【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及血紅蛋白測定，特別涉及一種多模式測定血紅蛋白洗脫液及其測定方法。
技術介紹
1、血紅蛋白類、其中作為血紅蛋白與葡萄糖結合而得到的糖化蛋白的糖化血紅蛋白(hba1c)反映過去1～2個月間的平均血糖水平，因此，廣泛用于包括糖尿病、代謝綜合征在內的生活習慣病的檢查和血糖管理等。因此，要求容易且高精度地測定hba1c等血紅蛋白類的方法。
2、現有技術中，作為hba1c的測定方法，有高效液相色譜(hplc)法、免疫法、酶法、電泳法等。其中，作為hba1c的標準測定法，在臨床檢查領域中多采用hplc法。作為使用hplc法來對血紅蛋白類進行分離、測定的方法，普遍的是使用陽離子基團色譜柱作為固定相，磷酸系、琥珀酸系緩沖液作為洗脫液來對試樣中的血紅蛋白類進行分析，通常能有效將血紅蛋白hba1a、hba1b、hbf、l－a1c、hba1c和hba0分離、測定。若分離、測定除上述以外的血紅蛋白類，例如hba2、hbe、hbd、hbs和hbc，則需要更換不同的色譜柱和洗脫液，使用過程和操作上非常耗時和不便捷，這不僅效率低下，也影響了測定的準確性和重復性，例如伯樂、愛科來等。
技術實現思路
1、針對現有技術存在的問題，本專利技術提供一種多模式測定血紅蛋白洗脫液及其測定方法，本專利技術無需更換色譜柱固定相、流動相前提下，實現一種洗脫液對多種血紅蛋白分離、測定模式。
2、為了實現上述目的，本專利技術提供一種多模式測定血紅蛋白洗脫液，所述洗脫液包括用于測定血紅蛋白的洗脫液a、
3、所述洗脫液a的原料包括檸檬酸一水合物0.08wt％－0.12wt％、檸檬酸三堿金屬鹽水合物0.40wt％－0.50wt％、高氯酸堿金屬鹽0.3wt％－0.5wt％和氫氧化鈉0.01wt％－0.04wt％；
4、所述洗脫液b的原料包括檸檬酸一水合物0.01wt％－0.08wt％、檸檬酸三堿金屬鹽水合物0.50wt％－0.60wt％、高氯酸堿金屬鹽1.0wt％－2.0wt％和氫氧化鈉0.02wt％－0.08wt％；
5、所述洗脫液c的原料包括檸檬酸一水合物0.001wt％－0.01wt％、檸檬酸三堿金屬鹽水合物0.50wt％－0.60wt％、高氯酸堿金屬鹽0.05wt％－0.15wt％和氫氧化鈉0.02wt％－0.08wt％；
6、所述洗脫液e由洗脫液a和洗脫液c混合而成，其重量比例為0.4－1.0；
7、所述洗脫液f由洗脫液b和洗脫液c混合而成，其重量比例為0.1至0.8；
8、所述洗脫液g由洗脫液c和洗脫液a混合而成，其重量比例為0.25至0.5。
9、優(yōu)選地，所述洗脫液a的滲透壓為100mosm-200mosm，ph值為5.0-6.0，電導率為8.2sm/cm-8.6sm/cm；
10、所述洗脫液b的滲透壓為500mosm-700mosm，ph值為6.0-7.0，電導率為25sm/cm-35sm/cm；
11、所述洗脫液c的滲透壓為10mosm-200mosm，ph值為6.0-7.0，電導率為3.0sm/cm至6.0sm/cm。
12、優(yōu)選地，所述血紅蛋白選自hba1a、hba1b、hbf、l－a1c、hba1c、hba0、hba2、hbe、hbd、hbs和hbc中的一種或多種。
13、本專利技術還提供一種使用所述多模式測定血紅蛋白洗脫液的測定方法，包括如下步驟：
14、步驟x1：根據需要測定的血紅蛋白類型，選擇相應的洗脫液或洗脫液組合、測定模式；
15、步驟x2：在高壓送液泵內輸入填充劑，并使用高壓送液泵將選定的洗脫液或洗脫液組合輸送至色譜柱中；
16、步驟x3：在色譜柱中分離測定血紅蛋白；
17、優(yōu)選地，所述填充劑為甲基丙烯酸酯共聚物，用于連接高壓送液泵與洗脫液，并對血紅蛋白進行分離測定；所述色譜柱為陽離子交換基團為磺基、羧基和磷酸基中的一種或多種。
18、優(yōu)選地，所述測定模式包括快速模式、快速變異模式、變異測定模式、地貧模式；
19、其中，快速模式用于對hba1a、hba1b、hbf、l－a1c、hba1c、hba0類血紅蛋白進行分離測定；
20、快速變異模式用于對hba1a、hba1b、hbf、l－a1c、hba1c、hba0類血紅蛋白和突變血紅蛋白類v－win進行分離測定，其中突變血紅蛋白類v－win為hbe、hbd、hbs和hbc的總稱；
21、變異模式用于對hba1a、hba1b、hbf、l－a1c、hba1c、hba0類血紅蛋白和hbe、hbd、hbs和hbc進行分離測定；
22、地貧模式用于對hba1a、hba1b、hbf、l－a1c、hba1c、hba0、hba2、hbe、hbd、hbs和hbc進行分離測定。
23、優(yōu)選地，在快速模式中的具備步驟為：
