【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及牙周病學(xué)領(lǐng)域，特別是涉及一種用于研究牙周炎及其伴隨感染性疾病發(fā)病機(jī)制的動(dòng)物模型構(gòu)建方法，具體是一種牙周炎大鼠模型的構(gòu)建方法及其在牙周炎相關(guān)疾病研究中的應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、慢性牙周炎（chronic?periodontitis，cp）是一種慢性感染性疾病，是成人牙齒喪失的首要原因，在世界范圍內(nèi)均有較高的發(fā)病率。根據(jù)第四次全國(guó)口腔健康流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，我國(guó)?35-44?歲成年人牙石檢出率為?96.7%?，牙齦出血檢出率達(dá)到?87.4%?，較十年前?77.3%相比增長(zhǎng)了?10.1%?，且患病率和嚴(yán)重程度隨著年齡增長(zhǎng)而增高加重。
2、牙齦卟啉單胞菌（ porphyromonas?gingivalis，p.?gingivalis）是cp的主要致病菌，具有激活宿主炎癥、調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的能力。齒垢密螺旋體（ treponema?denticola,?t.? denticola）作為重要的橋梁菌，不僅可以與鏈球菌屬（ streptococcus）及放線菌屬（ actinomycetes）等早期定植菌結(jié)合定植于牙面，也可以與后繼的 p.?gingivalis、福賽坦氏菌（ tannerella?forsythia,?t.?forsythia）、具核梭桿菌（ fusobacterium?nuclea
3、現(xiàn)有技術(shù)中已有研究涉及牙周炎模型的構(gòu)建，如論文《th1/th2型細(xì)胞應(yīng)答對(duì)小鼠牙周炎免疫調(diào)節(jié)作用的實(shí)驗(yàn)研究》（中國(guó)知網(wǎng)：謝敏.th1/th2型細(xì)胞應(yīng)答對(duì)小鼠牙周炎免疫調(diào)節(jié)作用的實(shí)驗(yàn)研究[d].暨南大學(xué),2008.）中公開(kāi)了先采用絲線結(jié)扎加局部涂菌的方法建立小鼠牙周炎動(dòng)物模型，并進(jìn)一步感染紫外線減毒t.?gondii以探討機(jī)體免疫反應(yīng)與牙周炎的關(guān)系。但此類方法采用牙周炎患者的細(xì)菌進(jìn)行感染，而不同牙周炎病人的牙結(jié)石中菌種的比例、濃度均不同，因此采用源于病人的菌種感染無(wú)法做到標(biāo)準(zhǔn)化以滿足高成功率、高穩(wěn)定性的造模。此外，現(xiàn)有技術(shù)雖已知諸多牙周炎致病菌，但不同菌的性質(zhì)差異較大，且作用于同一主體也會(huì)相互影響，因此組合感染后的效果可預(yù)期性差。
4、大鼠作為疾病發(fā)生機(jī)制、藥物代謝及藥代動(dòng)力學(xué)研究中應(yīng)用廣泛的嚙齒類模式動(dòng)物，相對(duì)于小鼠具有很大的優(yōu)勢(shì)，如體型大容易操作，血量多耐受性強(qiáng)，可得樣本量多等。鑒于牙周炎的有效防治已成為國(guó)內(nèi)外學(xué)者關(guān)注的熱點(diǎn)，則高效、快速的構(gòu)建獲得牙周炎大鼠模型對(duì)于牙周炎疾病的研究和防治具有重要意義。本申請(qǐng)通過(guò)對(duì)牙周炎發(fā)病機(jī)制的研究，意外的發(fā)現(xiàn) p.?gingivalis、t.?denticola及 ?t.?gondii協(xié)同感染大鼠可快速、穩(wěn)定的獲得牙周炎大鼠動(dòng)物模型，容易操作且成功率高。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)目的是提供一種牙周炎大鼠的建模方法，旨在快速、高成功率的獲得牙周炎動(dòng)物模型便于研究和應(yīng)用。
2、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本專利技術(shù)采用的技術(shù)方案如下：
3、1. t.?gondii感染模型的建立：每只大鼠通過(guò)經(jīng)口灌胃的方式給予100個(gè)弓形蟲包囊，構(gòu)建 t.?gondii感染模型。
4、2.牙周炎模型的建立：通過(guò)上頜第一磨牙3-0絲線結(jié)扎并口內(nèi)涂抹 p.? gingivalis、 t.?denticola?來(lái)模擬牙周炎的發(fā)生。具體步驟包括大鼠麻醉、牙齒定位、絲線結(jié)扎以及牙周致病菌的接種。
