【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及外泌體提取，具體涉及一種可替換外泌體提取芯片。
技術介紹
1、外泌體已被證實可用于多種疾病的早期診斷，而對于該過程提取中最關鍵的步驟即是外泌體的分離和收集。目前，常用外泌體分離主要有以下幾種方法：
2、1、超速離心法：通過增加離心力或離心時間，分離沉淀或上清的方法來提取，適用于大體積樣本中外泌體的分離，但可能會導致部分外泌體產生機械損傷，破壞外泌體結構，導致樣本中外泌體與其他非晶顆粒的聚集和共沉淀，甚至導致外泌體的破裂或與污染物以及其他蛋白質融合；
3、2、密度梯度離心法：將細胞混合懸液或勻漿置于蔗糖介質的頂部，通過離心力的作用使細胞分層、分離，將外泌體從混雜物質中分離出來，然后使用濾膜進一步純化，前期準備工作繁瑣、操作復雜耗時長；
4、3、尺寸排阻法：采用尺寸排阻sec原理按照分子粒徑進行分段分離，通過色譜分離的外泌體不受剪切力的影響，這可能會改變囊泡的結構；
5、4、基于peg聚合物的沉淀技術：將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合，在4℃溫育并低速離心，提取純度不夠，且聚合物材料的混雜可能會影響下游分析。
6、基于上述問題，本專利技術提出一種高效率、高通量的外泌體提取芯片，通過簡單操作即可實現從樣品溶液中分離外泌體，不僅有效彌補現有技術的不足，還能實現外泌體的快速提取，對疾病的早期診斷具有重要意義。
技術實現思路
1、本專利技術意在提供一種可替換外泌體提取芯片，以解決現有外泌體提取的步驟繁雜，效率較低的技術問題
2、為達到上述目的，本專利技術采用如下技術方案：一種可替換外泌體提取芯片，包括可拆卸連接的上蓋和下蓋，所述上蓋設有進液口，下蓋設有出液口；所述下蓋內依次設有密封圈、緩沖墊片、濾膜和下端襯片，所述緩沖墊片設有若干緩沖孔，下端襯片設有若干過濾孔。
3、本方案的原理是：
4、首先，密封圈、緩沖墊片、濾膜和下端襯片按照從上至下的順序置于下蓋內，再將上蓋與下蓋旋轉扣緊，將密封圈、緩沖墊片、濾膜和下端襯片抵緊在上蓋和下蓋的端面之間，實現提取芯片的組裝，其中，緩沖墊片和下端襯片分立濾膜兩側，有效固定繃緊濾膜。隨后，將待提取樣本由進液口注入提取芯片，樣品中外泌體被阻擋收集在濾膜上，液體和其他雜質則透過濾膜自出液口排出，出液口外接離心管或其他液體收集裝置即可收集。然后，旋開上蓋和下蓋，取出密封圈和緩沖墊，以生理鹽水清洗濾膜表面，收集外泌體溶液，提取和濃縮獲得外泌體。
5、本方案的優點是：
6、1、相比于現有外泌體提取的設備較大、步驟繁雜而影響效率而言，本方案的外泌體提取芯片尺寸小巧，方便攜帶；且提取時只需將樣本液體由進液口注入提取芯片，即可將外泌體收集在濾膜上，實現外泌體的提取，操作方便，有效提升外泌體提取效率。
7、2、本方案外泌體提取芯片中，可根據生物樣本種類及所需外泌體尺寸大小，預選相應尺寸的適配濾膜進行安裝，有效實現多種類型外泌體的提取，有效滿足不同情形下的外泌體提取需求。
8、3、相比于現有設備較大使得需要將多次采取的樣本集中處理而降低樣品處理及時性而言，本方案的提取芯片結構小巧，能對小樣本、單個樣品進行外泌體的提取處理，有效提升樣品提取及時性，避免樣品采集后未及時提取導致的樣品中外泌體聚集沉淀、被酶類降解或破壞等，從而有效提升外泌體提取得率和完整性。
9、4、本方案通過在濾膜上方設置緩沖墊片，有效緩解提取樣本注入時對濾膜的沖擊，保證濾膜的完整，對小于外泌體粒徑的雜質進行有效過濾，提升外泌體純度；且設置緩沖墊片使得本方案提取芯片提取外泌體時更為柔和，有效避免外泌體破裂，提升所得外泌體的完整性。申請人還通過長期實驗發現，若不設置緩沖墊片，在組裝提取芯片時，旋緊上蓋時，密封圈可能隨上蓋一起旋轉，使得與密封圈直接接觸的濾膜表面產生結構性損傷(如出現褶皺、破損等)，已損傷表面可能導致濾膜孔徑增大、濾膜孔徑破裂、濾膜裂開等情況，使得部分上游液體未通過有效過濾，外泌體混雜進入濾過液體中，降低外泌體得率。而設置下端襯片不僅保證了濾膜在實驗過程中的穩定性，同時保證了過濾后的液體平穩有序的流出出液口。
10、優選的，作為一種改進，密封圈、緩沖墊片和濾膜均與下蓋間隙連接。
11、技術效果：本方案采用上述設置，便于拆卸后完全洗脫濾膜上的外泌體，也便于更換濾膜。
12、優選的，作為一種改進，所述下蓋和下端襯片固定連接或可拆卸連接。
