【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及生物，具體地說，是關于一組小rna以及診斷畸精癥試劑盒和應用。
技術介紹
1、在臨床常規精液分析時，現有技術手段主要集中在檢測精液參數、精液ros值、精子dna碎片率等方面來評估精子質量(who手冊)。目前已知精子中含有大量片段化rna(小rna)，現已有技術對精子中小rna進行測序，發現其中含有rsrna、tsrna、pirna、mirna等，并且存在其獨特的分布特征，在外界營養「1」、衰老「2」等刺激下，精子可能遭受損傷，其小rna譜發生改變，某些特定小rna序列變化顯著，因此可以通過檢測特定產生相應小rna豐度作為評估精子質量的標準。
2、現有技術不足或缺點如下：首先，在臨床中的精液分析中，現有方法僅檢測精子相關參數，無法全面、真實、準確地評估精子質量。另一方面，現在雖有通過檢測小rna來評估精子質量的方法，但主要集中在mirna探針和序列上，較為單一。而tsrna、rsrna實際上在精子中含量很高，卻由于傳統測序方法的局限性，使得其含量被低估，因而鮮有發現相關性高、能夠作為分子標志物評價精子質量的有效工具。
3、中國專利文獻cn117431308a,公開了iqch基因及其突變基因作為分子標志物在診斷和治療男性不育癥中的應用，屬于生物醫藥
本專利技術首次揭示了iqch是人類男性不育癥新的致病基因，iqch功能丟失性突變與少弱畸精癥有關，能導致精子線粒體鞘結構異常和纖維環暴露，由此引起尾部斷裂、彎折。此外，iqch功能異常也會導致精子頂體反應活性下降，進一步損害精子功能。本專利技
4、而目前關于一組小rna以及診斷畸精癥試劑盒和應用還未見報道。
技術實現思路
1、本專利技術的目的是針對現有技術中的不足，通過pandora-seq小rna測序技術篩選出特異性序列，主要目的是提供了一些有效區分畸精與正常精子的rsrna和tsrna序列(包括但不局限于圖1中的兩例)，采用pcr這一簡單且有效的手段進行檢測，從而為臨床評價精子質量提供更為優良的依據和方案。
2、第一方面，本專利技術提供了小rna作為生物標志物在制備診斷畸精癥試劑或試劑盒中的應用，所述小rna為rsrna、tsrna中一種或幾種的組合。
3、作為一個優選例，所述的rsrna是28s-rs2717-2738，序列如seq?id?no:16所示，tsrna是inner’tsrnahis(gtg)序列如seq?id?no:17所示。
4、作為一個優選例，所述診斷畸精癥試劑或試劑盒其檢測樣品為精子。
5、第二方面，本專利技術提供了檢測精子中小rna含量的試劑在制備診斷畸精癥試劑或試劑盒中的應用，
6、作為一個優選例，所述小rna為rsrna、tsrna中一種或幾種的組合。
7、作為另一優選例，所述的rsrna是28s-rs2717-2738，序列如seq?id?no:16所示，tsrna是inner’tsrnahis(gtg)序列如seq?id?no:17所示。
8、作為另一優選例，28s-rs2717-2738引物序列如seq?id?no:14所示，inner’tsrnahis(gtg)引物序列如seq?id?no:13所示。
9、第三方面，本專利技術提供了一種診斷畸精癥的試劑盒，所述試劑盒包含檢測精子中小rna含量的試劑，所述小rna為rsrna、tsrna中一種或幾種的組合。
10、作為一個優選例，所述的rsrna是28s-rs2717-2738，序列如seq?id?no:16所示，tsrna是inner’tsrnahis(gtg)序列如seq?id?no:17所示。
11、作為另一優選例，28s-rs2717-2738引物序列如seq?id?no:14所示，inner’tsrnahis(gtg)引物序列如seq?id?no:13所示。
12、本專利技術優點在于：
13、一，臨床價值
14、1，高準確性與特異性：通過檢測精子中的rsrna和tsrna含量來區分畸形精子與正常精子，為臨床提供了一種全新的、更具針對性的評價指標。與傳統的精子質量檢測方法相比，基于特定rna分子的檢測具有更高的準確性和特異性，能夠更精準地反映精子的功能狀態。
15、2，早期診斷潛力：rsrna和tsrna在精子中的表達變化可能先于傳統精液參數的異常，因此本專利技術有望實現對男性生育能力的早期診斷。早期發現精子畸形等問題，可以及時采取干預措施，提高治療成功率。
