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    一種小球藻突變株及其在EPA、DHA生產中的應用制造技術

    技術編號:44287835 閱讀:8 留言:0更新日期:2025-02-14 22:22
    本發明專利技術提供了一種小球藻突變株及其在EPA、DHA生產中的應用,屬于微藻生物技術領域。本發明專利技術提供的小球藻(Chlorella?sp.)突變株M41,保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏日期為2024年10月18日,保藏編號為CGMCC?No?46154。本發明專利技術還進一步提供了適用于小球藻突變株M41的培養基和生產方法,實現了EPA、DHA的高產。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術屬于微藻生物,具體涉及一種小球藻突變株及其在epa、dha生產中的應用。


    技術介紹

    1、脂肪酸是動物重要的能量來源,支持機體進行其他活動,尤其是ω-3脂肪酸,如二十碳五烯酸(epa)和二十二碳六烯酸(dha)等,對動物的生長、發育、繁殖等過程影響重大,同時可以彌補動物自身免疫缺陷,減少有害的免疫反應,還具有改善血液循環,降血壓,改善血脂,抗炎等作用。目前,大部分epa和dha僅從深海魚的脂肪中獲取,存在產量較低,價格昂貴等問題,因此,如何實現高產epa和dha成了亟需解決的問題。

    2、微藻培養是一種前沿且可持續的生產方式,微藻可以通過光合作用制造油脂,同時微藻具有生長速度快、環境友好等特點,符合現代社會對可持續發展的要求。小球藻(chlorella?sp.)是一種常見的微藻,個體較小,藻細胞直徑大約為2~10μm,是目前用于生產油脂的微藻之一。但由于藻細胞中淀粉和油脂合成的前體存在競爭關系,且油脂與淀粉積累呈現負相關關系,小球藻產油脂的能力受到抑制。在此基礎上,本領域提出了淀粉合成缺陷型突變株的概念,限制小球藻淀粉合成通路,使其光合固定碳通過中心碳代謝盡可能多的合成為脂質。然而,淀粉合成缺陷型突變株小球藻普遍存在生物量低的現象,淀粉在小球藻中的積累通常是細胞生長和代謝的一個重要部分,當這種能力受損時,小球藻的整體生物量就會存在偏低現象,生物量偏低又進一步影響了光合色素和脂質的積累。因此,提供新的小球藻淀粉合成缺陷型突變株,提供小球藻高效合成epa、dha的光合微藻生物方法,是本領域亟需關鍵問題之一。


    技術實現思路

    1、為了解決現有技術中存在的問題,本專利技術的目的在于提供一種小球藻(chlorellasp.)突變株m41,保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號為cgmcc?no46154。

    2、本專利技術的目的還在于提供一種提高小球藻突變株m41的epa和/或dha產量的培養基以及高效合成epa和/或dha的方法,epa和dha含量分別可達到3.37μg/g和0.86μg/g。

    3、為了實現上述專利技術目的,本專利技術提供了以下技術方案:

    4、本專利技術提供了一種小球藻(chlorella?sp.)突變株m41,保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏日期為2024年10月18日,保藏編號為cgmcc?no?46154。

    5、本專利技術還提供了上述小球藻突變株m41在生產epa和/或dha中的應用。

    6、本專利技術還提供了一種提高上述小球藻突變株m41的epa和/或dha產量的培養基,所述培養基以限氮培養基為基礎培養基,在基礎培養基中添加乙酸,所述乙酸的添加量為200~1000μl/l。

    7、優選的,所述限氮培養基為限氮bg11培養基,所述限氮bg11培養基中nano3的含量為0.08~0.1g/l。

    8、優選的,所述培養基的ph為7~8。

    9、本專利技術還提供了一種利用上述小球藻突變株m41生產epa和/或dha的方法,包括以下步驟:上述小球藻接種到上述培養基中培養,從培養液中收集epa和/或dha。

