【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于納米生物材料，涉及一種腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶和制備方法及應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、癌癥是危害全人類生命健康的三大殺手之一。目前，針對癌癥的主要治療手段包括手術(shù)治療、放療、化療、免疫治療和光動(dòng)力療法等，然而，這些治療方法因其固有的局限性難以滿足臨床需求。例如，手術(shù)治療對小尺寸和轉(zhuǎn)移性腫瘤的治療效果有限，放療和化療會對人體產(chǎn)生較強(qiáng)的毒副作用且易引起耐藥性，免疫療法由于免疫逃逸和造成免疫系統(tǒng)疾病等問題限制了其廣泛應(yīng)用，而基于納米材料的光動(dòng)力學(xué)（pdt）、聲動(dòng)力學(xué)（sdt）等新型療法存在光源穿透力有限及光敏劑或聲敏劑的潛在毒性問題。因此，亟需發(fā)展新型高效的腫瘤治療策略以進(jìn)一步提升腫瘤治療功效。
2、近期，銅死亡（cuprotosis）作為一種不同于任何已知的細(xì)胞死亡形式（如鐵死亡、凋亡、焦亡和壞死）的程序性細(xì)胞死亡機(jī)制在腫瘤治療領(lǐng)域引起廣泛關(guān)注。目前，已經(jīng)開發(fā)出基于銅離子螯合物、氧化銅納米顆粒、銅基金屬有機(jī)框架等多種誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生銅死亡的銅基納米材料。然而，由于遞送效率不足，腫瘤細(xì)胞內(nèi)有限的銅離子濃度往往難以達(dá)到誘導(dǎo)銅死亡的條件。同時(shí)，腫瘤細(xì)胞內(nèi)高表達(dá)的谷胱甘肽作為銅的內(nèi)源性螯合劑可能會降低銅死亡介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞殺傷效果。因此，設(shè)計(jì)構(gòu)建銅離子高效靶向運(yùn)輸載體的同時(shí)，實(shí)現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞內(nèi)高谷胱甘肽含量的調(diào)控對提升銅死亡治療功效至關(guān)重要。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、針對現(xiàn)有技術(shù)中銅死亡誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞死亡效率有限的問題，本專利技術(shù)的目的是提供一種腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)
2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本專利技術(shù)采用的技術(shù)方案為：
3、一種腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶的制備方法，包括以下步驟：
4、利用天然蛋白質(zhì)制備金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶；
5、通過酰胺化反應(yīng)將腫瘤靶向肽修飾于金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶表面，得到腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶。
6、本專利技術(shù)進(jìn)一步的改進(jìn)在于，天然蛋白質(zhì)為牛血清白蛋白；金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶通過以下過程制得：將含有氯金酸、硝酸銅和牛血清白蛋白的混合溶液的ph值調(diào)節(jié)為10-12，在加熱條件下進(jìn)行反應(yīng)，得到金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶。
7、本專利技術(shù)進(jìn)一步的改進(jìn)在于，含有氯金酸與硝酸銅和牛血清白蛋白的混合溶液中牛血清白蛋白的濃度為25?mg/ml，氯金酸與硝酸銅的摩爾比為1-8：1，牛血清白蛋白與硝酸銅的用量比為100?mg:0.0022-0.01?mmol。
8、本專利技術(shù)進(jìn)一步的改進(jìn)在于，反應(yīng)溫度為35-45?℃，反應(yīng)時(shí)間為10-14小時(shí)，反應(yīng)在1200?rpm轉(zhuǎn)速攪拌下進(jìn)行。
9、本專利技術(shù)進(jìn)一步的改進(jìn)在于，腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶通過以下過程制得：將1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳酰二亞胺加入到金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶中，攪拌均勻后避光反應(yīng)30分鐘，隨后加入腫瘤靶向肽，反應(yīng)6-12小時(shí)，得到腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶。
10、本專利技術(shù)進(jìn)一步的改進(jìn)在于，腫瘤靶向肽的序列如seq?id?no.1所示。
11、本專利技術(shù)進(jìn)一步的改進(jìn)在于，金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶與1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳酰二亞胺的質(zhì)量比為25：8-16。
12、本專利技術(shù)進(jìn)一步的改進(jìn)在于，金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶與腫瘤靶向肽的質(zhì)量比為100：1-4。
13、一種腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶。
14、一種腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶在制備用于抗腫瘤的化學(xué)動(dòng)力治療制劑和/或用于催化治療制劑中的應(yīng)用。
