【技術實現步驟摘要】
技術介紹
1、tau是能夠以磷酸化形式存在的眾所周知的人蛋白(參見，例如，goedert,proc.natl.acad.sci.u.s.a.85:4051-4055(1988)；goedert,embo?j.8:393-399(1989)；lee,neuron?2:1615-1624(1989)；goedert,neuron3:519-526(1989)；andreadis,biochemistry?31:10626-10633(1992)。據報道，tau在穩定微管方面發揮作用，尤其是在中樞神經系統中?？倀au(t-tau，即磷酸化和非磷酸化形式)和磷酸化-tau(p-tau，即磷酸化tau)由腦部響應于神經元損傷和神經變性而釋放，并且據報道，相對于普通群體，在阿爾茨海默病患者的csf中以增大的水平存在(jack等人,lancet?neurol?9:119-28(2010))。
2、tau是神經原纖維纏結的主要成分，其與斑一起是阿爾茨海默病的標志性特征。纏結構成直徑測量為10nm的異常原纖維，其成對出現，以螺旋方式纏繞，具有80nm的規則周期性。神經原纖維纏結內的tau被異常磷酸化(過度磷酸化)，其中磷酸酯基團附接于分子上的特定位點。在阿爾茨海默病中的內嗅皮質的ii層神經元、海馬的ca1和鉤回下區、扁桃體和新皮質的深層(iii層、v層和表層vi)中觀察到神經原纖維纏結的嚴重受累。另外已有報道，過度磷酸化的tau干擾微管組裝，這可能促進神經元網絡的破壞。
3、tau內含物是幾種神經變性疾病的定義神經病理學
技術實現思路
1、在一個方面，本專利技術提供了與人tau特異性結合的分離的抗體，其包含成熟重鏈可變區和成熟輕鏈可變區，該成熟重鏈可變區包含具有seq?id?no:8的cdr-h1、具有seq?idno:9或seq?id?no:149的cdr-h2，和具有seq?id?no:10的cdr-h3，其中該重鏈可變區與seqid?no:18至少90％相同；該成熟輕鏈可變區包含具有seq?id?no:12的cdr-l1，具有seq?idno:150、151、153、156、158、159、160、163、165、166、167、168、169、170、171、172、173或174的cdr-l2，和具有seq?id?no:14的cdr-l3，其中該輕鏈可變區與seq?id?no:122至少90％相同。
2、在一些抗體中，位置h12、h13、h17、h24、h40、h43、h48、h66、h67、h76、h80、h81和h91中的至少一者能夠分別被v、k、t、a、r、q、i、r、a、d、l、q和f占據，并且位置l2、l12、l15、l37、l39、l45、l60和l100中的至少一者能夠分別被v、p、l、q、r、r、d和q占據。
3、在一些抗體中，cdr-l2包含seq?id?no:150、151、163、167、168或169。在一些抗體中，該重鏈可變區包含seq?id?no:18，并且該輕鏈可變區包含seq?id?no:110、121、122或123。
4、在一些抗體中，該輕鏈可變區包含seq?id?no:110。在一些抗體中，該輕鏈可變區包含seq?id?no:121。在一些抗體中，該輕鏈可變區包含seq?id?no:122。在一些抗體中，該輕鏈可變區包含seq?id?no:123。
5、在一些抗體中，該重鏈可變區包含seq?id?no:146，并且該輕鏈可變區包含seq?idno:94或122。在一些抗體中，該輕鏈可變區包含seq?id?no:94。在一些抗體中，該輕鏈可變區包含seq?id?no:122。
6、在一些抗體中，該重鏈可變區包含seq?id?no:18或146，并且該輕鏈可變區包含seq?id?no:122。
7、在另一個方面，本專利技術提供了與人tau特異性結合的抗體，其包含成熟重鏈可變區和成熟輕鏈可變區，該成熟重鏈可變區包含分別具有seq?id?no:8、9和10的cdr?h1、cdr?h2和cdr?h3，不同的是位置h28能夠被n或t占據，h54能夠被n或d占據，h56能夠被d或e占據，位置h58能夠被v或i占據，并且位置h60能夠被d或e占據，該成熟輕鏈可變區包含分別具有seqid?no:12、13和14的cdr?l1、cdr?l2和cdr?l3，不同的是位置l24能夠被k或r占據，位置l50能夠被l、e、d、g或v占據，位置l52能夠被s或g占據，并且位置l54能夠被l、d、g、n、e、q、k、r、t、v或s占據，其中以下位置中的至少一者被所指定的氨基酸占據：h1被q占據，h5被q占據，h11被l占據，h20被l占據，h23被t占據，h38被k占據，h75被s占據，h56被e占據，h58被i占據，h60被e占據，h82c被v占據，l10被t占據，l17被e占據，l24被r占據，l37被q占據，l47被g、n、d、e、p、t、s或a占據，l48被g或d占據，l49被e占據，l50被e、d、g或v占據，l52被g占據，l54被d、g、n、e、q、k、r、t、v或s占據，l83被l占據，l86被h占據，l100被q占據，l106被l占據。
8、在另一個方面，本專利技術提供了與人tau結合的分離的單克隆抗體，其包含單克隆抗體3d6的三個輕鏈cdr和三個重鏈cdr，其中3d6是小鼠抗體，其特征在于具有包括seq?idno:7的氨基酸序列的重鏈可變區和具有包括seq?id?no:11的氨基酸序列的輕鏈可變區，不同的是位置h27能夠被f或y占據，位置h28能夠被n或t占據，位置h29能夠被i或f占據，位置h30能夠被k或t占據，位置h51能夠被i或v占據，位置h54能夠被n或d占據，位置h60能夠被d、a或e占據，位置h61能夠被p或e占據，位置h102能夠被f或y占據，位置l50能夠被l、e、d、g或v占據，位置l52能夠被s或g占據，并且位置l54能夠被l、d、g、n、e、q、k、r、t、v或s占據，其中以下位置中的至少一者被所指定的氨基酸占據：l37被q占據，l47被g、n、d、e、p、t、s或a占據，l48被g或d占據，l49被e占據，l50被e、d、g或v占據，l52被g占據，l54被d、g、n、e、q、k、r、t、v或s占據，l100被q占據，h60被e占據，h82c被v占據。