13、技術效果：本方案采用上述設置，便于適應多種材質、多種成型工藝的部件組裝為提取芯片。其中，固定連接的成型工藝可為一體成型或焊接(如金屬材料)，可拆卸連接的部件為分體成型。若外泌體提取芯片通體為金屬材料，則下端襯片與下蓋一體成型或焊接為一體，也可分體成型后組裝；而若是外泌體提取芯片通體為高分子材料(塑料等)、復合材料時，可選分體成型，便于在下端襯片損壞后即使更換，延長提取芯片整體使用壽命。
14、優選的，作為一種改進，當下蓋和下端襯片可拆卸連接時，下端襯片和下蓋之間設有橡膠墊片。
15、技術效果：本方案采用上述設置，一方面是保證整個芯片的設計過程中保有更多位置變化余量；二是給予下端襯片彈性支撐作用，避免其與下蓋分體成型是兩者之間存在孔隙而產生位移，進而帶動濾膜移動而影響濾膜對外泌體的提取效果；三是便于更換時清洗、拆卸和更換。
16、優選的，作為一種改進，下蓋底部可為平面或錐形；當下蓋底部為平面時，橡膠墊片直接抵住下蓋底部平面；當下蓋底部為錐形時，下蓋側壁設有用于抵住橡膠墊片的環形臺階，實現對橡膠墊片的支撐。
17、有益效果，采用上述設置，便于實現下蓋對橡膠墊片的支撐。
18、優選的，作為一種改進，所述上蓋和下蓋之間螺紋連接，上蓋設有內螺紋，下蓋設有外螺紋。
19、技術效果：本方案采用上述設置，便于快速旋緊和拆卸上蓋與下蓋，便于操作。
20、優選的，作為一種改進，所述上蓋和下蓋外壁均設有防滑柵欄。
21、技術效果：本方案采用上述設置，便于旋緊上蓋和下蓋時防滑，提升兩者連接緊密性。
22、優選的，作為一種改進，所述緩沖孔的孔徑大于過濾孔的孔徑。
23、技術效果：本方案采用上述設置，便于導流樣品自大孔徑流向小孔徑，提升液體流動速度，提升提取效率。
24、優選的，作為一種改進，所述緩沖孔和過濾孔均為錐形孔，錐形孔的孔徑沿著液體流動方向逐漸減小。
25、技術效果：本方案采用上述設置，錐形孔便于導流提取樣本流動方向，且能增加液流壓力，加快樣本中液體部分穿透濾膜，進一步提升外泌體提升效率。
26、優選的，作為一種改進，緩沖孔區域的直徑小于過濾孔區域的直徑。
27、技術效果：本方案采用上述設置，便于進一步導流提取樣本的移動方向，提升液流壓力，加快樣本中液體部分穿透濾膜，提升外泌體提取效率。
28、優選的，作為一種改進，所述緩沖墊片和下端襯片的中本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種可替換外泌體提取芯片，其特征在于：包括可拆卸連接的上蓋和下蓋，所述上蓋設有進液口，下蓋設有出液口；所述下蓋內依次設有密封圈、緩沖墊片、濾膜和下端襯片，所述緩沖墊片設有若干緩沖孔，下端襯片設有若干過濾孔。
2.根據權利要求1所述的一種可替換外泌體提取芯片，其特征在于：密封圈、緩沖墊片和濾膜均與下蓋間隙連接。
3.根據權利要求1所述的一種可替換外泌體提取芯片，其特征在于：所述下蓋和下端襯片固定連接或可拆卸連接，當下蓋和下端襯片可拆卸連接時，下端襯片和下蓋之間設有橡膠墊片。
4.根據權利要求1所述的一種可替換外泌體提取芯片，其特征在于：所述上蓋和下蓋之間螺紋連接，上蓋設有內螺紋，下蓋設有外螺紋。
5.根據權利要求4所述的一種可替換外泌體提取芯片，其特征在于：所述上蓋和下蓋外壁均設有防滑柵欄。
6.根據權利要求1所述的一種可替換外泌體提取芯片，其特征在于：所述緩沖孔的孔徑大于過濾孔的孔徑。
7.根據權利要求6所述的一種可替換外泌體提取芯片，其特征在于：所述緩沖孔和過濾孔均為錐形孔，錐形孔的孔徑沿著液體流動方向
8.根據權利要求6所述的一種可替換外泌體提取芯片，其特征在于：緩沖孔區域的直徑小于過濾孔區域的直徑。
9.根據權利要求6所述的一種可替換外泌體提取芯片，其特征在于：所述緩沖墊片和下端襯片的中心均向下蓋的方向凹陷。
10.本方案還提供一種可替換外泌體提取芯片的使用方法，包括如下步驟：
...【技術特征摘要】
1.一種可替換外泌體提取芯片，其特征在于：包括可拆卸連接的上蓋和下蓋，所述上蓋設有進液口，下蓋設有出液口；所述下蓋內依次設有密封圈、緩沖墊片、濾膜和下端襯片，所述緩沖墊片設有若干緩沖孔，下端襯片設有若干過濾孔。
2.根據權利要求1所述的一種可替換外泌體提取芯片，其特征在于：密封圈、緩沖墊片和濾膜均與下蓋間隙連接。
3.根據權利要求1所述的一種可替換外泌體提取芯片，其特征在于：所述下蓋和下端襯片固定連接或可拆卸連接，當下蓋和下端襯片可拆卸連接時，下端襯片和下蓋之間設有橡膠墊片。
4.根據權利要求1所述的一種可替換外泌體提取芯片，其特征在于：所述上蓋和下蓋之間螺紋連接，上蓋設有內螺紋，下蓋設有外螺紋。
5.根據...
【專利技術屬性】
技術研發人員：王睿，楊偵，謝海瓊，石浩志，
申請(專利權)人：重慶生物智能制造研究院，
類型：發明
國別省市：
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