【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及細(xì)胞藥物臨床研究，具體為用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法及系統(tǒng)。
技術(shù)介紹
1、隨著細(xì)胞治療技術(shù)的迅速發(fā)展，細(xì)胞藥物在多種疾病的治療中展現(xiàn)出巨大潛力。然而，細(xì)胞藥物在體內(nèi)的作用機(jī)制復(fù)雜，其可能引發(fā)患者不同程度的免疫反應(yīng)，這些免疫反應(yīng)不僅影響治療效果，還可能導(dǎo)致不良反應(yīng)的發(fā)生。因此，在細(xì)胞藥物臨床研究過程中，準(zhǔn)確、全面地監(jiān)測患者的免疫反應(yīng)具有極為重要的意義。然而，現(xiàn)有的免疫反應(yīng)監(jiān)測方法存在諸多缺陷。
2、現(xiàn)有的免疫反應(yīng)監(jiān)測方法檢測指標(biāo)單一，僅關(guān)注某一種免疫細(xì)胞數(shù)量或某一種免疫細(xì)胞因子濃度，無法全面反映復(fù)雜的免疫反應(yīng)體系；不能動態(tài)監(jiān)測免疫反應(yīng)在治療過程中的連續(xù)變化，難以準(zhǔn)確把握免疫反應(yīng)的發(fā)展趨勢，降低了細(xì)胞藥物治療安全性與有效性，為此，提出用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法及系統(tǒng)。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)的目的在于提供用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法及系統(tǒng)，以解決上述
技術(shù)介紹
中提出的問題之一。
2、為解決上述技術(shù)問題，本申請采用的一個技術(shù)方案是：用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法，包括以下步驟：
3、步驟一、獲取患者的外周血樣本，并對外周血樣本進(jìn)行預(yù)處理，得到患者樣本成分；
4、步驟二、基于多維度免疫指標(biāo)檢測技術(shù)對患者樣本成分進(jìn)行分析檢測，構(gòu)建免疫指標(biāo)檢測數(shù)據(jù)庫；
5、步驟三、基于細(xì)胞藥物特異性免疫反應(yīng)檢測技術(shù)對患者樣本成分進(jìn)行分析檢測，構(gòu)建細(xì)胞藥物特異性免疫反應(yīng)檢測數(shù)據(jù)
6、步驟四、基于免疫指標(biāo)檢測數(shù)據(jù)庫和細(xì)胞藥物特異性免疫反應(yīng)檢測數(shù)據(jù)庫，利用主成分分析算法與層次聚類分析相結(jié)合的數(shù)據(jù)整合模型，構(gòu)建患者免疫反應(yīng)圖譜；
7、步驟五、根據(jù)患者免疫反應(yīng)圖譜，通過與健康人群免疫數(shù)據(jù)對比以及治療前后數(shù)據(jù)的分析，生成評估與預(yù)測結(jié)果；
8、步驟六、根據(jù)評估與預(yù)測結(jié)果，為臨床醫(yī)生提供監(jiān)測報告和治療建議。
9、作為本技術(shù)方案的進(jìn)一步優(yōu)選的：所述構(gòu)建免疫指標(biāo)檢測數(shù)據(jù)庫的具體步驟如下：
10、s201、基于流式細(xì)胞術(shù)檢測技術(shù)，利用分選液檢測患者樣本成分中免疫細(xì)胞亞群的數(shù)量、比例及其表面標(biāo)志物的表達(dá)變化，得到免疫細(xì)胞亞群分析數(shù)據(jù)；
11、s202、基于酶聯(lián)免疫吸附測定或luminex液相芯片技術(shù)，檢測患者樣本成分中的細(xì)胞因子濃度，通過分析細(xì)胞因子濃度的變化，得到細(xì)胞因子檢測數(shù)據(jù)；
12、s203、基于免疫比濁法測定患者樣本成分中免疫球蛋白的含量，評估患者免疫功能的變化，得到免疫球蛋白檢測數(shù)據(jù)；
13、s204、基于高通量測序技術(shù)對患者樣本成分中t細(xì)胞受體基因進(jìn)行測序，分析t細(xì)胞受體的多樣性變化，得到t細(xì)胞受體分析數(shù)據(jù)；
14、s205、將免疫細(xì)胞亞群分析數(shù)據(jù)、細(xì)胞因子檢測數(shù)據(jù)、免疫球蛋白檢測數(shù)據(jù)以及t細(xì)胞受體分析數(shù)據(jù)進(jìn)行整合，構(gòu)建免疫指標(biāo)檢測數(shù)據(jù)庫。
15、作為本技術(shù)方案的進(jìn)一步優(yōu)選的：所述構(gòu)建細(xì)胞藥物特異性免疫反應(yīng)檢測數(shù)據(jù)庫的具體步驟如下：
16、s301、基于特異性免疫測定方法，檢測患者樣本成分中針對細(xì)胞藥物的特異性抗體，得到特異性抗體檢測數(shù)據(jù)；
17、s302、基于酶聯(lián)免疫斑點試驗結(jié)合流式細(xì)胞分選技術(shù)，檢測患者樣本成分中針對細(xì)胞藥物的特異性t細(xì)胞反應(yīng)，得到細(xì)胞藥物特異性t細(xì)胞反應(yīng)檢測數(shù)據(jù)；