9、在一些抗體中，cdr-h1具有包括seq?id?no:86的氨基酸序列。在一些抗體中，cdr-h2具有包括seq?id?no:87、seq?id?no:88、seq?id?no:92或seq?id?no:149的氨基酸序列。在一些抗體中，cdr-l2具有包括seq?id?no:150-175中的任一者的氨基酸序列。在一些抗體中，cdr-l1具有包括seq?id?no:89的氨基酸序列。在一些抗體中本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種與人tau特異性結合的分離抗體或其抗原結合抗體片段，其包含：
2.如權利要求1所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中Kabat位置H12、H13、H17、H24、H40、H43、H48、H66、H67、H76、H80、H81和H91中的至少一者能夠分別被V、K、T、A、R、Q、I、R、A、D、L、Q和F占據，并且Kabat位置L2、L12、L15、L37、L39、L45、L60和L100中的至少一者能夠分別被V、P、L、Q、R、R、D和Q占據。
3.如權利要求1所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中CDR?L2包含SEQ?ID?NO:150、151、163、167、168或169。
4.如權利要求3所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述重鏈可變區包含SEQ?IDNO:18，并且所述輕鏈可變區包含SEQ?ID?NO:110、121、122或123。
5.如權利要求3所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述重鏈可變區包含SEQ?IDNO:146，并且所述輕鏈可變區包含SEQ?ID?NO:94或122。
6.如權利要求3所述的抗
7.如權利要求1-6中任一項所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述的抗體或抗原結合抗體片段是嵌合抗體、嵌合抗原結合抗體片段、飾面抗體、飾面抗原結合抗體片段、人源化抗體、或人源化抗原結合抗體片段。
8.如權利要求1-7中任一項所述的抗體或抗原結合抗體片段，其為抗體。
9.如權利要求1-7中任一項所述的抗體或抗原結合抗體片段，其為抗原結合抗體片段。
10.如權利要求9所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述的抗原結合抗體片段是單鏈抗體、Fab、或Fab'2片段。
11.如權利要求9所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述的抗原結合抗體片段是Fab片段或單鏈Fv。
12.如權利要求8所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述的抗體具有人IgG1同種型。
13.如權利要求1-7和9-11中任一項所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述成熟輕鏈可變區與輕鏈恒定區融合，并且所述成熟重鏈可變區與重鏈恒定區融合。
14.如權利要求13所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述重鏈恒定區是天然人重鏈恒定區的突變形式，相對于所述天然人重鏈恒定區，所述天然人重鏈恒定區的突變形式與Fcγ受體的結合減少。
15.如權利要求13或14所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述重鏈恒定區屬于IgG1同種型。
16.如權利要求15所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述重鏈恒定區具有SEQ?IDNO:176的氨基酸序列。
17.如權利要求13所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中與重鏈恒定區融合的所述成熟重鏈可變區具有SEQ?ID?NO:178的氨基酸序列。
18.如權利要求17所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述重鏈具有SEQ?ID?NO:180的氨基酸序列。
19.如權利要求13所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述輕鏈恒定區具有SEQ?IDNO:177的氨基酸序列。
20.如權利要求13所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中與輕鏈恒定區融合的所述成熟輕鏈可變區具有SEQ?ID?NO:179的氨基酸序列。
21.如權利要求20所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述輕鏈具有SEQ?ID?NO:181的氨基酸序列。
22.如權利要求17所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述重鏈具有SEQ?ID?NO:178的氨基酸序列，并且所述輕鏈具有SEQ?ID?NO:179的氨基酸序列。
23.如權利要求18所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述重鏈具有SEQ?ID?NO:180的氨基酸序列，并且所述輕鏈具有SEQ?ID?NO:181的氨基酸序列。
24.如權利要求13或14所述的抗體或抗原結合抗體片段，其在所述重鏈恒定區中具有至少一個突變。
25.如權利要求24所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述至少一個突變減少所述重鏈恒定區的補體固定或活化。
26.如權利要求25所述的抗體或抗原結合抗體片段，其在所述重鏈恒定區根據EU編號的位置241、264、265、270、296、297、318、320、322、329和331中的一個或多個處具有突變。
27.如權利要求26所述的抗體或抗原結合抗體片段，其在EU編號的位置318、320和322處具有丙...