16、3，簡單高效的檢測手段：采用rtpcr進行檢測，具有操作簡便、快速、成本相對較低等優點。不需要復雜的儀器設備和專業技術人員，便于在各級醫療機構推廣應用，提高檢測的可及性。
17、二，經濟效果
18、1，降低醫療成本：傳統的輔助生殖技術如體外受精(ivf)和卵胞漿內單精子注射(icsi)費用高昂，且成功率有限。本專利技術通過準確評估精子質量，可以減少不必要的輔助生殖嘗試，降低醫療費用支出。同時，早期診斷和治療男性生育問題，也可以避免后期因病情加重而產生的高額醫療費用。
19、2，提高醫療資源利用效率：簡單高效的檢測手段可以減少檢測時間和人力成本，提高醫療資源的利用效率。使醫療機構能夠更好地為更多患者提供服務，緩解醫療資源緊張的局面。
本文檔來自技高網...【技術保護點】
1.小RNA作為生物標志物在制備診斷畸精癥試劑或試劑盒中的應用，其特征在于，所述小RNA為rsRNA、tsRNA中一種或幾種的組合。
2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述的rsRNA是28S-rs2717-2738，序列如SEQ?ID?NO:16所示，tsRNA是Inner’tsRNAHis(GTG)序列如SEQ?ID?NO:17所示。
3.根據權利要求1或2所述的應用，其特征在于，所述診斷畸精癥試劑或試劑盒其檢測樣品為精子，采用rtPCR進行檢測。
4.檢測精子中小RNA含量的試劑在制備診斷畸精癥試劑或試劑盒中的應用，其特征在于，所述小RNA為rsRNA、tsRNA中一種或幾種的組合。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述的rsRNA是28S-rs2717-2738，序列如SEQ?ID?NO:16所示，tsRNA是Inner’tsRNAHis(GTG)序列如SEQ?ID?NO:17所示。
6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，28S-rs2717-2738引物序列如SEQ?ID?NO:14所示，
7.一種診斷畸精癥的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含檢測精子中小RNA含量的試劑，所述小RNA為rsRNA、tsRNA中一種或幾種的組合。
8.根據權利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述的rsRNA是28S-rs2717-2738，序列如SEQ?ID?NO:16所示，tsRNA是Inner’tsRNAHis(GTG)序列如SEQ?ID?NO:17所示。
9.根據權利要求8所述的試劑盒，其特征在于，28S-rs2717-2738引物序列如SEQ?IDNO:14所示，Inner’tsRNAHis(GTG)引物序列如SEQ?ID?NO:13所示，采用rtPCR進行檢測。
...【技術特征摘要】
1.小rna作為生物標志物在制備診斷畸精癥試劑或試劑盒中的應用，其特征在于，所述小rna為rsrna、tsrna中一種或幾種的組合。
2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述的rsrna是28s-rs2717-2738，序列如seq?id?no:16所示，tsrna是inner’tsrnahis(gtg)序列如seq?id?no:17所示。
3.根據權利要求1或2所述的應用，其特征在于，所述診斷畸精癥試劑或試劑盒其檢測樣品為精子，采用rtpcr進行檢測。
4.檢測精子中小rna含量的試劑在制備診斷畸精癥試劑或試劑盒中的應用，其特征在于，所述小rna為rsrna、tsrna中一種或幾種的組合。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述的rsrna是28s-rs2717-2738，序列如seq?id?no:16所示，tsrna是inner’tsrnahis(gtg)序列如se...
【專利技術屬性】
技術研發人員：張曉鷗，張云芳，楊依婷，黃若梵，
申請(專利權)人：上海市第一婦嬰保健院，
類型：發明
國別省市：
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