5、3.牙周炎+ ?t.?gondii感染大鼠復(fù)合模型的建立：構(gòu)建 t.?gondii感染模型后再按照牙周炎模型的建立方法對(duì)已感染 t.?gondii的大鼠進(jìn)行操作，最終構(gòu)建牙周炎大鼠模型。
6、4.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物被隨機(jī)分為多組。
7、(1)空白對(duì)照組：既沒(méi)有絲線結(jié)扎也沒(méi)有牙周致病菌和 t.?gondii感染。
8、(2)牙周炎組：進(jìn)行上頜第一磨牙絲線結(jié)扎+牙周致病菌感染。
9、(3)弓形蟲組：進(jìn)行弓形蟲感染后進(jìn)行上頜第一磨牙絲線結(jié)扎。
10、(4)牙周炎+弓形蟲組：進(jìn)行 t.?gondii感染后進(jìn)行上頜第一磨牙絲線結(jié)扎+牙周致病菌感染。
11、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)的有益效果具體體現(xiàn)在：
12、1）本專利技術(shù)通過(guò)使用 p.?gingivalis與 t.?denticola及 t.?gondii共同感染大鼠，僅耗時(shí)7天就成功獲得了牙周炎大鼠模型，建立的牙周炎大鼠模型牙齦乳頭水腫，牙齦緣與牙面無(wú)法貼合，質(zhì)地松軟，且均有出血及牙周袋現(xiàn)象，并隨著程度的加深會(huì)導(dǎo)致牙齒松動(dòng)甚至牙根暴露等狀況，與人類牙周炎癥狀體征及病理過(guò)程相符，并能反映牙周炎的系統(tǒng)性和嚴(yán)重程度，而現(xiàn)有技術(shù)中相似程度牙周炎模型的建模時(shí)間通常需要一個(gè)月左右，可見(jiàn)，本專利技術(shù)的構(gòu)建方法極大程度的減少了建模時(shí)間。
13、2）本專利技術(shù)通過(guò)篩選常見(jiàn)牙周炎致病菌的不同組合不僅短時(shí)間內(nèi)成功獲得了牙周炎大鼠模型，且該方法具有成功率高、可控性好、穩(wěn)定性佳等優(yōu)勢(shì)，可用于研究牙周炎的發(fā)展機(jī)制及防治過(guò)程。
本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種牙周炎大鼠模型的建立方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述牙周炎大鼠模型的建立方法，其特征在于，所述大鼠體重范圍為200±20?g。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述牙周炎大鼠模型的建立方法，其特征在于，所述方法進(jìn)一步包括：在建模成功后對(duì)步驟（4）處理后的大鼠進(jìn)行口腔、影像學(xué)及病理學(xué)檢查的步驟。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述牙周炎大鼠模型的建立方法，其特征在于，所述口腔、影像學(xué)及病理學(xué)檢查的步驟如下：
5.采用權(quán)利要求1-4任一所述建立方法獲得的大鼠模型在牙周炎發(fā)生的機(jī)制研究中應(yīng)用。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種牙周炎大鼠模型的建立方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述牙周炎大鼠模型的建立方法，其特征在于，所述大鼠體重范圍為200±20?g。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述牙周炎大鼠模型的建立方法，其特征在于，所述方法進(jìn)一步包括：在建模成功...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：于淼，曹恒隆，林健鋒，韋婉儀，羅健釗，郭明詩(shī)，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：廣州醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院廣州醫(yī)科大學(xué)羊城醫(yī)院，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：
還沒(méi)有人留言評(píng)論。發(fā)表了對(duì)其他瀏覽者有用的留言會(huì)獲得科技券。