【技術特征摘要】
1.一種與人tau特異性結合的分離抗體或其抗原結合抗體片段，其包含：
2.如權利要求1所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中kabat位置h12、h13、h17、h24、h40、h43、h48、h66、h67、h76、h80、h81和h91中的至少一者能夠分別被v、k、t、a、r、q、i、r、a、d、l、q和f占據，并且kabat位置l2、l12、l15、l37、l39、l45、l60和l100中的至少一者能夠分別被v、p、l、q、r、r、d和q占據。
3.如權利要求1所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中cdr?l2包含seq?id?no:150、151、163、167、168或169。
4.如權利要求3所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述重鏈可變區包含seq?idno:18，并且所述輕鏈可變區包含seq?id?no:110、121、122或123。
5.如權利要求3所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述重鏈可變區包含seq?idno:146，并且所述輕鏈可變區包含seq?id?no:94或122。
6.如權利要求3所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述重鏈可變區包含seq?idno:18或146，并且所述輕鏈可變區包含seq?id?no:122。
7.如權利要求1-6中任一項所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述的抗體或抗原結合抗體片段是嵌合抗體、嵌合抗原結合抗體片段、飾面抗體、飾面抗原結合抗體片段、人源化抗體、或人源化抗原結合抗體片段。
8.如權利要求1-7中任一項所述的抗體或抗原結合抗體片段，其為抗體。
9.如權利要求1-7中任一項所述的抗體或抗原結合抗體片段，其為抗原結合抗體片段。
10.如權利要求9所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述的抗原結合抗體片段是單鏈抗體、fab、或fab'2片段。
11.如權利要求9所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述的抗原結合抗體片段是fab片段或單鏈fv。
12.如權利要求8所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述的抗體具有人igg1同種型。
13.如權利要求1-7和9-11中任一項所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述成熟輕鏈可變區與輕鏈恒定區融合，并且所述成熟重鏈可變區與重鏈恒定區融合。
14.如權利要求13所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述重鏈恒定區是天然人重鏈恒定區的突變形式，相對于所述天然人重鏈恒定區，所述天然人重鏈恒定區的突變形式與fcγ受體的結合減少。
15.如權利要求13或14所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述重鏈恒定區屬于igg1同種型。
16.如權利要求15所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述重鏈恒定區具有seq?idno:176的氨基酸序列。
17.如權利要求13所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中與重鏈恒定區融合的所述成熟重鏈可變區具有seq?id?no:178的氨基酸序列。
18.如權利要求17所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述重鏈具有seq?id?no:180的氨基酸序列。
19.如權利要求13所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述輕鏈恒定區具有seq?idno:177的氨基酸序列。
20.如權利要求13所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中與輕鏈恒定區融合的所述成熟輕鏈可變區具有seq?id?no:179的氨基酸序列。
21.如權利要求20所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述輕鏈具有seq?id?no:181的氨基酸序列。
22.如權利要求17所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述重鏈具有seq?id?no:178的氨基酸序列，并且所述輕鏈具有seq?id?no:179的氨基酸序列。
23.如權利要求18所述的抗體或抗原結合抗體片段，其中所述重鏈具有seq?id?no:180的氨基酸序列，并且所述輕鏈具有seq?id?no:181的氨基酸序列。...
【專利技術屬性】
技術研發人員：塔洛陳·S·尼扎，羅賓·巴伯爾，菲利普·詹姆斯·多蘭三世，劉躍，斯維特拉娜·亞歷山大，馬克·E·倫茨，
申請(專利權)人：普羅塞納生物科學有限公司，
類型：發明
國別省市：
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