【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及創(chuàng)傷失血性心臟驟停大鼠模型技術(shù)，尤其是涉及一種創(chuàng)傷失血性心臟驟停大鼠模型的建立方法及其應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、在現(xiàn)代戰(zhàn)爭和日常事故中，創(chuàng)傷失血是導(dǎo)致非即刻致命傷患者死亡的主要原因之一，而由其引發(fā)的心臟驟停更是增加了救治難度。為了更好地理解創(chuàng)傷失血性心臟驟停的病理生理機制，并開發(fā)有效的預(yù)防和治療手段，建立一個穩(wěn)定可靠的動物模型是非常必要的。
2、目前常用的心臟驟停動物模型主要有：頸外靜脈放血造成不同嚴重程度低血容量休克至心臟驟停的豬模型、經(jīng)皮心外膜電刺激誘顫的方法制作二型糖尿病大鼠心肺復(fù)蘇模型、胸腔置管后注射氣體制作張力性氣胸壓力導(dǎo)致心臟驟停的豬模型、經(jīng)頸外靜脈注射血栓制作肺栓塞導(dǎo)致心臟驟停的豬模型以及控制性失血性休克模后利用電刺激誘導(dǎo)室顫性心臟驟停的豬模型。
3、上述這些心臟驟停動物模型雖能模擬心臟驟停的臨床過程，但卻存在各種局限性。外靜脈放血造成不同嚴重程度低血容量休克至心臟驟停的豬模型、胸腔置管后注射氣體制作張力性氣胸壓力導(dǎo)致心臟驟停的豬模型、經(jīng)頸外靜脈注射血栓制作肺栓塞導(dǎo)致心臟驟停的豬模型以及控制性失血性休克模后利用電刺激誘導(dǎo)室顫性心臟驟停的豬模型，使用如豬一類的大型動物進行實驗的成本相對較高，包括購買動物、飼養(yǎng)、麻醉及后續(xù)處理等費用，導(dǎo)致可重復(fù)性不高，限制了實驗的規(guī)模和頻率。頸外靜脈放血雖然可以通過精確控制放血量來模擬不同程度的低血容量休克，操作比較簡單，但實際臨床中失血性休克導(dǎo)致心臟驟停往往是動脈性出血為主，并且伴隨有其他復(fù)雜的生理變化，如組織損傷等，單純通過放血難以完全模擬這些復(fù)雜
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)所要解決的技術(shù)問題是提供一種操作簡單，實驗成本較低，可重復(fù)性高，對實驗規(guī)模和頻率不會造成限制，且實驗結(jié)果具有較高可靠性和可推廣性的創(chuàng)傷失血性心臟驟停大鼠模型的建立方法及其應(yīng)用。
2、本專利技術(shù)解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為：一種創(chuàng)傷失血性心臟驟停大鼠模型的建立方法，包括以下步驟：
3、步驟1、對大鼠稱重后，置于手術(shù)臺上，固定大鼠四肢，然后對大鼠采用戊巴比妥腹腔注射誘導(dǎo)麻醉，戊巴比妥注射劑量為30mg/kg體重，并采用控溫毯維持大鼠體溫在38.0±0.5℃；
4、步驟2、為大鼠建立氣管插管，并采用大鼠呼吸機輔助機械通氣，手術(shù)大鼠頸部暴露其頸動脈，在大鼠頸動脈處置入20f動脈導(dǎo)管，并將大鼠頸動脈處的20f動脈導(dǎo)管連接至動態(tài)血壓檢測設(shè)備和心電監(jiān)護設(shè)備處，通過動態(tài)血壓檢測設(shè)備和心電監(jiān)護設(shè)備記錄大鼠的初始生命體征；
5、步驟3、手術(shù)暴露大鼠的右股動脈，在大鼠的右股動脈處置入用于在大鼠失血期間勻速放血的22f動脈導(dǎo)管；
6、步驟4、手術(shù)暴露大鼠的左股靜脈，在大鼠的左股靜脈處置入用于補液、給藥和回輸血液的22f靜脈導(dǎo)管；
7、步驟5、在大鼠腹部正中取5cm切開口，行剖腹術(shù)，剖腹術(shù)完畢，絲線連續(xù)縫合開口；
8、步驟6、進行失血干預(yù)，具體過程為：將當前時刻作為實驗起始時刻0min，記為r0，開始計時，同時以2ml/kg/min速度通過右股動脈處的22f動脈導(dǎo)管對大鼠進行放血，并將血液儲存待回輸，直到監(jiān)測到大鼠的map血壓降低至10mmhg時停止放血，維持大鼠的map血壓為10mmhg至少10s后判定為心臟驟停，此時暫停機械通氣，并維持180秒；
9、步驟7、重啟機械通氣，并通過大鼠的左股靜脈處的22f靜脈導(dǎo)管開始以劑量20ug/kg體重靜脈推注腎上腺素，在推注完成后緊接著以200次/分鐘持續(xù)徒手按壓大鼠心臟部位，與此同時，一邊通過大鼠的左股靜脈處的22f靜脈導(dǎo)管推注第一劑氯化鈣溶液，一邊在5min內(nèi)通過大鼠右股動脈處的22f動脈導(dǎo)管將儲存待回輸?shù)难旱囊话胼斪⒅链笫篌w內(nèi)，并從輸注開始實時關(guān)注大鼠血壓的變化，當大鼠的map血壓>50mmhg，且脈壓差>30mmhg時，暫停按壓大鼠心臟部位，并觀察有無rosc，如無，且按壓時間未達10min，則繼續(xù)按壓，如無，且按壓時間已達10min，則停止按壓，如有，則停止按壓，其中，從開始以200次/分鐘持續(xù)徒手按壓大鼠心臟部位起，每計時達到3min的整數(shù)倍，則通過大鼠的左股靜脈處的22f靜脈導(dǎo)管以劑量20ug/kg體重靜脈推注推注腎上腺素一次，直至停止按壓；在停止按壓時，如果儲存待回輸?shù)难旱囊话脒€未輸注完成，則以原速度繼續(xù)輸注，直至完成；
