【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及生物醫藥，尤其涉及一種新型睪丸長形精子標記物檢測試劑盒的制備方法。
技術介紹
1、果蠅睪丸長形精子的延伸過程包含了一系列高度復雜和保守的生物學事件，而軸絲組裝、個體化復合體形成和線粒體衍生物維持是其中的關鍵事件，為雄性生育能力提供了重要的結構基礎。在精子生長過程的后期階段，以肌動蛋白為基礎的個體化復合體結構在長形精子細胞核周圍形成并沿著長形精子尾部移動，期間形成一個體積龐大的囊性隆起，并將大部分胞質聚集到長形精子包囊底部的廢物袋內。已經證實一些調控因子參與了長形精子的延伸過程，v-atpases是一種常見的轉運蛋白，最初是從真菌和植物的溶酶體及液泡中發現的atp驅動型質子泵，在許多生物中普遍存在，研究發現v-atpases從低等動物到高等動物均高度保守，參與了多種生物學過程，包括胞內轉運、生物分子合成和加工、ph穩態和營養物質的攝取、骨重塑、腫瘤細胞侵襲和精子成熟等過程，這些功能主要是由v-atpase在細胞定位上的多樣性決定的。近年來的研究發現，v-atpase在生殖系統中也發揮了重要作用，通過全基因組篩選研究發現，v-atpase相關因子vha16-1、vha44、vha13和vhaac45在果蠅睪丸生殖干細胞和包囊干細胞的維持和分化中發揮了關鍵作用。本專利技術研究發現vha68-3是液泡h+atpase?68kd亞基，可作為睪丸特異性表達蛋白，且在睪丸長形精子尾部結構存在較高富集，利用該特性可以制備睪丸長形精子尾部結構檢測試劑盒。
技術實現思路
1、解決的技術問
2、技術方案：本專利技術所述的一種睪丸長形精子尾部標記物檢測方法，通過檢測睪丸組織中vha68-3蛋白特異性表達作為睪丸長形精子尾部的檢測方法。vha68-3蛋白在制備新型睪丸長形精子尾部標記物檢測試劑盒中的應用，該試劑盒以檢測睪丸組織中vha68-3蛋白的表達模式作為新型睪丸長形精子尾部延伸過程的標志物。
3、優選地，所述試劑盒以在睪丸組織中特異性表達vha68-3蛋白作為睪丸長形精子尾部檢測方法。
4、優選地，所述試劑盒利用vha68-3蛋白特異性抗體來檢測睪丸組織中vha68-3蛋白第18-33位氨基酸asnedrarnsgslnqd-c的表達水平。
5、優選地，所述樣本組織為果蠅睪丸組織。
6、優選地，所述試劑盒采用免疫熒光染色方法分析檢測睪丸組織樣本中vha68-3蛋白第18-33位氨基酸asnedrarnsgslnqd-c的表達模式。
7、與現有技術相比，本專利技術至少具有以下突出的優點：
8、1、本專利技術利用vha68-3可作為睪丸特異性表達蛋白，vha68-3是液泡h+atpase68kd亞基，且在睪丸長形精子尾部結構存在較高富集，利用該特性可以制備睪丸長形精子尾部結構檢測試劑盒；
9、2、該檢測試劑盒通過檢測睪丸組織中vha68-3蛋白的表達模式可以有效判斷睪丸長形精子延伸過程的分化情況，vha68-3蛋白作為一種新型睪丸特異性表達蛋白，利用其制備的試劑盒可有效應用于睪丸長形精子尾部表達分布情況的檢測，對睪丸長形精子延伸過程具有重要應用價值。
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1.一種睪丸長形精子尾部標記物檢測方法，其特征在于，通過檢測睪丸組織中Vha68-3蛋白特異性表達作為睪丸長形精子尾部的檢測方法。
2.一種新型睪丸長形精子尾部標記物檢測試劑盒的制備方法，其特征在于，所述試劑盒以在睪丸組織中特異性表達Vha68-3蛋白作為睪丸長形精子尾部檢測方法。
3.根據權利要求2所述的新型睪丸長形精子尾部標記物檢測試劑盒的制備方法，其特征在于，所述試劑盒利用Vha68-3蛋白特異性抗體來檢測睪丸組織中Vha68-3蛋白第18-33位氨基酸ASNEDRARNSGSLNQD-C的表達水平。
4.根據權利要求2所述的新型睪丸長形精子尾部標記物檢測試劑盒的制備方法，其特征在于，所述樣本組織為果蠅睪丸組織。
5.根據權利要求3所述的新型睪丸長形精子尾部標記物檢測試劑盒的制備方法，其特征在于，所述試劑盒采用免疫熒光染色方法分析檢測睪丸組織樣本中Vha68-3蛋白第18-33位氨基酸ASNEDRARNSGSLNQD-C的表達模式。
【技術特征摘要】
1.一種睪丸長形精子尾部標記物檢測方法，其特征在于，通過檢測睪丸組織中vha68-3蛋白特異性表達作為睪丸長形精子尾部的檢測方法。
2.一種新型睪丸長形精子尾部標記物檢測試劑盒的制備方法，其特征在于，所述試劑盒以在睪丸組織中特異性表達vha68-3蛋白作為睪丸長形精子尾部檢測方法。
3.根據權利要求2所述的新型睪丸長形精子尾部標記物檢測試劑盒的制備方法，其特征在于，所述試劑盒利用vha68-3蛋白特異性抗體來檢測睪丸組織中...
【專利技術屬性】
技術研發人員：于駿，孫斐，付楊博，何磊，黃秋汝，李嘉欣，
申請(專利權)人：南通大學，
類型：發明
國別省市：
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