18、s303、將特異性抗體檢測數(shù)據(jù)和細(xì)胞藥物特異性t細(xì)胞反應(yīng)檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行整合，構(gòu)建細(xì)胞藥物特異性免疫反應(yīng)檢測數(shù)據(jù)庫。
19、作為本技術(shù)方案的進(jìn)一步優(yōu)選的：所述構(gòu)建患者免疫反應(yīng)圖譜的方法包括以下步驟：
20、s401、對免疫指標(biāo)檢測數(shù)據(jù)庫和細(xì)胞藥物特異性免疫反應(yīng)檢測數(shù)據(jù)庫中的數(shù)據(jù)進(jìn)行清洗，去除異常值和缺失值；
21、s402、利用主成分分析算法提取主要特征成分，并利用奇異值分解算法進(jìn)行求解主成分計算；
22、s403、利用層次聚類分析對提取的主成分進(jìn)行聚類，在聚類過程中利用歐式距離度量樣本間的相似性，利用平均鏈接法計算類間距離，通過多次交叉驗證得到降維與聚類處理結(jié)果；
23、s404、基于降維與聚類處理結(jié)果，將主成分作為坐標(biāo)軸構(gòu)建多維空間坐標(biāo)系，在多維空間坐標(biāo)系中確定樣本點的位置，得到患者免疫反應(yīng)圖譜框架；
24、s405、將患者的臨床特征信息附加到對應(yīng)的樣本點上，并利用圖形渲染技術(shù)對患者免疫反應(yīng)圖譜框架進(jìn)行優(yōu)化顯示，構(gòu)建出患者免疫反應(yīng)圖譜。
25、作為本技術(shù)方案的進(jìn)一步優(yōu)選的：所述外周血樣本的采集采用抗凝劑處理，該抗凝劑為乙二胺四乙酸鹽，其濃度為1.5-2.0mg/ml，所述對外周血樣本進(jìn)行預(yù)處理包括離心分離操作。
26、作為本技術(shù)方案的進(jìn)一步優(yōu)選的：所述免疫細(xì)胞亞群包括cd4+t輔助細(xì)胞、cd8+t殺傷細(xì)胞、cd19+b淋巴細(xì)胞、nk自然殺傷細(xì)胞、nkt細(xì)胞以及單核細(xì)胞，所述表面標(biāo)志物包括cd28、ctla-4、cd69、cd16、cd56；所述細(xì)胞因子包括白細(xì)胞介素-2、白細(xì)胞介素-4、白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-10、白細(xì)胞介素-17、腫瘤壞死因子-α、干擾素-γ；所述免疫球蛋白包括igg、iga、igm、ige。
27、作為本技術(shù)方案的進(jìn)一步優(yōu)選的：所述分選液為磷酸鹽緩沖液，并添加2%的胎牛血清和1mm的乙二胺四乙酸。
28、作為本技術(shù)方案的進(jìn)一步優(yōu)選的：所述去除異常值和缺失值時，異常值的判定利用格拉布斯準(zhǔn)則，缺失值利用多重填補(bǔ)法進(jìn)行填補(bǔ)。
29、作為本技術(shù)方案的進(jìn)一步優(yōu)選的：該方法還包括，建立患者免疫反應(yīng)數(shù)據(jù)庫，對患者免疫反應(yīng)圖譜、評估與預(yù)測結(jié)果以及監(jiān)測報告和治療建議進(jìn)行存儲和管理。
30、為解決上述技術(shù)問題，本申請采用的另一個技術(shù)方案是：用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測系統(tǒng)，包括：樣本采集模塊、樣本預(yù)處理模塊、多維度免疫指標(biāo)檢測模塊、細(xì)胞藥物特異性免疫反應(yīng)檢測模塊、數(shù)據(jù)整合與分析模塊、評估與預(yù)測模塊、報告與建議模塊和數(shù)據(jù)庫管理模塊；
31、所述樣本采集模塊，用于獲取患者在細(xì)胞藥物給藥前以及給藥后的多個預(yù)定時間點的外周血樣本，并利用抗凝劑進(jìn)行處理，所述多個預(yù)定時間點根據(jù)細(xì)胞藥物的作用機(jī)制及半衰期確定；
32、所述樣本預(yù)處理模塊，用于對采集的外周血樣本進(jìn)行預(yù)處理，得到患者樣本成分；
33、所述多維度免疫指標(biāo)檢測模塊，用于基于多維度免疫指標(biāo)檢測技術(shù)對患者樣本成分進(jìn)行分析檢測，構(gòu)建免疫指標(biāo)檢測數(shù)據(jù)庫；
34、所述細(xì)胞藥物特異性免疫反應(yīng)檢測模塊，用于基于細(xì)胞藥物特異性免疫反應(yīng)檢測技術(shù)對患者樣本成分進(jìn)行分析檢測，構(gòu)建細(xì)胞藥物特異性免疫反應(yīng)檢測數(shù)據(jù)庫；
35、所述數(shù)據(jù)整合與分析模塊，用于基于免疫指標(biāo)檢測數(shù)據(jù)庫和細(xì)胞藥物特異性免疫反應(yīng)檢測數(shù)據(jù)庫，利用主成分分析算法與層次聚類分析相結(jié)合的數(shù)據(jù)整合模型進(jìn)行降維與聚類處理，構(gòu)建患者免疫反應(yīng)圖譜；