10、步驟8、通過大鼠右股動脈處的22f動脈導(dǎo)管將儲存待回輸?shù)难旱氖Ｓ嘁话朐?0min輸注至大鼠體內(nèi)，將輸注完成時的計時時刻記為r1，r1為實驗起始時刻r0開始至當前的計時時刻，此時通過右股動脈處的22f動脈導(dǎo)管對大鼠采血測血氣，如果游離鈣低于1.0mmol/l，繼續(xù)通過大鼠左股靜脈處的22f靜脈導(dǎo)管推注第二劑氯化鈣溶液；隨后1h內(nèi)通過大鼠左股靜脈處的22f靜脈導(dǎo)管輸注與步驟6中大鼠放血量等量的生理鹽水，將生理鹽水輸注完成的時刻記為r2，r2為實驗起始時刻r0開始至當前的計時時刻，此時再次通過大鼠右股動脈處的22f動脈導(dǎo)管對大鼠采血測血氣，如果堿剩余大于等于-10且游離鈣大于等于1.0mmol/l，則直接進入步驟9，如果堿剩余小于-10，且游離鈣大于等于1.0mmol/l，則繼續(xù)通過大鼠左股靜脈處的22f靜脈導(dǎo)管輸注步驟6中大鼠放血量0.5倍的生理鹽水后進入步驟9，如果堿剩余大于等于-10且游離鈣小于1.0mmol/l，則再通過大鼠左股靜脈處的22f靜脈導(dǎo)管推注第三劑氯化鈣溶液后進入步驟9，如果堿剩余小于-10且游離鈣小于1.0mmol/l，則繼續(xù)通過大鼠左股靜脈處的22f靜脈導(dǎo)管輸注步驟6中大鼠放血量0.5倍的生理鹽水以及通過大鼠左股靜脈處的22f靜脈導(dǎo)管推注第三劑氯化鈣溶液后進入步驟9；
11、步驟9、撤除大鼠頸動脈處的20f動脈導(dǎo)管、大鼠右股動脈處的22f動脈導(dǎo)管和大鼠左股靜脈處的22f靜脈導(dǎo)管，并縫合大鼠頸動脈處、大鼠右股動脈處以及大鼠左股靜脈處的傷口，完成實驗，將大鼠控溫毯保溫后回籠；
12、步驟10、在完成實驗后的24小時對大鼠進行mnss(改良大鼠神經(jīng)功能缺損評分)評價并統(tǒng)計評分，然后將大鼠安樂死后，取大鼠組織標本和血樣本進行檢測，得到實驗結(jié)果。
13、進一步的，所述的步驟2中大鼠呼吸機的參數(shù)設(shè)置為潮氣量為8ml/kg，呼吸頻率為70次/分鐘，吸入氧濃度為21％，所述的步驟7中，在重啟機械通氣時，大鼠呼吸機的潮氣量、呼吸頻率和吸入氧濃度本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護點】
1.一種創(chuàng)傷失血性心臟驟停大鼠模型的建立方法，其特征在于包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種創(chuàng)傷失血性心臟驟停大鼠模型的建立方法，其特征在于所述的步驟2中大鼠呼吸機的參數(shù)設(shè)置為潮氣量為8ml/kg，呼吸頻率為70次/分鐘，吸入氧濃度為21％，所述的步驟7中，在重啟機械通氣時，大鼠呼吸機的潮氣量、呼吸頻率和吸入氧濃度與所述的步驟2中保持不變。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種創(chuàng)傷失血性心臟驟停大鼠模型的建立方法，其特征在于所述的步驟7中在推注第一劑氯化鈣溶液時，氯化鈣溶液的劑量為7.5mg/kg體重，推注時間為10s，氯化鈣溶液體積濃度為1％。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種創(chuàng)傷失血性心臟驟停大鼠模型的建立方法，其特征在于所述的步驟8中，第二劑氯化鈣溶液與第一劑氯化鈣溶液等量等濃度，推注時間為10s，第三劑氯化鈣溶液與第一劑氯化鈣溶液等量等濃度，推注時間為10s。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種創(chuàng)傷失血性心臟驟停大鼠模型的建立方法，其特征在于在實驗前，大鼠不禁食，不禁水。
6.一種權(quán)利要求1至5中任一項所述的創(chuàng)傷失血性心臟
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種創(chuàng)傷失血性心臟驟停大鼠模型的建立方法，其特征在于包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種創(chuàng)傷失血性心臟驟停大鼠模型的建立方法，其特征在于所述的步驟2中大鼠呼吸機的參數(shù)設(shè)置為潮氣量為8ml/kg，呼吸頻率為70次/分鐘，吸入氧濃度為21％，所述的步驟7中，在重啟機械通氣時，大鼠呼吸機的潮氣量、呼吸頻率和吸入氧濃度與所述的步驟2中保持不變。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種創(chuàng)傷失血性心臟驟停大鼠模型的建立方法，其特征在于所述的步驟7中在推注第一劑氯化鈣溶液時，氯化鈣溶液的劑量為7.5mg/kg...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：饒?zhí)?/a>，蔣守銀，徐善祥，陳博晉，馬細梅，呂祥康，
申請(專利權(quán))人：浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院，
類型：發(fā)明
國別省市：
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