【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于生物醫藥和分子生物學，具體涉及谷氨酸酶及其相關生物元件在梅尼埃病診治中的應用。
技術介紹
1、本專利技術
技術介紹
中公開的信息僅僅旨在增加對本專利技術的總體背景的理解，而不必然被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已經成為本領域一般技術人員所公知的現有技術。
2、梅尼埃病是一種常見且復雜的內耳疾病，該病的特征包括發作性眩暈、波動性感音神經性聽力損失、耳鳴和/或耳漲滿感，其病理表現是內淋巴積水，這可能是由于內淋巴囊對內淋巴液重吸收減弱所致。最近的研究表明，自身免疫炎癥、過敏和免疫反應與梅尼埃病的發生和進展有關。
3、關于梅尼埃病的以往研究采用了多種方法來解釋其病理機制和分子機制。對外周血單個核細胞的rna測序研究表明，梅尼埃病與免疫通路相關，而對前庭器官的轉錄組分析顯示，梅尼埃病與神經病變和自身免疫疾病之間存在密切關聯。針對患者的蛋白質組學研究發現，血漿中補體因子h的過表達，以及在外淋巴液中的特定蛋白質分布，突顯了梅尼埃病與炎癥性疾病、能量代謝、發育障礙和細胞間信號傳遞的關系。然而，既往蛋白質組學研究中使用血漿和外淋巴液可能無法完全捕捉內耳組織中的變化。由于內耳結構位于顳骨深處，且體積較小，難以獲取及分析，因此對人類內耳疾病的分子變化了解有限。梅尼埃病患者表現出不同程度的前庭功能障礙，其確切病變部位及其分子機制仍不清楚。
4、谷氨酸的興奮性毒性是一種病理過程，通過過量釋放谷氨酸及其類似物引起神經元的改變和損傷，這種情況發生在缺血、阿爾茨海默病和多發性硬化。研究表明，谷氨酸在耳蝸突觸損傷
技術實現思路
1、針對上述現有技術的不足，本專利技術的目的在于提供谷氨酸酶及其相關生物元件在梅尼埃病診治中的應用。具體的，本專利技術通過研究發現，il-1β通過上調hei-oc1細胞中的谷氨酸酶表達增加谷氨酸水平。使用谷氨酰胺酶抑制劑或il-1β受體拮抗劑治療可緩解內淋巴積水小鼠的聽覺-前庭功能障礙，并降低其谷氨酸水平。總之，本專利技術的研究證明了神經遞質釋放失衡和免疫反應可能導致梅尼埃病的病理，可能解釋與該疾病相關的聽力損失和眩暈，并為診斷和治療提供了新的途徑。
2、具體的，本專利技術的技術方案如下：
3、本專利技術的第一個方面，提供檢測谷氨酸酶及其相關生物元件表達水平的物質在制備梅尼埃病的篩查、診斷、監測或預后的產品中的應用。
4、其中，所述谷氨酸酶相關生物元件包括il-1β和谷氨酸。
5、具體的，本專利技術通過研究發現，梅尼埃病患者的前庭器官中谷氨酰胺酶的mrna和蛋白質水平顯著增加，進一步研究表明il-1β上調內耳中谷氨酰胺酶的表達，導致谷氨酸水平升高，誘導神經變性，從而損害聽覺-前庭系統的功能，介導梅尼埃病的發生。因此，上述谷氨酸酶及其相關生物元件可作為梅尼埃病的(輔助)診斷以及預后標志物。
6、所述檢測谷氨酸酶及其相關生物元件表達水平的物質可以包括基于實時熒光定量pcr、原位雜交、基因芯片和基因測序檢測谷氨酸酶編碼基因表達水平時所需的試劑，基于免疫檢測方法檢測il-1β表達水平時所需的試劑，和/或基于色譜法、質譜法、光譜法、生物法等檢測谷氨酸時所需的試劑。
7、所述產品包括但不限于檢測谷氨酸酶及其相關生物元件表達水平的引物、探針、(基因或蛋白)芯片、核酸膜條、檢測試劑盒、檢測裝置和檢測設備等。
8、本專利技術的第二個方面，提供一種用于梅尼埃病的篩查、診斷、監測或預后的系統，所述系統包括：
9、獲取模塊，其被配置為：獲取受試者待測樣品中谷氨酸酶及其相關生物元件的表達水平情況；
10、評估模塊，其被配置為：根據獲取模塊獲得的受試者谷氨酸酶及其相關生物元件對所述受試者的患病情況進行評估判斷。
11、其中，所述谷氨酸酶相關生物元件包括il-1β和谷氨酸。
12、所述待測樣品可以是受試者的內耳組織樣本和外周血。
13、本專利技術的第三個方面，提供谷氨酸酶及其相關生物元件作為靶點在制備和/或篩選梅尼埃病藥物中的應用。
14、具體的，可以利用候選藥物使用前和使用后對谷氨酸酶及其相關生物元件的影響，從而確定候選藥物是否可以用于預防或治療梅尼埃病。
15、具體的，篩選預防或治療梅尼埃病的藥物的方法包括：
16、a)采用候選物質處理表達和/或含有谷氨酸酶及其相關生物元件的體系；設置不采用候選物質處理的平行對照；
17、b)完成步驟a)后，檢測體系中所述谷氨酸酶及其相關生物元件的表達水平；與平行對照相比，若采用候選物質處理的體系中谷氨酸酶及其相關生物元件的表達量顯著下調，所述候選物質可作為候選的預防或治療梅尼埃病的藥物。
18、其中，所述谷氨酸酶相關生物元件包括il-1β和谷氨酸。
19、所述體系可為細胞體系、溶液體系、組織體系、器官體系或動物體系，在此不做具體限定。
