【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及蜜蜂，尤其涉及蜜蜂血淋巴采集裝備及方法。
技術介紹
1、蜜蜂在自然界和人類經濟中扮演著重要角色。在自然界中，蜜蜂主要的作用是訪花授粉，超過四分之三的全球主要作物類型的作物產量和作物質量在一定程度上依賴于蜜蜂授粉。
2、蜜蜂血淋巴循環系統與哺乳動物的封閉式血液循環系統并不相同，它是一種開放式循環系統。在這種系統中，血淋巴不僅在心臟和主要血管中流動，而且在蜜蜂身體的其他部分流動；它在血管外流動時，會穿過體腔，為蜜蜂體內所有器官和組織提供營養和氧氣，同時在免疫、創傷愈合、防御等方面也有著重要作用。蜜蜂作為完全變態發育昆蟲，其發育通常會經歷卵期、幼蟲期、蛹期、成蜂期等階段，使得不同發育階段血淋巴的采集方法存在顯著差異。
3、在幼蟲期，蜜蜂幼蟲隨著不斷地進食和生長其內部器官逐漸發育，消化系統、神經系統、肌肉系統等都在為成蟲的生活方式做準備。當幼蟲發育到一定程后，成年工蜂會在幼蟲的巢房封上蠟蓋，這標志著幼蟲期的結束和蛹期的開始。在封蓋后，幼蟲會開始向蜂蛹轉變，它們的身體會逐漸變硬，準備進入蛹期。
4、蛹期是蜜蜂從幼蟲到成蟲的過渡時期，此時蜜蜂的內部器官會經歷重大的改造和分化。例如，蜜蜂的消化系統、神經系統、肌肉系統等都會在這個階段進行重組和成熟，以適應成蟲的生活方式。
5、成蟲期是蜜蜂生命周期的最后階段，此時蜜蜂已經完全發育成熟，具備了繁殖、采集花粉和花蜜、建造蜂巢、保護蜂群等能力。蜂王負責產卵，雄蜂主要與蜂王交配，而工蜂則執行蜂群中的大部分工作，如采集食物、照顧幼蟲和維護蜂巢。
6、蜂群由蜂王、工蜂和雄蜂組成，三者發育過程、器官構造及功能行為上存在不同程度上的差異。因此蜜蜂血淋巴的收集方法要根據其不同發育階段的具體生理結構特點量身定制。本專利技術的目的是搭建一個蜜蜂三型蜂全發育周期血淋巴的采集平臺，以解決上述問題，達到最大程度的保證提取的血淋巴純度的目的。
技術實現思路
1、本專利技術的目的是為了解決現有技術中存在的缺點，而提出的蜜蜂血淋巴采集裝備及方法。
2、為了實現上述目的，本專利技術采用了如下技術方案：
3、蜜蜂血淋巴采集裝備，包括：活塞芯桿和0.3mm毛細管，所述活塞芯桿外部套接有套筒，所述套筒和活塞芯桿之間設有保溫腔，所述套筒底部連接可轉動的毛細管轉接頭，所述毛細管轉接頭內部下方設有密封圈，所述0.3mm毛細管穿過密封圈后整體穿過毛細管轉接頭；
4、制冷機，所述制冷機和套筒之間連通有硬質水管，所述制冷機用于預冷制冷液。
5、作為本專利技術的進一步技術方案，所述毛細管轉接頭通過旋轉使0.3mm毛細管與套筒連接處保持密封。
6、將活塞芯桿插入套筒，推至底部，利用硬質水管連接套筒和制冷機內的預冷后的制冷液；抽拉活塞芯桿時，制冷液流入保溫腔，0.3mm毛細管吸取血淋巴樣本。
7、蜜蜂血淋巴采集方法，包括以下具體步驟：
8、s1：第一階段血淋巴采集：
9、s1a：前處理：利用無菌生理鹽水對蜂王、工蜂、雄蜂幼蟲進行清洗后用無塵紙吸干體表水分，以去體表的細菌和飼料殘余，防止血淋巴樣本污染；
10、s1b：利用取血針在幼蟲背部中間部位輕輕刺破，對身體施加輕微壓力以使血淋巴外滲，使用上述蜜蜂血淋巴采集裝備吸取血淋巴；
11、s1c：采集完成后，將采集到的血淋巴放入-80℃的超低溫冰箱進行冷凍保存；
12、s2：第二階段血淋巴采集：
13、s2a：前處理：利用無菌生理鹽水對幼蟲進行清洗后用無塵紙吸干體表水分，以去體表的細菌和飼料殘余，防止血淋巴樣本污染；
14、s2b：利用取血針在幼蟲頭部區域的角質層上劃開一個小切口，并對身體施加輕微壓力以使血淋巴外滲，使用上述蜜蜂血淋巴采集裝備吸取血淋巴；
15、s2c：采集完成后，將采集到的血淋巴放入-80℃的超低溫冰箱進行冷凍保存；
16、s3：蜜蜂第三階段血淋巴采集：
17、s3a：前處理：利用無菌生理鹽水對蜂蛹進行清洗后用無塵紙吸干體表水分，以去體表的細菌和飼料殘余，防止血淋巴樣本污染；
18、s3b：將工蜂、蜂王蛹背部沖上，調整頭部角度，使頭部與身體呈直線，利用取血針刺入蜂蛹頭部觸角根部上1mm左右處，輕輕擠壓蜂蛹胸腹部，使用上述蜜蜂血淋巴采集裝備吸取血淋巴；將雄蜂蛹背部沖上，調整頭部角度，使頭部與身體呈直線，利用取血針劃破蜂蛹頭部觸角根部兩側2mm左右處的復眼，輕輕擠壓蜂蛹胸腹部，使用上述蜜蜂血淋巴采集裝備吸取血淋巴；
19、s3c：采集完成后，將采集到的血淋巴放入-80℃的超低溫冰箱進行冷凍保存；