24、s1：使用高壓送液泵，將洗脫液a送至分離色譜柱中，流速為2.0ml/min，送液時間為25s；
25、s2：使用高壓送液泵，將洗脫液b送至分離色譜柱中，流速為2.0ml/min，送液時間為10s；
26、s3：使用高壓送液泵，將洗脫液g送至分離色譜柱中，通過高頻電磁閥進行持續(xù)切換混合送液，流速1.8ml/min，時間為20s。
27、優(yōu)選地，，在快速變異模式中的具體步驟為：
28、s4：使用高壓送液泵，將洗脫液a送至分離色譜柱中，流速為1.8ml/min，送液時間為30s；
29、s5：使用高壓送液泵，將洗脫液c送至分離色譜柱中，流速為1.8ml/min，送液時間為25s；
30、s6：使用高壓送液泵，將洗脫液b送至分離色譜柱中，流速為1.8ml/min，送液時間為15s；
31、s7：使用高壓送液泵，將洗脫液g送至分離色譜柱中，通過高頻電磁閥進行持續(xù)切換混合送液，流速1.8ml/min，時間為30s。
32、優(yōu)選地，在變異模式中的具體步驟為：
33、s8：使用高壓送液泵，將洗脫液a送至分離色譜柱中：，流速為1.8ml/min，送液時間為35s；
34、s9：使用高壓送液泵，將洗脫液c送至分離色譜柱中，流速為1.8ml/min，送液時間為45s；
35、s10：使用高壓送液泵，將洗脫液a送至分離色譜柱中，流速為1.8ml/min，送液時間為10s.
36、s11：使用高壓送液泵，將洗脫液c送至分離色譜柱中，流速為1.8ml/min，送液時間為10s；
37、s12：使用高壓送液泵，將洗脫液b送至分離色譜柱中，流速為1.8ml/min，送液時間為10s；
38、s13：使用高壓送液泵，將洗脫液g送至分離色譜柱中，通過高頻電磁閥進行持續(xù)切換混合送液，流速1.8ml/min，時間為30s。
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【技術保護點】
1.一種多模式測定血紅蛋白洗脫液，其特征在于，所述洗脫液包括用于測定血紅蛋白的洗脫液A、洗脫液B、洗脫液C、洗脫液E、洗脫液F、洗脫液G；
2.根據權利要求1所述的多模式測定血紅蛋白洗脫液，其特征在于，所述洗脫液A的滲透壓為100mOsm-200mOsm，pH值為5.0-6.0，電導率為8.2sm/cm-8.6sm/cm；
3.根據權利要求1所述的多模式測定血紅蛋白洗脫液，其特征在于，所述血紅蛋白選自HbA1a、HbA1b、HbF、L－A1c、HbA1c、HbA0、HbA2、HbE、HbD、HbS和HbC中的一種或多種。
4.一種使用如權利要求1至3任一項所述多模式測定血紅蛋白洗脫液的測定方法，其特征在于，包括如下步驟：
5.根據權利要求4所述的多模式測定血紅蛋白洗脫液的測定方法，其特征在于，所述填充劑為甲基丙烯酸酯共聚物，用于連接高壓送液泵與洗脫液，并對血紅蛋白進行分離測定；所述色譜柱為陽離子交換基團為磺基、羧基和磷酸基中的一種或多種。
6.根據權利要求4所述的多模式測定血紅蛋白洗脫液的測定方法，其特征在于，所述測定模
7.根據權利要求6所述的多模式測定血紅蛋白洗脫液的測定方法，其特征在于，在快速模式中的具備步驟為：
8.根據權利要求6所述的多模式測定血紅蛋白洗脫液的測定方法，其特征在于，在快速變異模式中的具體步驟為：
9.根據權利要求6所述的多模式測定血紅蛋白洗脫液的測定方法，其特征在于，在變異模式中的具體步驟為：
10.根據權利要求6所述的多模式測定血紅蛋白洗脫液的測定方法，其特征在于，在地貧模式中的具體步驟：
...【技術特征摘要】
1.一種多模式測定血紅蛋白洗脫液，其特征在于，所述洗脫液包括用于測定血紅蛋白的洗脫液a、洗脫液b、洗脫液c、洗脫液e、洗脫液f、洗脫液g；
2.根據權利要求1所述的多模式測定血紅蛋白洗脫液，其特征在于，所述洗脫液a的滲透壓為100mosm-200mosm，ph值為5.0-6.0，電導率為8.2sm/cm-8.6sm/cm；
3.根據權利要求1所述的多模式測定血紅蛋白洗脫液，其特征在于，所述血紅蛋白選自hba1a、hba1b、hbf、l－a1c、hba1c、hba0、hba2、hbe、hbd、hbs和hbc中的一種或多種。
4.一種使用如權利要求1至3任一項所述多模式測定血紅蛋白洗脫液的測定方法，其特征在于，包括如下步驟：
5.根據權利要求4所述的多模式測定血紅蛋白洗脫液的測定方法，其特征在于，...
【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：馮永林，楊志剛，張繼明，
申請(專利權)人：深圳市雷諾華科技實業(yè)有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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