【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及基因工程和蛋白質(zhì)工程，具體涉及一種耐高溫脂肪酶突變體及其在合成功能性脂質(zhì)中的應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、脂肪酶是一類具有多種催化能力的酶，可以催化三酰甘油酯及其他一些水不溶性酯類的水解、醇解、酯化、轉(zhuǎn)酯化及酯類的逆向合成反應(yīng)，除此之外還表現(xiàn)出其他一些酶的活性，如磷脂酶、溶血磷脂酶、膽固醇酯酶、酰肽水解酶活性等。脂肪酶不同活性的發(fā)揮依賴于反應(yīng)體系的特點，如在油水界面促進酯水解，而在有機相中可以酶促合成和酯交換。
2、脂肪酶的性質(zhì)研究主要包括最適溫度與ph、溫度與ph穩(wěn)定性、底物特異性等幾個方面。迄今，已分離、純化了大量的微生物脂肪酶，并研究了其性質(zhì)，它們在分子量、最適ph、最適溫度、ph和熱穩(wěn)定性、等電點和其他生化性質(zhì)方面存在不同?？傮w而言，微生物脂肪酶具有比動植物脂肪酶更廣的作用ph、作用溫度范圍，高穩(wěn)定性和活性，對底物有特異性。
3、目前脂肪酶在醫(yī)藥、油脂加工、生物柴油等領(lǐng)域的應(yīng)用還不夠廣泛，因此開發(fā)性能優(yōu)良的脂肪酶，并降低其生產(chǎn)成本，對于促進該酶的應(yīng)用具有重要的意義。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)的目的是提供一種耐高溫脂肪酶突變體。所述突變體的耐熱性得到顯著提高，有利于促進其在功能性脂質(zhì)合成中的應(yīng)用。
2、本專利技術(shù)涉及一種脂肪酶突變體，是氨基酸序列為seq?id?no:1的脂肪酶第163位氨基酸由arg突變?yōu)閠hr。
3、所述突變體的氨基酸序列為seq?id?no：5。
4、本專利技術(shù)還涉及編碼上述脂肪酶突變
5、本專利技術(shù)還涉及包含上述dna分子的重組表達載體。
6、本專利技術(shù)還涉及一種宿主細胞，包含上述重組表達載體。
7、將上述的質(zhì)粒轉(zhuǎn)入宿主細胞中，重組表達的脂肪酶突變體的耐熱性得到顯著提升。
8、所述宿主細胞為畢赤酵母（ pichia?pastoris）。
9、所述宿主細胞為黑曲霉（ aspergillus?niger）。
10、所述宿主細胞為里氏木霉（ trichoderma?reesei）。
11、本專利技術(shù)還涉及上述脂肪酶突變體在功能性脂質(zhì)opl合成中的應(yīng)用。
12、與野生型脂肪酶rl相比，本專利技術(shù)提供的包含r163t單點突變的脂肪酶突變體耐熱性得到顯著提高，其在80℃條件下處理3min后，酶活殘留率高達69.82%，取得意料不到的技術(shù)效果。
13、綜上所述，本專利技術(shù)提供的脂肪酶突變體具有更強的耐熱性，有利于促進其在功能性脂質(zhì)加工等領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用。
本文檔來自技高網(wǎng)...【技術(shù)保護點】
1.一種脂肪酶突變體，其特征在于，所述突變體的氨基酸序列為SEQ?ID?NO：5。
2.編碼權(quán)利要求1所述脂肪酶突變體的DNA分子。
3.包含權(quán)利要求2所述DNA分子的重組表達載體。
4.包含權(quán)利要求3所述重組表達載體的宿主細胞。
5.如權(quán)利要求4所述的宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞為畢赤酵母（Pichia?pastoris）或黑曲霉（Aspergillus?niger）或里氏木霉（Trichoderma?reesei）。
6.權(quán)利要求1所述脂肪酶突變體在合成功能性脂質(zhì)中的應(yīng)用。
7.如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述功能性脂質(zhì)為1-油酸-2-棕櫚酸-3亞油酸甘油三酯。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種脂肪酶突變體，其特征在于，所述突變體的氨基酸序列為seq?id?no：5。
2.編碼權(quán)利要求1所述脂肪酶突變體的dna分子。
3.包含權(quán)利要求2所述dna分子的重組表達載體。
4.包含權(quán)利要求3所述重組表達載體的宿主細胞。
5.如權(quán)利要求4所述的宿主細胞，其特征在于，所述宿...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：徐曉東，陸娜，劉文瑤，葛菁華，曹體爽，李瑞，李玉強，
申請(專利權(quán))人：青島蔚藍生物集團有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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