的抑制劑為針對動物FcRn蛋白的重鏈和/或輕鏈編碼基因的gRNA、反義RNA或小干擾RNA。
6.根據權利要求5所述的應用，所述的動物為豬或綠猴。
7.根據權利要求6所述的應用，當所述的動物為豬時，針對豬的FcRn蛋白的重鏈編碼基因的抑制劑為shRNA：為GGAACAAGCAGAAGCTCTTTC、GCGAGGAGTTTATGAAGTTCG、GGTCGTCGCTAACAGTCAAGA和GCTTCCTACTGCTCTTGATCG。
9.一種制備抗豬繁殖與呼吸綜合征病毒感染細胞的方法，包括將細胞中的FcRn蛋白的重鏈和/或輕鏈編碼基因進行敲除或抑制。
10.一種制備豬繁殖與呼吸綜合征病毒易感細胞的方法，包括在細胞中過表達動物FcRn蛋白。
...【技術特征摘要】
1.動物fcrn蛋白的阻斷劑或表達抑制劑在制備抗豬繁殖與呼吸綜合征病毒感染的藥物中的應用，所述的fcrn蛋白為新生兒fc受體蛋白。
2.根據權利要求1所述的應用，所述的動物fcrn蛋白的阻斷劑包括：動物fcrn蛋白抗體或動物igg。
3.根據權利要求1所述的應用，所述的動物包括豬igg、兔igg和/或小鼠igg。
4.根據權利要求1所述的應用，所述的動物fcrn蛋白表達抑制劑的抑制對象為動物fcrn蛋白的重鏈和/或輕鏈編碼基因的抑制劑。
5.根據權利要求1所述的應用，所述的抑制劑為針對動物fcrn蛋白的重鏈和/或輕鏈編碼基因的grna、反義rna或小干擾rna。
6.根據權利要求5所述的應用，所述的動物為豬或綠猴。
7.根據權利要求6所述的應用，...
【專利技術屬性】
技術研發人員：李自力，楊康，董家蕊，李建，周睿，賈相超，李家凱，
申請(專利權)人：華中農業大學，
類型：發明
國別省市：
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