20、s4：蜜蜂第四階段血淋巴采集：
21、s4a：前處理：利用無菌生理鹽水對蜂王、工蜂、雄蜂蛹進行清洗后用無塵紙吸干體表水分，以去體表的細菌和飼料殘余，防止血淋巴樣本污染；
22、s4b：將取血針刺入蜜蜂蜂蛹3-4節腹節間膜，使用上述蜜蜂血淋巴采集裝備吸取血淋巴；
23、s4c：采集完成后，將采集到的血淋巴放入-80℃的超低溫冰箱進行冷凍保存；
24、s5：蜜蜂第五階段血淋巴采集：
25、s5a：前處理：將成年蜜蜂放入冰箱-20℃3-5min，冷凍麻醉處理，以防成年蜂蜇傷實驗操作人員，待蜜蜂失去活動能力后利用無菌生理鹽水對成蜂體表進行清洗，并用無塵紙吸干體表水分，以去除體表的細菌和飼料殘余，防止血淋巴樣本污染；
26、s5b：使用鑷子將成年蜜蜂的一只觸角從根部拔除，輕輕擠壓蜜蜂胸腹部促進血淋巴從觸角根部涌出，使用上述蜜蜂血淋巴采集裝備吸取血淋巴；
27、s5c：采集完成后，將采集到的血淋巴放入-80℃的超低溫冰箱進行冷凍保存。
28、作為本專利技術的進一步技術方案，所述s1中，處理的蜂王、工蜂、雄蜂幼蟲包含5、6日齡蜂王、工蜂及雄蜂。
29、作為本專利技術的進一步技術方案，所述s2中，處理的幼蟲包括7-11日齡蜂王、7-12日齡工蜂、7-14日齡雄蜂。
30、作為本專利技術的進一步技術方案，所述s3中，處理的蜂蛹包括12-13日齡蜂王、13-15日齡工蜂、15-17日齡雄蜂。
31、作為本專利技術的進一步技術方案，所述s4中，處理的蜂王、工蜂、雄蜂蛹包括14-16日齡蜂王、16-21日齡工蜂、18-24日齡雄蜂。
32、作為本專利技術的進一步技術方案，所述s5中，處理的蜜蜂包括成蟲時期的三型蜂。
33、本專利技術的有益效果為：搭建了一個蜜蜂三型蜂全發育周期血淋巴的采集平臺，根據蜜蜂不同發育階段的具體生理結構特點量身定制，達到最大程度的保證提取的血淋巴純度的目的。
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1.蜜蜂血淋巴采集裝備，其特征在于，包括：活塞芯桿(1)和0.3mm毛細管(5)，所述活塞芯桿(1)外部套接有套筒(2)，所述套筒(2)和活塞芯桿(1)之間設有保溫腔(8)，所述套筒(2)底部連接可轉動的毛細管轉接頭(4)，所述毛細管轉接頭(4)內部下方設有密封圈(3)，所述0.3mm毛細管(5)穿過密封圈(3)后整體穿過毛細管轉接頭(4)；
2.根據權利要求1所述的蜜蜂血淋巴采集裝備，其特征在于，所述毛細管轉接頭(4)通過旋轉使0.3mm毛細管(5)與套筒(2)連接處保持密封。
3.蜜蜂血淋巴采集方法，其特征在于，包括以下具體步驟：
4.根據權利要求3所述的蜜蜂血淋巴采集方法，其特征在于，所述S1中，處理的蜂王、工蜂、雄蜂幼蟲包含5、6日齡蜂王、工蜂及雄蜂。
5.根據權利要求3所述的蜜蜂血淋巴采集方法，其特征在于，所述S2中，處理的幼蟲包括7-11日齡蜂王、7-12日齡工蜂、7-14日齡雄蜂。
6.根據權利要求3所述的蜜蜂血淋巴采集方法，其特征在于，所述S3中，處理的蜂蛹包括12-13日齡蜂王、13-15日齡工蜂、15
7.根據權利要求3所述的蜜蜂血淋巴采集方法，其特征在于，所述S4中，處理的蜂王、工蜂、雄蜂蛹包括14-16日齡蜂王、16-21日齡工蜂、18-24日齡雄蜂。
8.根據權利要求3所述的蜜蜂血淋巴采集方法，其特征在于，所述S5中，處理的蜜蜂包括成蟲時期的三型蜂。
...【技術特征摘要】
1.蜜蜂血淋巴采集裝備，其特征在于，包括：活塞芯桿(1)和0.3mm毛細管(5)，所述活塞芯桿(1)外部套接有套筒(2)，所述套筒(2)和活塞芯桿(1)之間設有保溫腔(8)，所述套筒(2)底部連接可轉動的毛細管轉接頭(4)，所述毛細管轉接頭(4)內部下方設有密封圈(3)，所述0.3mm毛細管(5)穿過密封圈(3)后整體穿過毛細管轉接頭(4)；
2.根據權利要求1所述的蜜蜂血淋巴采集裝備，其特征在于，所述毛細管轉接頭(4)通過旋轉使0.3mm毛細管(5)與套筒(2)連接處保持密封。
3.蜜蜂血淋巴采集方法，其特征在于，包括以下具體步驟：
4.根據權利要求3所述的蜜蜂血淋巴采集方法，其特征在于，所述s1中，處...
【專利技術屬性】
技術研發人員：房宇，董宣呈，楊一穎，馬貝貝，王影，姚書運，
申請(專利權)人：中國農業科學院蜜蜂研究所，
類型：發明
國別省市：
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