15、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)的有益效果是：
16、本專利技術(shù)中利用富含多種官能團(tuán)且具有高生物相容性的天然蛋白質(zhì)牛血清白蛋白（bsa）為配體合成兼具高生物相容性、高穩(wěn)定性和高催化活性的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶（bac）。然后通過酰胺化反應(yīng)將腫瘤靶向肽修飾于金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶（rbac）的表面。該納米酶富含大量銅元素且具有超小的尺寸，在腫瘤靶向肽的作用下能夠?qū)崿F(xiàn)銅元素在腫瘤細(xì)胞內(nèi)的特異性高濃度蓄積進(jìn)而誘導(dǎo)銅死亡的發(fā)生。同時(shí)，該納米酶借助金和銅兩種元素的協(xié)同作用在納米團(tuán)簇的表面構(gòu)建了豐富的催化活性位點(diǎn)，展現(xiàn)出類谷胱甘肽氧化物酶、過氧化物酶、氧化物酶的多酶活性，可通過催化耗竭谷胱甘肽、產(chǎn)生羥基自由基等氧化還原微環(huán)境調(diào)控機(jī)制協(xié)同增強(qiáng)銅死亡功效。本專利技術(shù)中腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶的制備方法簡單，反應(yīng)條件溫和，可重復(fù)性好。通過本專利技術(shù)合成的金銅雙金屬納米團(tuán)簇新型納米酶相比于現(xiàn)有銅死亡納米制劑具有協(xié)同治療的多生物學(xué)性能，且其內(nèi)在的熒光性質(zhì)有助于對納米酶的細(xì)胞攝入效率及腫瘤組織蓄積情況的可視化，在腫瘤的高效治療方面具有廣闊的應(yīng)用前景。
本文檔來自技高網(wǎng)...【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶的制備方法，其特征在于，天然蛋白質(zhì)為牛血清白蛋白；金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶通過以下過程制得：將含有氯金酸、硝酸銅和牛血清白蛋白的混合溶液的pH值調(diào)節(jié)為10-12，在加熱條件下進(jìn)行反應(yīng)，得到金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶的制備方法，其特征在于，含有氯金酸與硝酸銅和牛血清白蛋白的混合溶液中牛血清白蛋白的濃度為25?mg/mL，氯金酸與硝酸銅的摩爾比為1-8：1，牛血清白蛋白與硝酸銅的用量比為100?mg：0.0022-0.01?mmol。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶的制備方法，其特征在于，反應(yīng)溫度為35-45?℃，反應(yīng)時(shí)間為10-14小時(shí)，反應(yīng)在1200?rpm轉(zhuǎn)速攪拌下進(jìn)行。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶的制備方法，其特征在于，腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶通過以下過程制得
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶的制備方法，其特征在于，腫瘤靶向肽的序列如SEQ?ID?NO.1所示。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶的制備方法，其特征在于，金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶與1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳酰二亞胺的質(zhì)量比為25：8-16。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶的制備方法，其特征在于，金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶與腫瘤靶向肽的質(zhì)量比為100：1-4。
9.一種根據(jù)權(quán)利要求1-8任意一項(xiàng)所述方法制備的腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶。
10.一種根據(jù)權(quán)利要求1-8所述方法制備的腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶在制備用于抗腫瘤的化學(xué)動(dòng)力治療制劑和/或用于催化治療制劑中的應(yīng)用。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶的制備方法，其特征在于，天然蛋白質(zhì)為牛血清白蛋白；金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶通過以下過程制得：將含有氯金酸、硝酸銅和牛血清白蛋白的混合溶液的ph值調(diào)節(jié)為10-12，在加熱條件下進(jìn)行反應(yīng)，得到金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶的制備方法，其特征在于，含有氯金酸與硝酸銅和牛血清白蛋白的混合溶液中牛血清白蛋白的濃度為25?mg/ml，氯金酸與硝酸銅的摩爾比為1-8：1，牛血清白蛋白與硝酸銅的用量比為100?mg：0.0022-0.01?mmol。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶的制備方法，其特征在于，反應(yīng)溫度為35-45?℃，反應(yīng)時(shí)間為10-14小時(shí)，反應(yīng)在1200?rpm轉(zhuǎn)速攪拌下進(jìn)行。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的腫瘤靶向肽修飾的金銅雙金屬團(tuán)簇納米酶的制備方法，其特征在于，腫瘤靶向肽修飾的金銅雙...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：薛語萌，倪未未，尚利，吳懿峰，
申請(專利權(quán))人：西北工業(yè)大學(xué)重慶科創(chuàng)中心，
類型：發(fā)明
國別省市：
還沒有人留言評論。發(fā)表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。