【技術實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術涉及提純領域，具體涉及一種銀耳多糖的提取方法。
技術介紹
1、銀耳，又稱白木耳，具有滋陰潤肺、養(yǎng)胃生津的功效，對于治療肺熱咳嗽、胃炎、面部面斑、癌癥腫瘤等病癥均有作用，大部分的生物活性均與銀耳多糖相關，是我國傳統(tǒng)的真菌食藥。銀耳多糖具有調(diào)節(jié)免疫、降血脂、抗輻射、抗腫瘤、抗衰老、抗氧化等作用。目前，銀耳多糖的提取純化工藝日漸成熟，但未形成工業(yè)化，傳統(tǒng)的水提取效率及產(chǎn)品純度較低，存在一系列問題，產(chǎn)業(yè)化體系尚待完善。
2、自2003年abbott等首次提出低共熔溶劑(deep?eutectic?solvents,dess)概念以來，dess在生物活性成分提取上的應用備受關注。dess是一種新型、綠色溶劑，性質(zhì)類似離子液體，且價格低，易獲得，具有較好的生物可降解性、穩(wěn)定性、低毒或無毒，目前已被廣泛應用于多酚、黃酮、多糖的提取，但低共熔溶劑應用在銀耳多糖的提取中尚未有報道。
3、慢性阻塞性肺疾病(chronic?obstructive?lung?disease,copd)是一種特征為反復的呼吸道癥狀和長期的氣流通過受到限制的疾病，在臨床上主要表現(xiàn)呼吸困難、咳嗽和咳痰，后期可能出現(xiàn)肺氣腫、肺纖維化等病狀。長期接觸香煙煙霧(cse)或暴露在含有毒顆粒的環(huán)境中，是患病主要原因之一。引起copd的原理：氧化應激、炎癥反應、蛋白酶/抗蛋白酶活性失衡、細胞凋亡。盡管基于copd的基礎研究已經(jīng)取得諸多成果，但其確切的致病機制仍尚未完全闡明，導致治療copd的藥物種類單一，效果不佳。
技術實現(xiàn)
1、為了克服上述現(xiàn)有技術存在的至少一個技術問題，本專利技術的目的之一在于提供一種銀耳多糖的提取方法。
2、本專利技術的目的之二在于提供一種銀耳多糖。
3、本專利技術的目的之三在于提供一種銀耳多糖的提取方法提取得到的銀耳多糖在制備治療慢性阻塞性肺疾病的藥物中的應用。
4、為了實現(xiàn)上述目的，本專利技術所采取的技術方案是：
5、本專利技術的第一個方面提供了一種銀耳多糖的提取方法，包括以下步驟：
6、(1)：將銀耳與低共熔溶劑按照質(zhì)量體積比為1g：(5～40)ml的比例混合并溶脹后，在提取溫度為80～105℃下超聲提取40～180min，得到銀耳多糖提取液；
7、(2)：將所述銀耳多糖提取液醇沉后，純化，得到所述銀耳多糖；
8、所述低共熔溶劑包括水、氫鍵受體和氫鍵供體，水的質(zhì)量百分數(shù)為40～80％，氫鍵受體與氫鍵供體的摩爾比為1：(0.5～5)。
9、優(yōu)選地，所述銀耳為采用去蒂后的銀耳子實體，干燥后粉碎制得；進一步優(yōu)選地，所述銀耳為采用去蒂后的銀耳子實體，干燥后粉碎，過40～100目篩，制得。
10、優(yōu)選地，所述低共熔溶劑的制備方法為：將氫鍵供體、氫鍵受體、水混合反應制得；進一步優(yōu)選地，所述低共熔溶劑的制備方法為：將氫鍵供體、氫鍵受體、水在90～95℃混合反應制得。
11、優(yōu)選地，所述步驟(2)中的醇沉步驟為：將所述銀耳多糖提取液采用乙醇進行沉淀，離心后得到銀耳多糖固體。
12、優(yōu)選地，所述步驟(1)中的提取溫度為80～100℃；進一步優(yōu)選地，所述步驟(1)中的提取溫度為80～96℃；進一步優(yōu)選地，所述步驟(1)中的提取溫度為90～96℃。
13、優(yōu)選地，所述步驟(1)中，溶脹時間為0.5～2h；進一步優(yōu)選地，所述溶脹時間為50～100min；更優(yōu)選地，所述溶脹時間為50～60min。
14、優(yōu)選地，所述氫鍵受體選自氯化膽堿。
15、優(yōu)選地，所述氫鍵供體選自乙二醇、甘油、1,4-丁二醇、尿素、檸檬酸、dl-乳酸、脯氨酸、蘋果酸、丙二醇中的至少一種；進一步優(yōu)選地，所述氫鍵供體選自檸檬酸或dl-乳酸。
16、優(yōu)選地，所述步驟(1)中，銀耳與低共熔溶劑的質(zhì)量體積比為1g：(10～31)ml。
17、優(yōu)選地，所述步驟(1)中，提取時間為40～180min；進一步優(yōu)選地，所述步驟(1)中，提取時間為75～145min。
18、優(yōu)選地，所述低共熔溶劑中，氫鍵受體與氫鍵供體的摩爾比為1：(0.5～2)。
19、優(yōu)選地，所述低共熔溶劑中水的質(zhì)量百分數(shù)為55～70％。