    10、優選的,所述小球藻的接種量為1×106cell/ml~4×106cell/ml。

    11、優選的,所述培養的溫度為24~26℃,所述培養的光照強度為1400~1600lux,所述培養的光照時間為11~13h/d,所述培養的時間為7~9d。

    12、優選的,所述培養的過程中維持ph值為8.5~9.5。

    13、本專利技術還提供了上述培養基或上述方法在生產epa和/或dha中的應用。

    14、與現有技術相比,本專利技術的技術方案的有益效果如下:

    15、本專利技術提供的小球藻(chlorella?sp.)突變株m41在結構上表現出較小的細胞體積,具有限制性淀粉合成能力,于2024年10月18日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號為cgmcc?no?46154。

    16、本專利技術通過在限氮培養基中額外補充乙酸,使得淀粉合成缺陷型突變株從外界獲得的碳源(光合作用固定的碳及乙酸)高效轉化給油脂(epa和dha),同時乙酸具有酸性,在作為額外碳源添加的同時具有調節ph的作用,中和藻類在生長過程中由于光合作用釋放的oh-離子,使培養基的ph保持在適宜范圍內。本專利技術通過改良得到的培養基培養淀粉合成缺陷型小球藻,可以有效提高小球藻m41的epa和/或dha產量,使epa和dha含量分別可達到3.37μg/g和0.86μg/g,同比野生型分別增長了485.24%,160.70%。

    本文檔來自技高網
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    【技術保護點】

    1.一種小球藻(Chlorella?sp.)突變株M41,其特征在于,保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏日期為2024年10月18日,保藏編號為CGMCC?No?46154。

    2.權利要求1所述小球藻突變株在生產EPA和/或DHA中的應用。

    3.一種提高權利要求1所述小球藻突變株M41的EPA和/或DHA產量的培養基,其特征在于,所述培養基以限氮培養基為基礎培養基,在基礎培養基中添加乙酸,所述乙酸的添加量為200~1000μL/L。

    4.根據權利要求3所述的培養基,其特征在于,所述限氮培養基為限氮BG11培養基,所述限氮BG11培養基中NaNO3的含量為0.08~0.1g/L。

    5.根據權利要求3所述的培養基,其特征在于,所述培養基的pH為7~8。

    6.一種利用權利要求1所述小球藻突變株M41生產EPA和/或DHA的方法,其特征在于,包括以下步驟:權利要求1所述小球藻接種到權利要求3~5任意一項所述的培養基中培養,從培養液中收集EPA和/或DHA。

    7.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,所述小球藻的接種量為1×106~4×106cell/L。

    8.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,所述培養的溫度為24~26℃,所述培養的光照強度為1400~1600Lux,所述培養的光照時間為11~13h/d,所述培養的時間為7~9d。

    9.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,所述培養的過程中維持pH值為8.5~9.5。

    10.權利要求3~5任意一項所述的培養基或權利要求6~9任意一項所述的方法在生產EPA和/或DHA中的應用。

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    【技術特征摘要】

    1.一種小球藻(chlorella?sp.)突變株m41,其特征在于,保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏日期為2024年10月18日,保藏編號為cgmcc?no?46154。

    2.權利要求1所述小球藻突變株在生產epa和/或dha中的應用。

    3.一種提高權利要求1所述小球藻突變株m41的epa和/或dha產量的培養基,其特征在于,所述培養基以限氮培養基為基礎培養基,在基礎培養基中添加乙酸,所述乙酸的添加量為200~1000μl/l。

    4.根據權利要求3所述的培養基,其特征在于,所述限氮培養基為限氮bg11培養基,所述限氮bg11培養基中nano3的含量為0.08~0.1g/l。

    5.根據權利要求3所述的培養基,其特征在于,所述培養基的ph為7~8。

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:吳明燦張杰王鑫李艷昭吳貴春吳貴梅陸飛苗徐茹倩
    申請(專利權)人:大理大學
    類型:發明
    國別省市:

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