【技術實現步驟摘要】
本申請涉及羊傳染性病毒檢測，具體涉及檢測羊口瘡病毒和羊痘病毒的引物組、試劑盒、方法及應用。
技術介紹
1、羊痘又稱羊天花，是由痘病毒科羊痘病毒屬的羊痘病毒(capripox?virus,capv)引起的一種急性、熱性、高度接觸性人獸共患病。羊痘病毒包括羊口瘡病毒(goatpoxvirus，gtpv)和羊痘病毒(sheep?pox?virus，sppv)。當羊只感染capv，在口腔、眼睛及皮膚等部位會出現紅斑，進而硬化形成丘疹，丘疹在組織壞死后形成膿皰和結痂，當痘疹發生在呼吸道或消化道，可導致腹瀉、消瘦或咳嗽，還可能使懷孕母羊發生流產。羊口瘡又稱羊傳染性膿皰，是由痘病毒科副痘病毒屬的羊口瘡病毒(orfvirus,orfv)引起的一種嗜上皮性人獸共患病。capv和orfv的流行情況、傳播方式及臨床癥狀極為相似，且多為混合感染。
2、因此，有效檢測capv和orfv單獨感染或混合感染，對于確定羊傳染病的感染類型，對應進行傳染病的預防、治療及流行控制限定是十分必要。
技術實現思路
1、有鑒于此，本申請實施例提供了檢測羊口瘡病毒和羊痘病毒的引物組、試劑盒、方法及應用。
2、第一方面，實施例提供了檢測羊口瘡病毒和羊痘病毒的引物組，包括如seq?idno:1所示的o1、如seq?id?no:2所示的o2、如seq?id?no:3所示的c1及如seq?id?no:4所示的c2。
3、第二方面，實施例公開了一種試劑盒，包括第一方面所示的引物組。
4、第
5、第四方面，實施例公開了第一方面所述的引物組或第二方面所述的試劑盒在檢測羊口瘡病毒和羊痘病毒中的應用。
6、與現有技術相比，實施例提供的了檢測羊口瘡病毒和羊痘病毒的引物組、試劑盒、方法及應用至少具有以下技術效果：
7、本申請可以快速地對待檢樣品是否感染羊口瘡病毒和羊痘病毒進行鑒定和檢測檢測，對于10-6稀釋度的待檢樣品仍具有較高的靈敏度。本申請可以組裝成臨床檢測羊口瘡病毒和羊痘病毒病原的雙重pcr檢測試劑盒，供獸醫臨床和實驗室檢測所用。本申請對非羊痘病毒屬病毒dna無擴增，具有較高的特異性，假陽性率低。
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1.檢測羊口瘡病毒和羊痘病毒的引物組，包括如SEQ?ID?NO:1所示的O1、如SEQ?ID?NO:2所示的O2、如SEQ?ID?NO:3所示的C1及如SEQ?ID?NO:4所示的C2。
2.一種試劑盒，包括如權利要求1所述的引物組。
3.根據權利要求2所述的試劑盒，還包括包括PCRmix試劑。
4.一種檢測羊口瘡病毒和羊痘病毒的方法，包括：
5.根據權利要求4所述的方法，所述PCR反應體系以25μL計包含：待測樣本5μL，12.5μL的2×Taq?PCR?Mix，1μL、5μmol/μL的引物O1，1μL、5μmol/μL的引物O2，1μL、5μmol/μL的引物C1，1μL、5μmol/μL的引物，1μL、5μmol/μL的引物C2以及余量的雙蒸水。
6.根據權利要求4所述的方法，所述PCR反應步驟包括：94℃預變性2min，95℃30s，56℃30s，72℃20s，40個循環后，72℃延伸5min。
7.根據權利要求4所述的方法，若電泳條帶顯示有916bp的條帶，則確認所述待測樣本為含有羊口瘡病毒的樣本
8.根據權利要求4所述的方法，若電泳條帶顯示有如SEQ?ID?NO:5所示的條帶，則確認所述待測樣本為含有羊口瘡病毒的樣本；
9.如權利要求1所述的引物組或如權利要求2或3所述的試劑盒在檢測羊口瘡病毒和羊痘病毒中的應用。
...【技術特征摘要】
1.檢測羊口瘡病毒和羊痘病毒的引物組，包括如seq?id?no:1所示的o1、如seq?id?no:2所示的o2、如seq?id?no:3所示的c1及如seq?id?no:4所示的c2。
2.一種試劑盒，包括如權利要求1所述的引物組。
3.根據權利要求2所述的試劑盒，還包括包括pcrmix試劑。
4.一種檢測羊口瘡病毒和羊痘病毒的方法，包括：
5.根據權利要求4所述的方法，所述pcr反應體系以25μl計包含：待測樣本5μl，12.5μl的2×taq?pcr?mix，1μl、5μmol/μl的引物o1，1μl、5μmol/μl的引物o2，1μl、5μmol/μl的引物c...
【專利技術屬性】
技術研發人員：耿慶華，史喜菊，啜微微，李成鏞，魏澍，付海濱，
申請(專利權)人：沈陽海關技術中心，
類型：發明
國別省市：
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