20、其中，細胞體系中所述細胞可以為hei-oc1細胞；
21、器官體系中所述器官可以為耳，耳作為重要的的聽覺和平衡器官，由外耳、中耳和內耳三個部分組成。其中，內耳則是聽覺和平衡覺的主要器官，包括前庭、耳蝸和半規管。亦是本專利技術研究的重點。
22、動物體現包括人和非人動物，所述非人動物為哺乳動物，如大鼠、小鼠、豚鼠、兔、豬、狗、猴、猩猩等，在此不做具體限定。
23、本專利技術的第四個方面，提供抑制谷氨酸酶及其相關生物元件表達或使其活性降低的物質在如下任意一種或多種中的應用：
24、a)制備減輕耳蝸突觸損傷的產品；
25、b)緩解內淋巴積水介導的聽覺-前庭功能障礙的產品；
26、c)預防和/或治療梅尼埃病的產品。
27、其中，抑制谷氨酸酶及其相關生物元件的物質可以為包括但不限于針對谷氨酸酶及其相關生物元件的rna干擾分子或反義寡核苷酸、小分子抑制劑、拮抗劑、sirna(seq?idno.1-2)、shrna，實施慢病毒感染或基因敲除的物質、抗體等，在此不做具體限定。
28、在本專利技術的一個具體實施方式中，所述抑制谷氨酸酶及其相關生物元件表達或使其活性降低的物質包括谷氨酰胺酶抑制劑cb-839(cas：1439399-58-2)和白細胞介素-1β受體抑制劑阿那白滯素(cas：143090-92-0)。
29、所述產品可以為藥物或者非醫藥用途的實驗試劑，所述實驗試劑可供基礎研究使用。比如該產品可用于調控內淋巴積水實驗動物的相關表型，從而制備相關動物模型，從而為梅尼埃病等疾病的機制研究提供便利條件。
30、根據本專利技術，當所述產品為藥物時，所述藥物還包括至少一種藥物非活性成分。<本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.檢測谷氨酸酶及其相關生物元件表達水平的物質在制備梅尼埃病的篩查、診斷、監測或預后的產品中的應用；其中，所述谷氨酸酶相關生物元件包括IL-1β和谷氨酸。
2.如權利要求1所述應用，其特征在于，所述檢測谷氨酸酶及其相關生物元件表達水平的物質包括基于實時熒光定量PCR、原位雜交、基因芯片和基因測序檢測谷氨酸酶編碼基因表達水平時所需的試劑，基于免疫檢測方法檢測IL-1β表達水平時所需的試劑，和/或基于色譜法、質譜法、光譜法、生物法檢測谷氨酸時所需的試劑；
3.一種用于梅尼埃病的篩查、診斷、監測或預后的系統，其特征在于，所述系統包括：
4.如權利要求3所述應用，其特征在于，所述待測樣品包括受試者的內耳組織樣本。
5.谷氨酸酶及其相關生物元件作為靶點在制備和/或篩選梅尼埃病藥物中的應用；其中，所述谷氨酸酶相關生物元件包括IL-1β和谷氨酸。
6.如權利要求5所述應用，其特征在于，篩選預防或治療梅尼埃病的藥物的方法包括：
7.如權利要求6所述應用，其特征在于，所述體系為細胞體系、溶液體系、組織體系、器官體系或動物體系。
8.抑制谷氨酸酶及其相關生物元件表達或使其活性降低的物質在如下任意一種或多種中的應用，所述谷氨酸酶相關生物元件包括IL-1β和谷氨酸：
9.如權利要求8所述應用，其特征在于，所述抑制谷氨酸酶及其相關生物元件的物質包括但不限于針對谷氨酸酶及其相關生物元件的RNA干擾分子或反義寡核苷酸、小分子抑制劑、拮抗劑、siRNA(SEQ?ID?NO.1-2)、shRNA，實施慢病毒感染或基因敲除的物質、抗體。
10.如權利要求9所述應用，其特征在于，所述抑制谷氨酸酶及其相關生物元件表達或使其活性降低的物質包括谷氨酰胺酶抑制劑CB-839和白細胞介素-1β受體抑制劑阿那白滯素。
...【技術特征摘要】
1.檢測谷氨酸酶及其相關生物元件表達水平的物質在制備梅尼埃病的篩查、診斷、監測或預后的產品中的應用；其中，所述谷氨酸酶相關生物元件包括il-1β和谷氨酸。
2.如權利要求1所述應用，其特征在于，所述檢測谷氨酸酶及其相關生物元件表達水平的物質包括基于實時熒光定量pcr、原位雜交、基因芯片和基因測序檢測谷氨酸酶編碼基因表達水平時所需的試劑，基于免疫檢測方法檢測il-1β表達水平時所需的試劑，和/或基于色譜法、質譜法、光譜法、生物法檢測谷氨酸時所需的試劑；
3.一種用于梅尼埃病的篩查、診斷、監測或預后的系統，其特征在于，所述系統包括：
4.如權利要求3所述應用，其特征在于，所述待測樣品包括受試者的內耳組織樣本。
5.谷氨酸酶及其相關生物元件作為靶點在制備和/或篩選梅尼埃病藥物中的應用；其中，所述谷氨酸酶相關生物元件包括il-1β和谷氨酸。
<...【專利技術屬性】
技術研發人員：李娜，張娜，張道宮，宋永棟，李霄飛，呂亞峰，劉佳慧，慕雨容，王寒悅，
申請(專利權)人：山東省第二人民醫院山東省耳鼻喉醫院，山東省耳鼻喉研究所，
類型：發明
國別省市：
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