20、優(yōu)選地，所述低共熔溶劑為摩爾比為1：(0.5～1.5)的氯化膽堿和檸檬酸的混合物；進一步優(yōu)選地，低共熔溶劑為摩爾比為1：(0.9～1.2)的氯化膽堿和檸檬酸的混合物；更優(yōu)選地，所述低共熔溶劑為摩爾比為1：1的氯化膽堿和檸檬酸的混合物。
21、優(yōu)選地，所述步驟(2)中的純化步驟為：將醇沉后的固體在層析柱上依次使用水和0.1～0.3mol/l的氯化鈉溶液洗脫，將洗脫液透析后冷凍干燥，得到純化后的銀耳多糖。
22、優(yōu)選地，所述層析柱為deae-52柱。
23、本專利技術的第二個方面提供了一種銀耳多糖，所述銀耳多糖采用本專利技術第一個方面提供的銀耳多糖的提取方法提取得到；所述銀耳多糖的分子量為13000～14000da。
24、優(yōu)選地，所述銀耳多糖的分子量為13100～13200da；進一步優(yōu)選地，所述銀耳多糖的分子量為13152da。
25、本專利技術的第三個方面提供了本專利技術第一個方面提供的提取方法提取得到的銀耳多糖在制備治療慢性阻塞性肺疾病的藥物中的應用。
26、本專利技術的有益效果是：本專利技術中的提取方法采用天然無毒的低共熔溶劑進行提取，能避免有機溶劑的使用，降低潛在的人體危害，具有很好的穩(wěn)定性和安全性。本專利技術提供的提取方法無需脫蛋白，提取步驟簡單，具有較高的提取效率和提取純度，提取產(chǎn)物治療copd功效顯著，具體為蛋白含量由1.92％降至1.12％，蛋白脫除率達到41.67％，提取率達到30.02％，顯著高于傳統(tǒng)的水提取法。
27、本專利技術中的提取方法提取得到的銀耳多糖在cse刺激a549細胞形成的copd細胞模型中，能夠顯著降低促炎因子il-6的水平，顯著增強sod酶、過氧化氫酶、谷胱甘肽過氧化物酶的酶活力，通過降低模型的炎癥水平以及緩解氧化應激的影響，而實現(xiàn)治療copd的功效。
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1.一種銀耳多糖的提取方法，其特征在于：包括以下步驟：
2.根據(jù)權利要求1所述的銀耳多糖的提取方法，其特征在于：所述氫鍵受體選自氯化膽堿；所述氫鍵供體選自乙二醇、甘油、1,4-丁二醇、尿素、檸檬酸、DL-乳酸、脯氨酸、蘋果酸、丙二醇中的至少一種。
3.根據(jù)權利要求1所述的銀耳多糖的提取方法，其特征在于：所述步驟(1)中，銀耳與低共熔溶劑的質(zhì)量體積比為1g：(10～31)mL。
4.根據(jù)權利要求1所述的銀耳多糖的提取方法，其特征在于：所述步驟(1)中，超聲提取時間為80～120min。
5.根據(jù)權利要求1所述的銀耳多糖的提取方法，其特征在于：所述低共熔溶劑中，氫鍵受體與氫鍵供體的摩爾比為1：(0.5～2)。
6.根據(jù)權利要求1所述的銀耳多糖的提取方法，其特征在于：所述低共熔溶劑中水的質(zhì)量百分數(shù)為55～70％。
7.根據(jù)權利要求1所述的銀耳多糖的提取方法，其特征在于：所述低共熔溶劑為摩爾比為1：
8.根據(jù)權利要求1所述的銀耳多糖的提取方法，其特征在于：所述步驟(2)中的純化步驟為：將醇沉后的固體在層析
9.一種銀耳多糖，其特征在于：所述銀耳多糖采用權利要求1～8任一項所述的銀耳多糖的提取方法提取得到；所述銀耳多糖的數(shù)均分子量為13000～14000Da。
10.權利要求1～8任一項所述的銀耳多糖的提取方法提取得到的銀耳多糖在制備治療慢性阻塞性肺疾病的藥物中的應用。
...【技術特征摘要】
1.一種銀耳多糖的提取方法，其特征在于：包括以下步驟：
2.根據(jù)權利要求1所述的銀耳多糖的提取方法，其特征在于：所述氫鍵受體選自氯化膽堿；所述氫鍵供體選自乙二醇、甘油、1,4-丁二醇、尿素、檸檬酸、dl-乳酸、脯氨酸、蘋果酸、丙二醇中的至少一種。
3.根據(jù)權利要求1所述的銀耳多糖的提取方法，其特征在于：所述步驟(1)中，銀耳與低共熔溶劑的質(zhì)量體積比為1g：(10～31)ml。
4.根據(jù)權利要求1所述的銀耳多糖的提取方法，其特征在于：所述步驟(1)中，超聲提取時間為80～120min。
5.根據(jù)權利要求1所述的銀耳多糖的提取方法，其特征在于：所述低共熔溶劑中，氫鍵受體與氫鍵供體的摩爾比為1：(0.5～2)。
6.根據(jù)權利要求1所述...
【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：羅珍，王凱，劉瑜彬，吳吉莉，張聚洋，
申請(專利權)人：無限極中國有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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