36、所述評估與預(yù)測模塊，本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點】
1.用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法，其特征在于，所述構(gòu)建免疫指標(biāo)檢測數(shù)據(jù)庫的具體步驟如下：
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法，其特征在于，所述構(gòu)建細(xì)胞藥物特異性免疫反應(yīng)檢測數(shù)據(jù)庫的具體步驟如下：
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法，其特征在于，所述構(gòu)建患者免疫反應(yīng)圖譜的方法包括以下步驟：
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法，其特征在于，所述外周血樣本的采集采用抗凝劑處理，該抗凝劑為乙二胺四乙酸鹽，其濃度為1.5-2.0mg/ml，所述對外周血樣本進(jìn)行預(yù)處理包括離心分離操作。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法，其特征在于，所述免疫細(xì)胞亞群包括CD4+T輔助細(xì)胞、CD8+T殺傷細(xì)胞、CD19+B淋巴細(xì)胞、NK自然殺傷細(xì)胞、NKT細(xì)胞以及單核細(xì)胞，所述表面標(biāo)志物包括CD28、CTLA-4、C
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法，其特征在于，所述分選液為磷酸鹽緩沖液，并添加2%的胎牛血清和1mm的乙二胺四乙酸。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法，其特征在于，所述去除異常值和缺失值時，異常值的判定利用格拉布斯準(zhǔn)則，缺失值利用多重填補(bǔ)法進(jìn)行填補(bǔ)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法，其特征在于，該方法還包括，建立患者免疫反應(yīng)數(shù)據(jù)庫，對患者免疫反應(yīng)圖譜、評估與預(yù)測結(jié)果以及監(jiān)測報告和治療建議進(jìn)行存儲和管理。
10.用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測系統(tǒng)，應(yīng)用于根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項所述的用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法，其特征在于，包括：樣本采集模塊、樣本預(yù)處理模塊、多維度免疫指標(biāo)檢測模塊、細(xì)胞藥物特異性免疫反應(yīng)檢測模塊、數(shù)據(jù)整合與分析模塊、評估與預(yù)測模塊、報告與建議模塊和數(shù)據(jù)庫管理模塊；
...【技術(shù)特征摘要】
1.用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法，其特征在于，所述構(gòu)建免疫指標(biāo)檢測數(shù)據(jù)庫的具體步驟如下：
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法，其特征在于，所述構(gòu)建細(xì)胞藥物特異性免疫反應(yīng)檢測數(shù)據(jù)庫的具體步驟如下：
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法，其特征在于，所述構(gòu)建患者免疫反應(yīng)圖譜的方法包括以下步驟：
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法，其特征在于，所述外周血樣本的采集采用抗凝劑處理，該抗凝劑為乙二胺四乙酸鹽，其濃度為1.5-2.0mg/ml，所述對外周血樣本進(jìn)行預(yù)處理包括離心分離操作。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于細(xì)胞藥物臨床研究的患者免疫反應(yīng)監(jiān)測方法，其特征在于，所述免疫細(xì)胞亞群包括cd4+t輔助細(xì)胞、cd8+t殺傷細(xì)胞、cd19+b淋巴細(xì)胞、nk自然殺傷細(xì)胞、nkt細(xì)胞以及單核細(xì)胞，所述表面標(biāo)志物包括cd28、ctla-4、cd69、cd16、cd56；所述細(xì)胞因子...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：黃明光，梁瀟，于佳莉，張愛玲，龐浩鑫，
申請(專利權(quán))人：北京興德通醫(yī)藥科技股份有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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