【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及基因工程，特別涉及一個(gè)大豆非受體酪氨酸激酶結(jié)合蛋白基因 gmabil2及其應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、土壤鹽堿化是影響全球農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、生態(tài)環(huán)境以及糧食安全的重要因素之一。根據(jù)糧農(nóng)組織（fao）統(tǒng)計(jì)，全世界鹽堿地面積為9.54億hm2；其中，我國(guó)鹽漬土、潛在鹽漬化土壤分布面積約為9913萬(wàn)hm2。鹽堿地因含有高濃度na+、co32-和hco3-等離子，對(duì)植物根系產(chǎn)生直接毒害作用，使得根系細(xì)胞難以吸收土壤中的水分進(jìn)而導(dǎo)致植物死亡，極大的降低了我國(guó)農(nóng)作物的產(chǎn)量，給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來(lái)了巨大的影響。因此，提高作物耐鹽堿性，培育耐鹽堿作物新品種具有重要的意義。
2、大豆起源于我國(guó)，是我國(guó)重要的糧食、油料和飼料兼用型作物，在國(guó)民經(jīng)濟(jì)發(fā)展和保障國(guó)家糧食與食品安全中占有重要地位。大豆屬于中度鹽堿敏感型作物；在鹽堿脅迫條件下，大豆產(chǎn)量可嚴(yán)重降低50%，對(duì)我國(guó)大豆產(chǎn)量造成嚴(yán)重影響。因此，挖掘大豆鹽堿相關(guān)重要基因，并解析其調(diào)控網(wǎng)絡(luò)及遺傳基礎(chǔ)，培育耐鹽堿大豆新品種（系），對(duì)促進(jìn)我國(guó)大豆產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重要研究意義。
3、有研究報(bào)道非受體酪氨酸激酶結(jié)合蛋白基因 gmabil2可以通過影響根系生長(zhǎng)進(jìn)而調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育。?但是，有關(guān)該基因在植物逆境中的研究較少，在大豆耐鹽堿方面的功能研究更是尚未見報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的上述缺陷，本專利技術(shù)提出一個(gè)大豆非受體酪氨酸激酶結(jié)合蛋白基因
2、為達(dá)到上述目的，本專利技術(shù)提供如下技術(shù)方案：
3、非受體酪氨酸激酶結(jié)合蛋白基因 gmabil2在調(diào)控植物耐鹽堿脅迫中的應(yīng)用，所述 gmabil2的核苷酸序列如seq?id?no:1所示。
4、優(yōu)選地，所述 gmabil2的氨基酸序列如seq?id?no:2所示。
5、優(yōu)選地，通過超表達(dá)所述的非受體酪氨酸激酶結(jié)合蛋白基因 gmabil2降低植物耐鹽堿脅迫能力。
6、優(yōu)選地，所述植物為大豆或擬南芥中的一種。
7、優(yōu)選地，非受體酪氨酸激酶結(jié)合蛋白基因 gmabil2定位在線粒體。
8、優(yōu)選地， gmabil2能抑制大豆發(fā)根生長(zhǎng)和擬南芥萌發(fā)。
9、優(yōu)選地，鹽堿脅迫的條件為148mm?nahco3+2mm?nacl或146mm?nahco3+4mm?nacl或100mm?nacl+95mm?nahco3+5mm?na2co3中的一種。
10、優(yōu)選地，一種培育不耐鹽堿脅迫大豆的方法，包括以下步驟：
11、（1）將非受體酪氨酸激酶結(jié)合蛋白基因 gmabil2連接到載體中，得到表達(dá)載體；
12、（2）將步驟（1）得到的表達(dá)載體采用電導(dǎo)法轉(zhuǎn)入到農(nóng)桿菌中，得到重組菌；
13、（3）將步驟（2）得到的重組菌采用高效瞬時(shí)侵染技術(shù)侵染大豆，得到不耐鹽堿脅迫大豆。
14、優(yōu)選地，步驟（1）所述載體為pcambia3301載體。
15、優(yōu)選地，步驟（2）所述農(nóng)桿菌包括農(nóng)桿菌eha105或發(fā)根農(nóng)桿菌k599。
16、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)的有益效果是：
17、本申請(qǐng)人前期利用栽培大豆苗期耐鹽堿表型鑒定及全基因組關(guān)聯(lián)分析手段挖掘到大豆鹽堿相關(guān)候選基因并鑒定其是否具有提高植物鹽堿耐受性的功能，在此基礎(chǔ)上，本專利技術(shù)公開了一種大豆非受體酪氨酸激酶結(jié)合蛋白基因 gmabil2，并利用擬南芥及大豆發(fā)根體系明確該蛋白受鹽堿脅迫誘導(dǎo)且具有降低大豆苗期鹽堿耐受性的生物學(xué)功能，為進(jìn)一步豐富我國(guó)大豆鹽堿調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的作用機(jī)制提供理論依據(jù)。
本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.非受體酪氨酸激酶結(jié)合蛋白基因GmABIL2在調(diào)控植物耐鹽堿脅迫中的應(yīng)用，其特征在于，所述GmABIL2的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示;
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述GmABIL2的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，通過超表達(dá)權(quán)利要求1所述的非受體酪氨酸激酶結(jié)合蛋白基因GmABIL2降低植物耐鹽堿脅迫能力。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，非受體酪氨酸激酶結(jié)合蛋白基因GmABIL2定位在線粒體。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，GmABIL2能抑制大豆發(fā)根生長(zhǎng)和擬南芥萌發(fā)。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，鹽堿脅迫的條件為148mM?NaHCO3+2mM?NaCl或146mM?NaHCO3+4mM?NaCl或100mM?NaCl+95mM?NaHCO3+5mM?Na2CO3中的一種。
7.一種培育不耐鹽堿脅迫大豆的方法，其特征在于，包括以下步驟：
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，步驟（2）所述農(nóng)桿菌包括農(nóng)桿菌EHA105或發(fā)根農(nóng)桿菌K599。
...【技術(shù)特征摘要】
1.非受體酪氨酸激酶結(jié)合蛋白基因gmabil2在調(diào)控植物耐鹽堿脅迫中的應(yīng)用，其特征在于，所述gmabil2的核苷酸序列如seq?id?no:1所示;
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述gmabil2的氨基酸序列如seq?id?no:2所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，通過超表達(dá)權(quán)利要求1所述的非受體酪氨酸激酶結(jié)合蛋白基因gmabil2降低植物耐鹽堿脅迫能力。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，非受體酪氨酸激酶結(jié)合蛋白基因gmabil2定位在線粒體。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，g...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：高紅桃，李海燕，吳菲菲，周永剛，李雅忻，許克恒，張引鶴，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：海南大學(xué)三亞南繁研究院，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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