【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及體外診斷試劑化學發光，尤其涉及一種雌二醇化學發光酶免疫檢測酶標稀釋液及其制備方法。
技術介紹
1、雌二醇(estradiol，e2)是一種甾體類雌激素，在性激素中含量最多，為人體雌激素的主要組成部分。有α，β兩種類型，α型生理作用強。雌二醇主要由女性卵巢的卵泡、黃體分泌，由男性的腎上腺皮質分泌。雌二醇不僅有促進和維持女性生殖器官和第二性征的生理作用，并對內分泌系統、心血管系統、機體的代謝、骨骼的生長和發育，皮膚等各方面均有明顯的影響。臨床上，血清雌二醇水平反映女性卵巢活動，是監測卵泡成熟和卵巢過度刺激綜合征的重要指標，有助于閉經、月經功能障礙以及產雌激素腫瘤、性早熟等疾病的診斷。雌二醇增多常見于妊娠期婦女、女性性早熟、月經不調、卵巢腫瘤、甲亢及肝硬化；雌二醇減少則常引起女性性幼稚癥、青春期延遲、繼發性閉經等。
2、目前雌二醇檢測方法主要有酶聯免疫吸附法、化學發光免疫分析、放射免疫分析、免疫層析試紙條等。其中化學發光免疫分析是基于抗原抗體的特異性反應，通過夾心法或競爭法反應釋放化學發光信號來檢測樣品中雌二醇的濃度。同時，該方法靈敏度高、特異性強、線性范圍寬和重復性較好，可以利用全自動化學發光儀實現全自動高通量檢測。
3、在體外診斷試劑所用的原料中，抗體、抗原、酶等蛋白質是最為重要的關鍵原料。其所具有的特異性結合、催化反應功能，對在預處理、貯存、使用加工等操作過程中存在的潛在有害影響非常敏感。為了保證診斷檢測的有效期和精確性，這些原料蛋白必須保持穩定和有效。因此，在診斷試劑中必須要添加適當的蛋白
4、通常堿性磷酸酶標記的雌二醇抗體在使用時均需稀釋上千倍的體積，手動操作易存在誤差，導致批間差異，且需要在-20℃以及更低溫度條件下貯藏，反復凍融易降低其穩定性及免疫活性。而保存在溶液狀態，使抗體不穩定的潛在因素將會增多。因此，開發一種雌二醇酶標抗體在工作液時能穩定使用及儲藏的稀釋液是十分必要的。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種雌二醇化學發光酶免疫檢測酶標稀釋液及其制備方法，旨在解決現有的酶標稀釋液穩定性較差的問題。
2、為實現上述目的，第一方面，本專利技術提供了一種雌二醇化學發光酶免疫檢測酶標稀釋液制備方法，包括以下步驟：
3、取配制量80％的純化水，稱取并向純化水中加入相應質量的mes緩沖液、氯化鈉，調節至預設的ph值，得到混合液；
4、向所述混合液中加入氯化鋅、氯化鎂、酪蛋白、葡聚糖500、tx405、pc300攪拌混合，并用純化水定容至100％，得到定溶液；
5、通過尼龍濾膜對靜置后的所述定溶液進行過濾，得到稀釋液。
6、其中，在“取配制量80％的純化水，稱取并向純化水中加入相應質量的mes緩沖液、氯化鈉，調節至預設的ph值，得到混合液”中，所述純化水的配置溫度為25±3℃；所述預設ph值為6.8。
7、其中，在“向所述混合液中加入氯化鋅、氯化鎂、酪蛋白、葡聚糖500、tx405、pc300攪拌混合，并用純化水定容至100％，得到定溶液”中，所述攪拌混合的時長為30min。
8、其中，在“通過尼龍濾膜對靜置后的所述定溶液進行過濾，得到稀釋液”中，所述尼龍濾膜為0.2μm尼龍濾膜，所述靜置時長為30min。
9、第二方面，一種雌二醇化學發光酶免疫檢測酶標稀釋液，采用第一方面所述的雌二醇化學發光酶免疫檢測酶標稀釋液制備方法，
10、包括100mm的mes、0.9％的氯化鈉、0.01mm的氯化鋅、5mm的氯化鎂、0.2％的酪蛋白、0.5％的葡聚糖500、0.05％的tx405、0.05％的pc300，且緩沖液的ph為6.8。
11、本專利技術的一種雌二醇化學發光酶免疫檢測酶標稀釋液制備方法，包括以下步驟：取配制量80％的純化水，稱取并向純化水中加入相應質量的mes緩沖液、氯化鈉，調節至預設的ph值，得到混合液；向所述混合液中加入氯化鋅、氯化鎂、酪蛋白、葡聚糖500、tx405、pc300攪拌混合，并用純化水定容至100％，得到定溶液；通過尼龍濾膜對靜置后的所述定溶液進行過濾，得到稀釋液。通過對酶標稀釋液中的緩沖鹽成分、蛋白、糖類、表面活性劑等優化，能夠提高試劑熱穩定性、效價、線性及精密度，添加酪蛋白和葡聚糖500能夠將e2酶標抗體在工作液時的加速穩定性提高95％以上。與商業酶稀相比具有更優的性能，降低企業生產成本，從而解決了現有的酶標稀釋液穩定性較差的問題。
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1.一種雌二醇化學發光酶免疫檢測酶標稀釋液制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.如權利要求1所述的雌二醇化學發光酶免疫檢測酶標稀釋液制備方法，其特征在于，在“取配制量80％的純化水，稱取并向純化水中加入相應質量的MES緩沖液、氯化鈉，調節至預設的pH值，得到混合液”中，所述純化水的配置溫度為25±3℃；所述預設pH值為6.8。
3.如權利要求1所述的雌二醇化學發光酶免疫檢測酶標稀釋液制備方法，其特征在于，在“向所述混合液中加入氯化鋅、氯化鎂、酪蛋白、葡聚糖500、TX405、PC300攪拌混合，并用純化水定容至100％，得到定溶液”中，所述攪拌混合的時長為30min。
4.如權利要求1所述的雌二醇化學發光酶免疫檢測酶標稀釋液制備方法，其特征在于，在“通過尼龍濾膜對靜置后的所述定溶液進行過濾，得到稀釋液”中，所述尼龍濾膜為0.2μm尼龍濾膜，所述靜置時長為30min。
5.一種雌二醇化學發光酶免疫檢測酶標稀釋液，采用權利要求1-4任一項所述的雌二醇化學發光酶免疫檢測酶標稀釋液制備方法，其特征在于，
【技術特征摘要】
1.一種雌二醇化學發光酶免疫檢測酶標稀釋液制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.如權利要求1所述的雌二醇化學發光酶免疫檢測酶標稀釋液制備方法，其特征在于，在“取配制量80％的純化水，稱取并向純化水中加入相應質量的mes緩沖液、氯化鈉，調節至預設的ph值，得到混合液”中，所述純化水的配置溫度為25±3℃；所述預設ph值為6.8。
3.如權利要求1所述的雌二醇化學發光酶免疫檢測酶標稀釋液制備方法，其特征在于，在“向所述混合液中加入氯化鋅、氯化鎂、酪蛋白...
【專利技術屬性】
技術研發人員：呂荔娟，石小琪，管志平，
申請(專利權)人：桂林優利特醫療電子有限公司，
類型：發明
國別省市：
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